朱正華 王喆 張馨

【摘 要】 目的：建立曲靖市栽培半夏的客觀、量化質(zhì)控標準數(shù)據(jù)，為科學評價和有效控制其質(zhì)量提供可靠的方法。方法：以《中國藥典》2015年版方法為參考依據(jù)，對曲靖栽培半夏的質(zhì)量進行研究，包括植物形態(tài)、藥材外觀性狀、顯微特征、薄層色譜鑒別、水分檢查、總灰分檢查、浸出物檢查和總酸含量測定。結(jié)果：不同產(chǎn)地的3批次半夏檢驗結(jié)果除總灰分檢查超標外，其他幾項鑒別、檢查和含量測定均符合《中國藥典》2015年版規(guī)定。結(jié)論：研究對曲靖市栽培半夏質(zhì)量控制以及實現(xiàn)規(guī)范化種植提供了參考依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 栽培半夏;曲靖市;質(zhì)量考察

【中圖分類號】 ? 【文獻標志碼】 A ? ?【文章編號】1007-8517（2020）12-0025-05

Abstract：ObjectiveTo establish real estate of pinellia objective and quantitative quality control standards from Qujing ，for scientific evaluation and provide reliable methods to effectively control its quality. Methods Based on the "Chinese Pharmacopoeia" 2015 version，study of qujing pinellia tuber production quality control methods，including plant morphology，medicinal material appearance，microscopic characteristics，TLC，moisture inspection，the inspection of the total ash content，extract inspection and total acid content determination.Results 3 batches pinellia test samples in addition to the total ash content check overweight，several other identification，examination and content determination of all conform to the stipulations of the Chinese pharmacopoeia 2015 version. ConclusionThe method can be used for quality control and provide a valueable reference for good agriculture practice of pinellia ternata in Qujing.

Keywords：Cultivated Pinellia Ternata; Qujing;Quality Inspection

半夏之名始見于《禮記·月令》，“五月半夏生，蓋當夏半也”，《本草綱目》及《神農(nóng)本草經(jīng)》等經(jīng)典著作中均有記載。依據(jù)其附圖及文字說明即可確定本草半夏與2015版《中國藥典》記載的半夏為同一種屬。半夏（Pinellia ternata）屬天南星目天南星科半夏屬植物，古稱地文、守田等，云南又名地珠半夏，藥用部位為其干燥塊莖。野生于山地、農(nóng)田、溪邊或林下[1]，云南屬主產(chǎn)區(qū)之一。半夏喜溫和潮濕、蔭蔽的沙壤土環(huán)境，怕干旱及強光照射，耐寒，塊莖能夠自然越冬。繁殖主要以塊莖和珠芽為主。半夏為多年生草本，塊莖球形，夏、秋二季采挖，洗凈，除去外皮和須根，曬干即可入藥。塊莖含有揮發(fā)油如：茴香腦，檸檬醛、1-新烯、β-辛香烯等。還含有有機酸、生物堿、微量元素等[2]。味辛、性溫，有毒。歸脾、胃、肺經(jīng)。因半夏有毒性，其對眼、咽喉、胃腸等粘膜具有強烈的刺激性。故內(nèi)服入藥前須炮制去毒，保證其藥用的安全、有效。根據(jù)炮制方法的不同，分為法半夏、姜半夏、清半夏、醋制半夏等。具有燥濕化痰、降逆止吐、消痞散結(jié)等作用。用于治療濕痰寒痰，咳喘痰多，痰飲眩悸，風痰眩暈，胸悶脹滿、惡心嘔吐。外用治癰腫痰核[3]。

曲靖市屬半夏主產(chǎn)區(qū)之一，傳統(tǒng)以野生半夏入藥，但由于野生半夏資源日趨減少，不能滿足臨床需要，故需發(fā)展半夏的家種栽培來緩解半夏市場的供需矛盾[4]。半夏的主要活性成份為多種生物堿、氨基酸[5]，本文以《中國藥典》2015年版為依據(jù)通過對曲靖產(chǎn)半夏的原植物形態(tài)、藥材外觀性狀、顯微特征、薄層色譜鑒別、總酸含量測定等多個指標的研究，從而確定家種半夏的質(zhì)量，為曲靖市地產(chǎn)半夏的人工種植、開發(fā)利用及臨床應用提供理論依據(jù)。

藥材來源： A：富源縣后所鎮(zhèn)鐵翅藥材種植基地B：師宗縣丹鳳鎮(zhèn)藥材種植基地C：沾益縣炎方鄉(xiāng)藥材種植基地

1 儀器與材料

1.1 儀器 OLYMPUS電子顯微鏡（日本）;瑞士萬通916型全自動電位滴定儀;METTLER TOLEDO XS 105電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司）;HH-4型數(shù)顯恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）;AS系列超聲波清洗機（天津奧特賽恩斯儀器有限公司）。

1.2 材料 半夏對照藥材（批號：121272-201806）、纈氨酸對照品（批號：140681-201703）、亮氨酸對照品（批號：140687-201804）、精氨酸對照品（批號：140685-201707）、丙氨酸對照品（批號：140680-201604）等均為中國食品藥品檢定研究院提供;硅膠G薄層板（青島海洋化工廠）;甘油（丙三醇）、乙醇、石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、丙酮、甲酸、甲醇、乙醚、三氯甲烷、硫酸、正丁醇、冰醋酸、茚三酮、氫氧化鈉為國產(chǎn)分析純;水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 鑒別

2.1.1 原植物形態(tài)鑒別 塊莖圓球形，直徑1～2 cm，具須根。葉2～5枚，幼時單葉。葉柄長5～8 cm，基部具鞘，鞘內(nèi)、鞘部以上或葉片基部（葉柄頂頭）有直徑3～5 mm的珠芽，珠芽在母株上萌發(fā)或落地后萌發(fā);幼苗葉片卵狀心形至戟形，為全緣單葉，長2～3 cm，寬2～2.5 cm;老株葉片3全裂，裂片綠色，背淡，長圓狀橢圓形或披針形，兩頭銳尖，中裂片長3～10 cm，寬1～3 cm;側(cè)裂片稍短;全緣或具不明顯的淺波狀圓齒，側(cè)脈8～10對，細弱，細脈網(wǎng)狀，密集，集合脈2圈?；ㄐ虮L25～30（-35）cm，長于葉柄。佛焰苞綠色或綠白色，管部狹圓柱形，長1.5～2 cm;檐部長圓形，綠色，有時邊緣青紫色，長4～5 cm，寬1.5 cm，鈍或銳尖。肉穗花序：雌花序長2 cm，雄花序長5～7 mm，其中間隔3 mm;附屬器綠色變青紫色，長6～10 cm，直立，有時“S”形彎曲。漿果卵圓形，黃綠色，先端漸狹為明顯的花柱?；ㄆ?～7月，果8月成熟。結(jié)果：A、B、C三個樣品的原植物形態(tài)均符合以上描述，經(jīng)鑒定均為藥典品半夏Pinellia ternata（Thunb.）Breit.

2.1.2 性狀鑒別 本品呈類球形，有的稍偏斜，直徑1～1.5 cm。表面白色或淺黃色，頂端有凹陷的莖痕，周圍密布麻點狀根痕;下面鈍圓，較光滑。質(zhì)堅實，斷面潔白，富粉性。氣微，味辛辣、麻舌而刺喉。具體見圖1。此外，在云南很多地方有半夏的習用品、代用品。如盾葉半夏、土半夏、掌葉半夏等，均為民間習用草藥，在用法和功效上也與藥典半夏有所不同，不能混用，以免影響半夏的臨床療效。

2.1.3 顯微鑒別 本品粉末類白色：①淀粉粒：甚多，單粒類圓形、半圓形或圓多角形，臍點裂縫狀、人字狀或星狀;復粒由2～6分粒組成。②草酸鈣針晶：成束存在于橢圓形黏液細胞中，或隨處散在，針晶長20～144 μm。③導管：螺紋為主，直徑10～24 μm。 粉末顯微圖見圖2。

2.1.4 薄層色譜鑒別 取本品粉末1 g，加乙醇10 mL，加熱回流1 h，濾過，濾液濃縮至0.5 mL，作為供試品溶液。另取半夏對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取上述兩種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯-丙酮-甲酸（30∶ 6∶ 4∶ 0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。如圖3。

取本品粉末1 g，加甲醇10 mL，加熱回流30 min，濾過，濾液揮至0.5 mL，作為供試品溶液。另取精氨酸對照品、丙氨酸對照品、纈氨酸對照品、亮氨酸對照品，加70%甲醇制成每1 mL各含1 mg 的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取供試品溶液5 μL、對照品溶液1 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（8∶ 3∶ 1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。如圖4。

2.2 檢查

2.2.1 水分 水分測定按照2015年版《中國藥典》四部（通則0832）第二法（烘干法）測定三批藥材水分，規(guī)定本品水分不得超過14.0%，結(jié)果A、B、C三個樣品的水分均符合規(guī)定。結(jié)果見表1。

2.2.2 總灰分[8] 按照灰分測定法《中國藥典》2015年版四部（通則2302） 測定三批藥材總灰分，規(guī)定本品總灰分不得超過4.0%，結(jié)果A、B、C三個樣品的總灰分均超過規(guī)定限度，不符合規(guī)定。見表2。

2.2.3 浸出物[6] 按照水溶性浸出物項下的冷浸法，《中國藥典》2015年版四部（通則2201）測定三批藥材浸出物，規(guī)定本品水溶性浸出物不得少于9.0%，結(jié)果A、B、C三個樣品的浸出物均符合規(guī)定。見表3。

2.3 含量測定[7] 采用直接電位滴定法測定總酸含量。取本品粉末（過四號篩）約5 g，精密稱定，置錐形瓶中，加乙醇50 mL，加熱回流1 h，同上操作，再重復提取2次，放冷，濾過，合并濾液，蒸干，殘渣精密加入氫氧化鈉滴定液（0.1 mol/L）10 mL，超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）30 min，轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，加新沸過的冷水至刻度，搖勻，精密量取25 mL，照電位滴定法（通則0701）測定，用鹽酸滴定液（0.1 mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白實驗校正。每1 mL氫氧化鈉滴定液（0.1 mol/L）相當于5.904 mg的琥珀酸（C4H6O4）。本品按干燥品計算，含總酸以琥珀酸（C4H6O4）計，不得少于0.25%，結(jié)果A、B、C三個樣品的總酸含量均符合規(guī)定。見表4。

3 討論

研究從原植物形態(tài)、藥材性狀、顯微鑒別[11]、薄層色譜鑒別、水分檢查、總灰分檢查、浸出物檢查、總酸的含量測定這幾方面來對比考察曲靖栽培半夏的藥用質(zhì)量，除總灰分測定超出規(guī)定限度以外，其他幾項均符合2015年版《中國藥典》的要求。

浸出物分別以水、乙醇和甲醇為溶劑，照水溶性浸出物項下的冷浸法和熱浸法測定。實測藥材3批結(jié)果表明，采用水為溶劑，熱浸法與冷浸法的浸出物較高，且差異不大。根據(jù)方便快捷、可行性高為原則，本標準選擇水溶性浸出物項下的冷浸法[6]。

酸堿滴定法一般常用于中藥中總有機酸含量的測定，但由于中藥的水提液或醇提液常常具有較深的顏色，指示劑的選擇受到了限制，同時滴定終點指示不明顯，影響實驗的準確性。而電位滴定法是利用電極電位的突躍來指示終點的，并可實現(xiàn)自動化和連續(xù)滴定，具有靈敏、準確、可靠等優(yōu)點[7]，因此用直接電位法對半夏中總游離有機酸含量進行測定。半夏中所含化學成分比較復雜，如還含有多種氨基酸和生物堿，炮制品法半夏中還含有甘草次酸等，其有效成分及毒性成分尚未完全明確[10]，所以現(xiàn)在只能以含量偏高、樣品處理方法不太繁雜、檢測成本不高的總酸為其控制指標，隨著檢測技術(shù)的不斷提高，對其有效成分及毒性成分的含量測定會不斷走向科學化、標準化和成熟化。

質(zhì)量檢測中總灰分的測定超標，灰分測定是衡量中藥材質(zhì)量的重要指標，它反應了藥材中摻假及其受污染的程度，一般中藥材的總灰分通常都在一定的范圍內(nèi)，故可用于中藥材的純度檢查[8]。實驗測定三批次供試品的總灰分測定結(jié)果均超出《中國藥典》2015年版規(guī)定的中藥材總灰分的最高限量，則必定有其他無機物污染或摻雜，常見的無機物為泥土、砂。根據(jù)對采集樣品的仔細觀察比較，發(fā)現(xiàn)其塊莖上殘留少許須根及未洗凈的泥沙，分析原因應為農(nóng)民在半夏的采收并進行粗加工的過程中，未除盡非藥用部位（須根等）、未洗凈泥沙等其它雜質(zhì)[9]，排除總灰分這一影響因素，曲靖地區(qū)栽培半夏質(zhì)量符合藥用標準，可推廣半夏的家種栽培，并制定一套切實可行的管理措施以確保其質(zhì)量。參考文獻

[1]劉承訓.半夏的種植管理與加工[J]. 四川農(nóng)業(yè)科技，2008（7）：40.

[2]張愛民，盧河東，朱艷芳，等.半夏的研究進展[A]. 2010全國知名中醫(yī)院院長暨道家文化與中醫(yī)藥養(yǎng)生論壇論文集[C]. 2010.

[3]王新勝，吳艷芳，馬軍營，等.半夏化學成分和藥理作用研究[J]. 齊魯藥事，2008（2）：101-103.

[4]潘平，李偉平，熊明星，等.我國半夏產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及可持續(xù)發(fā)展策略[J]. 中國藥房，2013（31）：7-10.

[5]李玉先，劉曉東，朱照靜.半夏藥理作用的研究述要[J]. 遼寧中醫(yī)學院學報，2004（6）：459-460.

[6]陳紅軍，劉紀青.炮制對半夏及其炮制品浸出物的影響研究[J]. 中國醫(yī)藥科學，2011（17）：46-47.

[7]王媚，吳皓.直接電位滴定法測定半夏提取物中總游離有機酸的含量[J]. 中國中醫(yī)藥信息雜志，2004（5）：416-417.

[8]姚麗紅.淺談中藥材的灰分含量[J].基層中醫(yī)藥雜志，1996（3）：15-18.

[9]賈君君，李婷，李敏，等.影響半夏產(chǎn)量因素淺析[A]. 中華中醫(yī)藥學會第九屆中藥鑒定學術(shù)會議論文集——祝賀中華中醫(yī)藥學會中藥鑒定分會成立二十周年[C]. 2008.

[10]鐘凌云，吳浩，張科衛(wèi)，等.生半夏中草酸鈣針晶的刺激性作用研究[J]. 中國中藥雜志， 2006（20）：1706-1710.

[11]于素玲，李敏，甘我挺，等.組培半夏與傳統(tǒng)栽培半夏性狀、顯微的比較研究[J]. 中藥與臨床，2011（7）：14-17.

[12]中國藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部、四部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

（收稿日期：2020-03-20 編輯：劉 斌）