馬 瑩
(遼寧省林業(yè)發(fā)展服務(wù)中心,遼寧 沈陽 110036)
土壤退化、鹽漬化成為當(dāng)今農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)所面臨的重大問題。如果現(xiàn)有鹽漬化土地得不到及時有效地改良和治理,那么,到 21 世紀中葉,約有50%的可耕種土地會受到土壤鹽堿化的影響[1]。鹽漬化土壤中各種鹽分的過量積累都可以對植物生長發(fā)育造成諸多不利影響甚至死亡。從目前的鹽堿地類型來看,NaCl是最普遍的鹽脅迫形式[2]。有研究表明,植物在受到外界脅迫(如干旱和鹽堿),體內(nèi)會產(chǎn)生大量的活性氧(ROS),而植物體內(nèi)的抗氧化酶活性高低直接決定植物對ROS的祛除能力,進而反映植物面對環(huán)境脅迫的適應(yīng)能力[3-5]。
樟子松Pinussylvestrisvar.mongolica,具有抗旱、耐瘠薄和速生等特點,在我國東北地區(qū)尤其是遼寧西部,主要用于防風(fēng)固沙、改善生態(tài)環(huán)境等,在生態(tài)環(huán)境改良、生態(tài)文明建設(shè)等領(lǐng)域發(fā)揮著不可替代的作用。然而樟子松的生態(tài)區(qū)域常常存在干旱和土壤鹽化,因此有必要對樟子松苗木耐鹽性進行系統(tǒng)評價,以期為未來發(fā)展樟子松進行鹽堿地修復(fù)奠定基礎(chǔ)。
樟子松種子用1% KMnO4溶液消毒20 min,然后用無菌水漂洗數(shù)次,置于無菌濕潤濾紙上,放在人工氣候箱中催芽。待其萌發(fā)后,播種于裝有500 g草炭土的花盆(13 cm×15 cm)中,每盆播種 30粒左右。
采用隨機區(qū)組設(shè)計,在溫室中進行,4月中旬播種,樟子松苗木生長3個月后對其進行鹽脅迫處理,NaCl設(shè)0、50和100 mmol·L-13個處理,每盆10株苗,每個處理5盆。每個處理10次重復(fù)。3個濃度的NaCl溶液分別澆入對應(yīng)的盆中,每盆澆50 mL。每隔3天處理1次,連續(xù)處理3次。然后各處理進行正常管理,且澆水保持不外流,隨機擺放,生長環(huán)境一致。待苗木繼續(xù)生長1個月后,對其進行收獲。
收獲時,每個處理隨機選取5株,用流水清洗干凈,吸干水分,將植株置于烘箱中80 ℃烘干至恒質(zhì)量,測定干質(zhì)量。
用液氮速凍樟子松葉片,然后在研缽中加入液氮磨成粉末,置于-80 ℃超低溫冰箱中保存?zhèn)溆?。超氧化物歧化?SOD)、過氧化物酶(POD)和抗壞血酸過氧化物酶(APX)含量采用南京建成生物公司的試劑盒測定,具體操作按照說明書進行。
如圖1所示,隨著NaCl濃度升高,樟子松苗木干質(zhì)量逐漸降低。其中,100 mmol·L-1NaCl處理較對照降低了60%,且下降趨勢十分顯著。由此可以看出,鹽脅迫對樟子松的生長產(chǎn)生了較強的抑制,但樟子松依然可以正常生長。
圖1 鹽脅迫對樟子松苗木干質(zhì)量的影響
如圖2所示,隨著NaCl脅迫程度加強,樟子松苗木葉片的抗壞血酸過氧化物酶活性逐漸升高。100 mmol·L-1NaCl處理的樟子松苗木葉片抗壞血酸過氧化物酶活性上升較明顯,比對照升高了91%。由此可見,NaCl脅迫可以使樟子松APX活性顯著升高,進而抵御NaCl脅迫帶來的不良環(huán)境。
圖2 鹽脅迫對樟子松苗木APX活性的影響
如圖3所示,隨著NaCl脅迫程度加強,樟子松苗木葉片的POD活性逐漸升高。100 mmol·L-1NaCl處理的樟子松苗木葉片POD 活性比對照升高了107%。由此可見,NaCl脅迫可以使樟子松POD活性顯著升高,進而抵御鹽脅迫的不良環(huán)境。
圖3 鹽脅迫對樟子松苗木POD活性的影響
如圖4所示,隨著NaCl脅迫程度加強,樟子松苗木葉片的SOD活性逐漸升高。100 mmol·L-1NaCl處理的樟子松苗木葉片SOD活性比對照升高了36%。由此可見,NaCl脅迫可以使樟子松SOD活性顯著升高,進而抵御鹽脅迫的不良環(huán)境。
圖4 鹽脅迫對樟子松苗木SOD活性的影響
在植物的正常生長中,所遇到的非生物脅迫,即環(huán)境脅迫是多種多樣的。其中,鹽害是十分常見的環(huán)境脅迫因子,植物也會在高鹽的環(huán)境中受到一定的損害,甚至死亡。本研究中,樟子松苗木在NaCl脅迫下生物量出現(xiàn)了一定程度的下降,但依然能正常生長,說明樟子松對鹽脅迫具有一定的抗性。有研究表明,植物在外界環(huán)境脅迫時,體內(nèi)會積累大量的ROS,這些ROS具有細胞毒性[6-7]。而植物的ROS祛除能力強弱與其體內(nèi)的抗氧化酶活性密切相關(guān)[8-9]。本研究中,樟子松苗木體內(nèi)APX、POD和SOD均隨NaCl濃度的升高而升高??梢娬磷铀蓪aCl脅迫的響應(yīng)較為強烈,上升幅度均達到了顯著差異水平(P<0.05),說明樟子松在NaCl脅迫時,通過大幅度提升抗氧化酶活性而達到抵御不良環(huán)境的目的。該結(jié)果表明,鹽脅迫可以誘導(dǎo)樟子松苗木的抗氧化酶活性上升,進而抵御由于鹽害所導(dǎo)致的細胞損傷,把傷害降到最低。綜合生長和生理指標,NaCl脅迫雖然對樟子松形成了一定程度的損害,但其依然表現(xiàn)出對鹽脅迫的耐受性。本研究結(jié)果可以為樟子松修復(fù)鹽漬化土壤,改良鹽漬土養(yǎng)分奠定基礎(chǔ)。