林鐘石，黃虹蓉，臧德躍，徐煒區(qū)，林柏佑，袁麗欣，徐良，劉堯

深圳市藥品檢驗(yàn)研究院 a. 體外診斷試劑檢測(cè)部；b. 無(wú)源醫(yī)療器械檢測(cè)部；c. 醫(yī)療器械檢測(cè)中心，廣東 深圳 518057

引言

鎳鈦諾合金因擁有良好的抗腐蝕能力、形狀記憶能力和超彈性[1]等特點(diǎn)被作為醫(yī)用材料，主要用于制造可植入器械、臨床檢測(cè)、手術(shù)器械[2]以及部分牙科類器械[3]。但關(guān)于其生物安全性存在一些不確定因素，鎳鈦諾合金中鎳離子的釋放會(huì)引起血栓[4]、炎癥反應(yīng)和毒性效應(yīng)[5]。為了減少鎳鈦諾合金的毒性，國(guó)內(nèi)外學(xué)者嘗試采用多種方法抑制鎳離子的釋放，主要分為表面氧化法[6-8]和表面涂層法[9-12]。其中，表面氧化法是最為經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)單的方法，因?yàn)殒団佒Z合金材料在加工過(guò)程中伴隨高溫，會(huì)形成一層氧化膜。但有研究者認(rèn)為，在普通大氣下的熱氧化法獲得的氧化層均勻度較差，且與基體的結(jié)合力不強(qiáng)；在體內(nèi)腐蝕條件下，循環(huán)負(fù)載可能導(dǎo)致氧化膜破壞[13-14]。但表面涂層法往往耗時(shí)較長(zhǎng)，且過(guò)程復(fù)雜，大部分還僅停留在實(shí)驗(yàn)室研究階段，而且各項(xiàng)改進(jìn)后的鎳鈦諾合金材料都缺乏相應(yīng)的系統(tǒng)性生物安全性評(píng)價(jià)。為了驗(yàn)證普通大氣下熱氧化處理后的鎳鈦諾合金材料作為醫(yī)療器械的生物安全性，本研究中將鎳鈦諾合金材料進(jìn)行塑形處理為鎳鈦合金絲，然后基于一系列GB/T 16886醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估該鎳鈦合金絲的生物安全性，包括細(xì)胞毒性試驗(yàn)、熱原試驗(yàn)、皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)、遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)、血栓形成試驗(yàn)、急性全身毒性試驗(yàn)、亞慢性全身毒性試驗(yàn)、肌肉植入試驗(yàn)、遺傳毒性試驗(yàn)等，從醫(yī)療器械監(jiān)管的角度為表面氧化法處理后的鎳鈦諾合金材料在醫(yī)療器械的制造和應(yīng)用提供系統(tǒng)的安全性依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料和儀器

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物和材料

白化豚鼠（廣州花東信華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖農(nóng)場(chǎng)）；NIH小鼠、新西蘭兔（廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心）；比格犬（廣東前沿生物科技有限公司）；SD大鼠（北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司）。鎳鈦諾合金材料（蘇州天鴻盛捷醫(yī)療器械有限公司）。L929細(xì)胞、L5178Y TK+/-小鼠淋巴瘤細(xì)胞、中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞（中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫(kù)）；鼠傷寒沙門氏組氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102和TA1535菌株（美國(guó)Moltox公司）。

1.1.2 鎳鈦合金絲的制備

將鎳鈦諾合金材料（含有大約53%～57%的鎳和不超過(guò)1%的碳鈷銅等雜質(zhì)，余量為鈦）經(jīng)過(guò)大約500℃的高溫熔化塑形成絲，然后放入無(wú)菌蒸餾水中淬滅成型，最后放入無(wú)菌容器中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.3 儀器

CO2培養(yǎng)箱（Mermert GmbH，德國(guó)）；倒置顯微鏡、正置顯微鏡（Leica Microsystems，德國(guó)）；酶標(biāo)儀、生物組織脫水機(jī)、石蠟組織包埋機(jī)、自動(dòng)組織切片機(jī)、自動(dòng)組織烤片機(jī)、自動(dòng)組織攤片機(jī)（Thermo Fisher Scientific，美國(guó)）；自動(dòng)生化分析儀（Beckman Coulter，美國(guó)）；自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（Sysmex，日本）；染色、封片和烤片一體機(jī)（Roche，美國(guó)）；展片機(jī)（Microm GmbH，德國(guó)）；掃描電子顯微鏡（JEOL，日本）。

1.1.4 試驗(yàn)材料浸提液制備

分別用非極性浸提介質(zhì)（棉籽油、含血清培養(yǎng)基、二甲基亞砜）和極性浸提介質(zhì)（生理鹽水、不含血清的培養(yǎng)基）按照6 cm2/mL的比例對(duì)鎳鈦合金絲進(jìn)行浸提。鎳鈦合金絲全部沒(méi)入浸提介質(zhì)中，置于有蓋的離心管中，37℃振蕩浸提72 h。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞毒性試驗(yàn)

將生長(zhǎng)良好的L929細(xì)胞消化，配制成1×105個(gè)/mL濃度細(xì)胞懸浮液加入96孔板中。溫育24 h使細(xì)胞形成半?yún)R合狀態(tài)后，棄去孔中的培養(yǎng)液，每孔加入100 μL的樣品浸提液（浸提介質(zhì)：含血清MEM培養(yǎng)基）、陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照（二甲基亞砜）和空白，繼續(xù)培養(yǎng)24 h。受試24 h后，在顯微鏡下檢查細(xì)胞形態(tài)，記錄下樣品組細(xì)胞形態(tài)的改變。平板檢查完后，移除原培養(yǎng)液。每孔加入50 μL的MTT（噻唑蘭）溶液，并在37℃下孵育2 h，然后棄去。每孔再加入100 μL異丙醇，振蕩混勻后，在570 nm波長(zhǎng)（參比波長(zhǎng)650 nm）下測(cè)量吸光度，并計(jì)算細(xì)胞的存活率[15]。

1.2.2 熱原試驗(yàn)

3只新西蘭兔，試驗(yàn)前測(cè)量體溫作為對(duì)照體溫。在測(cè)量后30 min內(nèi)，以10 mL/kg的劑量從耳緣靜脈注射生理鹽水浸提液。在注射后1～3 h內(nèi)每30 min測(cè)量一次體溫，進(jìn)行總共6次測(cè)量。體溫的最高值減去正常值，便是體溫升高值[16]。

1.2.3 遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗(yàn)

50只豚鼠，隨機(jī)分成極性浸提液（浸提介質(zhì)：生理鹽水）組、極性對(duì)照組、非極性浸提液（浸提介質(zhì)：棉籽油）組、非極性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照（2,4-二硝基氯苯）組共5組。通過(guò)動(dòng)物肩胛骨的內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射0.1 mL進(jìn)行皮內(nèi)誘導(dǎo)。注射液分別為：溶液A（浸提介質(zhì)與弗氏完全佐劑等體積混合的穩(wěn)定性乳化劑）、溶液B（受試溶液）、溶液C（溶液A和溶液B等體積混合后的穩(wěn)定性乳化劑）。

皮內(nèi)誘導(dǎo)6天后，將10%十二烷基硫酸鈉導(dǎo)入測(cè)試部位。24 h后，將吸收試驗(yàn)溶液的介質(zhì)貼敷于誘導(dǎo)注射點(diǎn)以進(jìn)行局部誘導(dǎo)，并在誘導(dǎo)48 h后去除。在局部誘導(dǎo)結(jié)束后13天，將吸收了試驗(yàn)溶液的介質(zhì)貼敷于誘導(dǎo)期的未測(cè)試部分（每只動(dòng)物的上腹部），并于24 h后去除。貼敷結(jié)束后24 h和48 h對(duì)對(duì)照組和試驗(yàn)組激發(fā)部位的皮膚進(jìn)行觀察，參照Magnusson和Kligman分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)超敏反應(yīng)結(jié)果[17]。

1.2.4 皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)

3只新西蘭兔，將0.2 mL極性浸提液（浸提介質(zhì)：生理鹽水）、非極性浸提液（浸提介質(zhì)：棉籽油）皮內(nèi)注射入每只兔子脊柱兩側(cè)的各5個(gè)部位，對(duì)照（浸提介質(zhì)）注射入另一側(cè)對(duì)應(yīng)的各5個(gè)部位。在注射后24、48和72 h時(shí)觀察并記錄每個(gè)皮內(nèi)注射部位的情況，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16886.10中皮內(nèi)反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行反應(yīng)評(píng)分，并記錄試驗(yàn)結(jié)果[17]。

1.2.5 溶血試驗(yàn)

從新西蘭兔心臟收集8 mL血液制備成新鮮抗凝兔血，并用10 mL生理鹽水稀釋。樣品組取樣品加入10 mL生理鹽水，陰性對(duì)照只加入10 mL 生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照只加入10 mL蒸餾水。將所有試管置于37℃水浴中孵育30 min，每支試管加入0.2 mL稀釋兔血，于37℃繼續(xù)保溫60 min后800 g離心5 min，取上清液在545 nm波長(zhǎng)下測(cè)量吸光度，并計(jì)算溶血率[18]。

1.2.6 血栓形成試驗(yàn)

3只實(shí)驗(yàn)用犬麻醉，左側(cè)分離出頸靜脈，右側(cè)分離出頸動(dòng)脈，向心端接入血液回路裝置，將樣品和對(duì)照品（已通過(guò)血栓試驗(yàn)檢測(cè)，批準(zhǔn)上市的相似器械材料）置于回路裝置兩側(cè)固定，保持血液暢通，觀察動(dòng)物在試驗(yàn)期間的臨床狀態(tài)。3 h后，安樂(lè)處死實(shí)驗(yàn)用犬，取下血液回路裝置，觀察樣品和對(duì)照品導(dǎo)致血栓形成情況并記分。將樣品和對(duì)照品用生理鹽水漂洗后，戊二醛固定，乙醇系列脫水，真空干燥后噴金，在掃描電鏡下進(jìn)行觀察[18]。

1.2.7 急性全身毒性試驗(yàn)

小鼠20只，隨機(jī)分成樣品組和對(duì)照組，每組5只。尾靜脈注射極性浸提液（浸提介質(zhì)：生理鹽水），腹腔注射非極性浸提液（浸提介質(zhì)：棉籽油），對(duì)照小鼠注射相同量的浸提介質(zhì)。注射后立即觀察小鼠，并在4、24、48和72 h觀察小鼠，觀察試驗(yàn)組和對(duì)照組的一般狀態(tài)、毒性和死亡動(dòng)物數(shù)，并在72 h觀察后記錄動(dòng)物體重[16]。

1.2.8 肌肉植入試驗(yàn)

新西蘭兔16只（每個(gè)觀察期4只），沿脊柱兩側(cè)肌肉間隔植入6個(gè)樣品。植入后密切觀察創(chuàng)口愈合、攝料、飲水、行為活動(dòng)等情況。植入1、4、12和26周后，目視檢查植入部位的組織反應(yīng)和植入物周圍囊腫的形成。取出植入部位的肌肉，10%的甲醛溶液固定，石蠟包埋，常規(guī)制片，蘇木素伊紅染色，顯微鏡下進(jìn)行組織病理學(xué)觀察[19]。

1.2.9 亞慢性全身毒性試驗(yàn)

大鼠40只，隨機(jī)分成樣品組和對(duì)照組，每組20只，雌雄各半。樣品組按照10 mL/kg BW的劑量經(jīng)大鼠尾靜脈注射樣品浸提液，對(duì)照組注射生理鹽水，每天1次，連續(xù)給予28天。試驗(yàn)期間，在給藥前后觀察大鼠是否存在中毒癥狀。給藥前后及每周稱重1次，并計(jì)算食物攝入量。最后一次給藥后，禁食至少12 h，然后麻醉，動(dòng)脈采血進(jìn)行血液學(xué)檢查和臨床生化檢查并對(duì)大鼠進(jìn)行大體檢查。解剖取出腎上腺、腦等器官，并盡快稱重計(jì)算器官系數(shù)[16]。

四是“好教育進(jìn)行時(shí)”促進(jìn)了好校長(zhǎng)、好教師的成長(zhǎng)。好教育需要好教師，沒(méi)有好的校長(zhǎng)、教師隊(duì)伍，不可能有好教育，不注重校長(zhǎng)、教師隊(duì)伍建設(shè)，不關(guān)注校長(zhǎng)、教師專業(yè)化成長(zhǎng)需求，就不可能有持續(xù)健康的教育發(fā)展態(tài)勢(shì)。好教育一定會(huì)帶來(lái)教育界“群星璀璨”“爭(zhēng)奇斗艷”“繁花似錦”的美好景象。

1.2.10 遺傳毒性試驗(yàn)

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16886.3推薦，采用細(xì)菌基因回復(fù)突變?cè)囼?yàn)和使用小鼠淋巴瘤細(xì)胞進(jìn)行的體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)組合進(jìn)行遺傳毒性試驗(yàn)[20]。

（1）細(xì)菌基金回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)。將鼠傷寒沙門氏組氨酸缺陷型菌株在37℃下振蕩培養(yǎng)以獲得約109個(gè)/mL的菌液。將0.1 mL菌液和0.1 mL受試液加入到頂層培養(yǎng)基中。另外，活化組加入0.5 mL 10% S9混合液，無(wú)活化組加入0.5 mL 0.2 moL/L磷酸鹽緩沖液。設(shè)置2,4,7-三硝基-9-芴酮（TA97 a、TA98，無(wú)活化組）、疊氮化鈉（TA100、TA1535，無(wú)活化組）、絲裂霉素C（TA102，無(wú)活化組）、2-氨基芴（TA97 a、TA98、TA100、TA1535，活化組），1,8-二羥基吲哚（TA102，活化組）為陽(yáng)性對(duì)照，設(shè)置浸提介質(zhì)生理鹽水和二甲基亞砜作為陰性對(duì)照。混合后將每管溶液傾倒在底層培養(yǎng)基上。將平皿置于37℃培養(yǎng)約48 h后，對(duì)菌落計(jì)數(shù)并以平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示。

（2）使用小鼠淋巴瘤細(xì)胞進(jìn)行的體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)。取自發(fā)突變消除后生長(zhǎng)良好的L5178Y TK+/-細(xì)胞，將細(xì)胞濃度調(diào)整為1×106個(gè)/ mL。將10 mL細(xì)胞懸液與9 mL受試液混合。另外，向各組中的活化組中加入1 mL 10% S9混合物，并向未活化組中加入1 mL 150 mmoL/L氯化鉀溶液。將4-硝基喹啉氧化物（無(wú)活化組）和環(huán)磷酰胺（活化組）設(shè)置為陽(yáng)性對(duì)照。將極性浸提介質(zhì)（無(wú)血清培養(yǎng)基）和非極性浸提介質(zhì)（含血清培養(yǎng)基）設(shè)置為陰性對(duì)照。將上述各種混合液分別培養(yǎng)4 h和24 h。接觸結(jié)束后，取部分細(xì)胞制作PE0（第0天平板效率）平板，剩余細(xì)胞調(diào)整濃度后繼續(xù)培養(yǎng)表達(dá)24 h然后制備PE2 （第2天平板效率）板和TFT（三氟胸苷）拮抗平板。所有96孔板培養(yǎng)12天后，計(jì)算PE0、PE2、T-MF（TFT抗性突變的總頻率）和S-MF（TFT抗性突變小集落頻率）。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)胞毒性試驗(yàn)

按照GB/T 16886.5的方法，鎳鈦合金樣品浸提液接觸后的顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)正常與空白對(duì)照無(wú)差別（圖1），且相對(duì)細(xì)胞活性大于70%（圖2），無(wú)潛在的細(xì)胞毒性。

圖1 鎳鈦合金絲細(xì)胞毒性試驗(yàn)顯微鏡觀察結(jié)果

圖2 鎳鈦合金絲細(xì)胞毒性試驗(yàn)MTT檢測(cè)結(jié)果

2.2 熱源試驗(yàn)

按照GB/T 16886.11的方法，鎳鈦合金樣品浸提液注射后的新西蘭兔肛溫升高均不超過(guò)0.5℃，符合《中國(guó)藥典》的規(guī)定，樣品材料沒(méi)有致熱性因子。

2.3 遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗(yàn)

2.4 皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)

按照GB/T 16886.10的方法，樣品組和對(duì)照組動(dòng)物在觀察期內(nèi)的反應(yīng)均為無(wú)紅斑、無(wú)水腫，樣品組和對(duì)照組的總平均評(píng)分之間的差異為0，未觀察到異常的皮內(nèi)反應(yīng)（圖4）。

2.5 溶血試驗(yàn)

按照GB/T 16886.4的方法，樣品組的溶血率為1%，低于5%，與醫(yī)療器械材料溶血率的要求一致。

2.6 血栓形成試驗(yàn)

按照GB/T 16886.4的方法，電子顯微鏡下觀察樣品的血栓大小，分布和組成與對(duì)照品無(wú)顯著性差異（圖5）。

圖3 鎳鈦合金絲遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果

圖4 鎳鈦合金絲皮內(nèi)反應(yīng)72 h試驗(yàn)結(jié)果

圖5 鎳鈦合金絲血栓形成試驗(yàn)電子顯微鏡觀察結(jié)果

2.7 急性全身毒性試驗(yàn)

按照GB/T 16886.11的方法，在72 h觀察期內(nèi)，樣品組和陰性對(duì)照組的動(dòng)物沒(méi)有死亡和毒性反應(yīng)，體重均有增長(zhǎng)，樣品組和對(duì)照組之間無(wú)差異顯著性（圖6）。

圖6 鎳鈦合金絲急性全身毒性檢測(cè)結(jié)果

2.8 肌肉植入試驗(yàn)

觀察期內(nèi)，植入部位創(chuàng)口皮膚愈合良好，植入部位肌肉未見(jiàn)明顯感染、變色、壞死，無(wú)明顯包囊形成。植入26周后，顯微鏡下觀察鎳鈦合金樣品周圍可見(jiàn)薄層的纖維組織形成，局部偶見(jiàn)毛細(xì)血管形成，可見(jiàn)極輕度淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，中度-重度脂肪浸潤(rùn)，與對(duì)照品無(wú)顯著性差異（圖7）。

圖7 鎳鈦合金絲肌肉植入試驗(yàn)顯微鏡觀察結(jié)果

2.9 亞慢性全身毒性試驗(yàn)

連續(xù)給藥的28天內(nèi)，樣品組動(dòng)物狀態(tài)良好，活動(dòng)正常，口鼻未見(jiàn)異常分泌物，排尿和排便沒(méi)有異常，沒(méi)有觀察到毒性反應(yīng)和死亡，與對(duì)照組相比沒(méi)有差異顯著性。樣品組和對(duì)照組之間的體重（圖8）和動(dòng)物飼料消耗（圖9）沒(méi)有差異顯著性。動(dòng)物血液學(xué)指標(biāo)、動(dòng)物血清生化學(xué)指標(biāo)、各器官重量及器官系數(shù)均正常。

圖9 鎳鈦合金絲亞慢性全身毒性試驗(yàn)中動(dòng)物飼料消耗量變化

2.10 遺傳毒性試驗(yàn)

（1）細(xì)菌基因回復(fù)突變?cè)囼?yàn)。與陰性對(duì)照相比，樣品組的回變菌落數(shù)未增加一倍或者一倍以上。鎳鈦合金絲細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)結(jié)果為陰性（表1）。

（2） 體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)。與陰性對(duì)照相比，樣品組的MF值均未出現(xiàn)超過(guò)126×10-6的增長(zhǎng)。鎳鈦合金絲體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)結(jié)果為陰性（表2）。

3 討論

張媛媛等[21]將鎳鈦諾合金的植入體植入豚鼠的聽(tīng)泡，分別于7、14、28、56、112天進(jìn)行觀察，植入體周圍新生組織生長(zhǎng)正常，無(wú)異常組織出現(xiàn)，但新生的組織中含有痕量的鎳。Olson等[22]將鎳鈦諾合金的眼內(nèi)夾固定于豬的虹膜上，采用聚丙烯作為對(duì)照，手術(shù)后8周和10周分別進(jìn)行全視野視網(wǎng)膜電圖掃描和組織學(xué)分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者在角膜厚度、內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量、鏡面顯微鏡參數(shù)、視網(wǎng)膜細(xì)胞數(shù)量和電視曲線圖參數(shù)均無(wú)明顯差異。馮翠娟等[23-24]將鎳鈦諾合金浸提液與L929細(xì)胞接觸，發(fā)現(xiàn)浸提液會(huì)引起L929細(xì)胞的Bax及Bcl-2 mRNA表達(dá)改變、細(xì)胞凋亡率的增加以及總RNA濃度的降低。Yang等[25]將鎳鈦諾合金與內(nèi)皮細(xì)胞接觸，發(fā)現(xiàn)裸露的鎳鈦諾合金對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有任何影響，但從裸露的鎳鈦諾合金中釋放的鎳離子會(huì)影響細(xì)胞肌動(dòng)蛋白骨架、黏著斑、能量代謝、炎癥反應(yīng)和蛋白代謝途徑。Válková等[26]發(fā)現(xiàn)在與鎳鈦諾合金接觸后，有著骨關(guān)節(jié)炎癥的人骨細(xì)胞中的IL-1β因子、IL-8因子、MMP-1因子有顯著性增加。此外，許多的國(guó)內(nèi)外的研究也從不同的角度對(duì)鎳鈦諾合金的安全性進(jìn)行了驗(yàn)證，但其數(shù)據(jù)基于的材料不盡相同，缺乏系統(tǒng)性的研究，并不能進(jìn)行準(zhǔn)確比較，甚至存在著相互矛盾的結(jié)論。

表1 鎳鈦合金絲細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)結(jié)果

表2 鎳鈦合金絲用小鼠淋巴瘤細(xì)胞進(jìn)行的體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)試驗(yàn)結(jié)果

生物學(xué)評(píng)價(jià)系列標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16886是由全國(guó)醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)對(duì)國(guó)際系列標(biāo)準(zhǔn)ISO 10993的等同轉(zhuǎn)換，旨在為醫(yī)療器械的風(fēng)險(xiǎn)管理提供綱領(lǐng)和框架。其中，GB/T 16886.1《醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià) 第1部分：風(fēng)險(xiǎn)管理過(guò)程中的評(píng)價(jià)與試驗(yàn)》作為綱領(lǐng)性的文件，為醫(yī)療器械的生物安全性評(píng)價(jià)提供了一個(gè)框架，其附錄A為常規(guī)醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)所需的生物學(xué)評(píng)價(jià)項(xiàng)目提供了全面的指導(dǎo)。常規(guī)的醫(yī)療器械如若要完成生物學(xué)評(píng)價(jià)，其生物學(xué)評(píng)價(jià)的數(shù)據(jù)組要能夠覆蓋附錄A表格中所要求的相應(yīng)生物學(xué)評(píng)價(jià)項(xiàng)目。但根據(jù)醫(yī)用材料的不同用途，應(yīng)采取不同的生物學(xué)評(píng)價(jià)項(xiàng)目。鎳鈦諾合金材料可以被用于與人體短暫接觸的表面器械，也可用于與人體長(zhǎng)期接觸的植入介入器械，其中與血液長(zhǎng)期接觸的植入介入器械所需的生物學(xué)評(píng)價(jià)項(xiàng)目最為嚴(yán)格也最為全面，涵蓋現(xiàn)有GB/T 16886.1《醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià) 第1部分：風(fēng)險(xiǎn)管理過(guò)程中的評(píng)價(jià)與試驗(yàn)》附錄A中推薦的所有的生物學(xué)評(píng)價(jià)項(xiàng)目。因此本研究選取了與血液長(zhǎng)期接觸的植入介入器械完成生物學(xué)評(píng)價(jià)所需的項(xiàng)目，包括細(xì)胞毒性試驗(yàn)、熱原試驗(yàn)、皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)、遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)、血栓形成試驗(yàn)、急性全身毒性試驗(yàn)、亞慢性全身毒性試驗(yàn)、肌肉植入試驗(yàn)、遺傳毒性試驗(yàn)對(duì)鎳鈦諾合金材料加工成的鎳鈦合金絲進(jìn)行了生物安全性研究。

綜上所述，根據(jù)GB/T 16886.1中的要求，鎳鈦諾合金材料在普通大氣下熱氧化處理后加工成的鎳鈦合金絲的生物學(xué)評(píng)價(jià)項(xiàng)目均符合GB系列標(biāo)準(zhǔn)的要求，能夠完全覆蓋完成常規(guī)醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)的所需的所有數(shù)據(jù)終點(diǎn)，因此符合現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范對(duì)于常規(guī)醫(yī)療器械生物安全性的要求。但在生物化學(xué)和分子生物學(xué)層面，標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)和本研究都未涉及，這應(yīng)該是未來(lái)需要探究和發(fā)展的方向。