胡衛(wèi)珍，孔德棟，袁鈺，馮曉曉

(浙江大學(xué) 農(nóng)業(yè)試驗(yàn)站，浙江 杭州 310020)

國以農(nóng)為本，農(nóng)以種為先。鐵皮石斛(Dendrobiumofficinale)屬氣生蘭科草本植物，是我國名貴中藥，列“中華九大仙草”之首，具有滋養(yǎng)陰津、抑制腫瘤、降低血糖、延年益壽等功效[1-2]。多糖為鐵皮石斛的主要活性成分，與藥理作用有著密切的聯(lián)系[3-4]，多糖含量的高低是目前判斷鐵皮石斛品質(zhì)的主要依據(jù)。浙江省作為全國鐵皮石斛主要原產(chǎn)地與主產(chǎn)區(qū)之一，仍存在種源較混雜、品質(zhì)參差不齊等問題，故篩選和培育多糖含量高的新品種是鐵皮石斛品種選育的首要目標(biāo)之一。本實(shí)驗(yàn)對浙江省9個(gè)鐵皮石斛種源的多糖含量與主要農(nóng)藝性狀進(jìn)行相關(guān)性分析，旨在了解各農(nóng)藝性狀對多糖含量的影響，找出制約鐵皮石斛多糖含量的主導(dǎo)因子，從而為鐵皮石斛種質(zhì)資源創(chuàng)新利用和鐵皮石斛選育生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

試驗(yàn)材料分別來自臺(tái)州、金華、德清、建德、樂清、安吉等種植基地，共9個(gè)種源。這些種源種植保存于浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)試驗(yàn)站智能溫室鐵皮石斛種質(zhì)資源圃，通過開花鑒定為鐵皮石斛。為保護(hù)種植企業(yè)的生產(chǎn)利益，文中不同種植基地的鐵皮石斛種源用阿拉伯?dāng)?shù)字表示，9個(gè)種源分別標(biāo)記為1～9。

TU-1810紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)，DFT-50A高速粉碎機(jī)(溫嶺市林大機(jī)械有限公司)，BS224S分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，DK-8D電熱恒溫水浴鍋(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)，TDL-5000C低速臺(tái)式冷凍離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)。

無水葡萄糖對照品，苯酚、濃硫酸、無水乙醇等均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 農(nóng)藝性狀調(diào)查

測量方法參照文獻(xiàn)[5-6]。每個(gè)品種隨機(jī)選取30株植株，使用游標(biāo)卡尺、直尺等測量莖長(莖頂端第二節(jié)至莖基部)、莖粗(莖中部直徑)、節(jié)間距；取位于莖中部葉片，測定葉長、葉寬(其長寬積為相對面積)。觀察并記錄莖、葉片與葉鞘的顏色、植株形態(tài)等。

1.2.2 多糖含量測定

于2017年11月采收鐵皮石斛。多糖提取方法參照文獻(xiàn)[7]。將鐵皮石斛植株去根和葉，洗凈，烘干，粉碎。取本品粉末(過3號(hào)篩)約0.3 g，精密稱定，加200 mL水，加熱回流提取2 h，提取液轉(zhuǎn)移至250 mL量瓶中，用適量水分次洗滌容器，洗液轉(zhuǎn)移至同一量瓶中，冷卻，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過；精密吸取濾液2 mL，置15 mL離心管中，加入無水乙醇10 mL，搖勻，冷藏1 h，取出，離心(4 000g)20 min，棄去上清液，必要時(shí)濾過；沉淀加80%乙醇洗滌2次，每次8 mL，離心，棄去上清液，沉淀加熱水溶解并轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中，冷卻，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。

多糖測定參照《中華人民共和國藥典(2010年版)》的方法，每個(gè)樣品平行提取3次進(jìn)行測定，每次測定重復(fù)3次，取平均值。

1.3 數(shù)據(jù)處理

用SPSS 20.0數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)和Excel 2003軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)輸入和分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 形態(tài)差異

不同種源的鐵皮石斛形態(tài)特征差異大，多樣性豐富。鐵皮石斛葉片有窄葉型和寬葉型，其顏色包括深綠色、綠色、紫紅色等，葉片的厚薄程度也有明顯差異。葉鞘的顏色主要有綠色、黃綠色、紫紅色等，葉鞘具有豎條紋，有些還帶有紫斑，紫斑的多少依種質(zhì)資源的不同差異較大。莖稈顏色主要有綠色、紫紅色、深綠色，有些莖稈中部粗壯，基部細(xì)小，易倒伏；有些莖稈上下粗細(xì)相近，不易倒伏。不同種源的鐵皮石斛花色和花的形態(tài)相近，花一般為黃綠色，晚期變成黃色，花舌具有紫色斑塊。

2.2 不同種源鐵皮石斛的多糖含量

不同種源地鐵皮石斛多糖含量不同，存在顯著差異。1～9號(hào)種源的多糖含量分別為20.67%、25.22%、18.60%、16.56%、26.12%、21.68%、27.94%、19.42%、17.41%。7號(hào)種源多糖含量最高，5號(hào)和2號(hào)種源次之，4號(hào)種源多糖含量最低。

2.3 農(nóng)藝性狀與多糖含量的相關(guān)性

相關(guān)分析(表1)表明，鐵皮石斛的莖粗與多糖含量呈顯著負(fù)相關(guān)，其他農(nóng)藝性狀與多糖含量均不存在顯著相關(guān)性，這與諸燕等[8]的研究結(jié)果相吻合。從主要農(nóng)藝性狀的相關(guān)性可以看出，莖長與節(jié)間距呈極顯著正相關(guān)，與節(jié)數(shù)、葉長、葉面積呈顯著正相關(guān)，說明莖較長的種源葉型細(xì)長、節(jié)數(shù)較多、節(jié)距較長。葉長與節(jié)間距呈顯著正相關(guān)。葉面積與葉長呈極顯著正相關(guān)，與莖長、葉寬、節(jié)間距呈顯著正相關(guān)。

表1 鐵皮石斛農(nóng)藝性狀與多糖含量的相關(guān)性分析

注：*表示在 0.05 水平(雙側(cè))上顯著相關(guān)，**表示在 0.01 水平(雙側(cè))上顯著相關(guān)。

3 小結(jié)

不同種源地鐵皮石斛莖長、莖粗、節(jié)數(shù)、節(jié)間距、葉長等主要農(nóng)藝性狀存在明顯差異，多態(tài)性較高。石斛多糖是評(píng)價(jià)鐵皮石斛品質(zhì)的重要指標(biāo)，不同種源的多糖含量有差異，鐵皮石斛的莖粗與多糖含量呈顯著負(fù)相關(guān)。