周中平 韓 勇 劉玉潔

1.山東省東港區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，山東東港276800；2.山東省日照市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心，山東東港276800

新城疫是由新城疫病毒引起的，病禽表現(xiàn)呼吸困難、腹瀉、神經(jīng)紊亂、黏膜和漿膜出血。因?yàn)樾鲁且咧虏《局瓴煌憩F(xiàn)的嚴(yán)重程度有很大差異。由于新城疫發(fā)病率高，傳播速度快，1926年在印尼首次發(fā)現(xiàn)后，全世界均有暴發(fā)。世界各國(guó)對(duì)本病的發(fā)生和流行高度重視，嚴(yán)重危害養(yǎng)殖業(yè)，造成巨大損失[1]。

通過(guò)新城疫疫苗免疫，可以很好地控制本病的發(fā)生。為此，日照市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心在全市禽場(chǎng)進(jìn)行隨機(jī)抽樣，開(kāi)展免疫效果監(jiān)測(cè)，掌握全市新城疫抗體水平。本試驗(yàn)采取禽流感血凝抑制試驗(yàn)方法，檢測(cè)新城疫抗體水平，了解日照市新城疫免疫后抗體水平情況。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)、方法

本試驗(yàn)于2019年5月10日至20日在山東省日照市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，采取血凝抑制試驗(yàn)方法。

1.2 血清樣品

按照群內(nèi)免疫合格率90%、置信水平95%、可接受誤差10%，每個(gè)場(chǎng)點(diǎn)采集樣品35 份。2019年5月抽檢9 家，共抽查315 份血清，具體抽樣情況見(jiàn)表1。

表1 日照市養(yǎng)禽場(chǎng)（戶）新城疫監(jiān)測(cè)抽樣情況

1.3 檢測(cè)試劑

新城疫抗原、標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清和標(biāo)準(zhǔn)陰性血清均購(gòu)自青島立見(jiàn)，生產(chǎn)批號(hào)為010131801。

1.4 儀器設(shè)備

振蕩器為金壇市醫(yī)療器械生產(chǎn)，型號(hào)為78-2。移液器為Sartorius 公司生產(chǎn)。

1.5 血凝試驗(yàn)操作程序

1）測(cè)抗原的血凝價(jià)：在微量反應(yīng)板的1～12 孔加入25 μL PBS；換滴頭，吸取25 μL 的抗原加入到第1 孔，然后倍比稀釋至11 孔，并棄去剩下的25 μL，換滴頭；每孔再加入25 μL 的PBS，混勻后，每孔加入25 μL 的1%體積比雞紅細(xì)胞懸液；震蕩混勻，在室溫下作用30 min 后觀察結(jié)果。

2）HA 試驗(yàn)的判定方法：將板傾斜，觀察紅細(xì)胞有無(wú)呈淚滴狀流淌。完全血凝（不流淌）的抗原的最高稀釋倍數(shù)代表1個(gè)血凝單位（HAU）。

1.6 血凝抑制試驗(yàn)操作程序

1）HI 抗體滴度：根據(jù)HA 試驗(yàn)結(jié)果配制4HAU，在微量板上的第1～11 孔加入25 μL 的PBS，第12 孔加50 μL 的PBS；吸取25 μL 待檢血清加入到第1 孔內(nèi)，充分混勻后倍比稀釋至第10孔；在第1～11 孔加入25 μL 的4HAU，室溫作用30 min；然后每孔加入25 μL 的1%體積比的雞紅細(xì)胞懸液，震蕩混勻，在室溫下作用30 min 后觀察結(jié)果。

2）HI 試驗(yàn)的判定方法：以完全抑制4 個(gè)HAU抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI 滴度。HI 效價(jià)≥4log2 判為陽(yáng)性，＜4log2 判為陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 血凝試驗(yàn)結(jié)果

血凝效價(jià)為9。

2.2 抗體檢測(cè)結(jié)果

血清檢測(cè)315 份，免疫合格290 份，抗體總體合格率92.1%。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。

3 討 論

3.1 監(jiān)測(cè)總體情況分析

抽檢了全市9 家養(yǎng)禽場(chǎng)（戶），從檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，總體免疫合格率為92.1%，符合國(guó)家要求。

表2 日照市養(yǎng)禽場(chǎng)（戶）新城疫抗體檢測(cè)情況

3.2 疫苗免疫效果分析

通過(guò)監(jiān)測(cè)結(jié)果，種禽場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)免疫效果較好，達(dá)到90%以上，能抵抗病毒的入侵。但一般散養(yǎng)戶由于免疫次數(shù)較少，合格率僅有78.6%，存在一定的疫情風(fēng)險(xiǎn)。

3.3 疫苗接種是預(yù)防本病關(guān)鍵

目前，養(yǎng)殖場(chǎng)疫苗分為活疫苗和滅活疫苗?；钜呙缰饕荌V 系克隆苗、II 系苗；滅活苗主要保存在2～8 ℃，大雞肌肉注射、小雞皮下注射。

如何消滅牛羊體表的蜱蟲

蜱蟲是一種牛羊體表吸食血液及傳播多種傳染病的體外寄生蟲，俗稱草爬子。蜱吸血后可以傳播多種傳染病，引起牛羊消瘦、貧血，威脅牛羊健康，嚴(yán)重時(shí)會(huì)致病牛羊死亡。消滅牛羊體表的蜱蟲方法如下。

1）人工捕捉。如果飼養(yǎng)的牛羊數(shù)量不是很多，且在人員充足的情況下，可以采取人工捕捉除蜱的方法。

2）藥液噴涂?？捎?.2%殺螟松或0.25%倍硫磷、1%馬拉硫磷、0.2%害蟲敵、0.2%辛硫磷乳劑噴涂牛羊體。劑量為：羊200 mL/次，牛500 mL/次，每隔3 周處理1 次。