謝庭輝 張恩軍 李萌
摘 要
覆盆子作為藥食同源的食物,含有豐富的藥用及食用功能性化合物,其中,覆盆子多糖有廣泛的藥理作用。為研究浙產(chǎn)覆盆子中多糖的含量,本文通過單因素及正交試驗,在超聲輔助下,考察了超聲時間、超聲溫度及液料比對覆盆子多糖提取含量的影響。實驗結(jié)果表明:在超聲時間30min,超聲溫度50℃,液料比40:1條件下,得到的覆盆子多糖含量較高,得率為5.04%。
關(guān)鍵詞
覆盆子多糖;提取;超聲輔助
中圖分類號: TQ281? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標(biāo)識碼: A
DOI:10.19694/j.cnki.issn2095-2457 . 2020 . 10 . 66
覆盆子在我國已有長久歷史,其為薔薇科懸鉤子屬植物,主要分布于浙江、江西等地,品種繁多[1]。兼具藥用及食用價值,廣泛應(yīng)用于食品、藥品、日化品等行業(yè)[2]。覆盆子的營養(yǎng)成分豐富,富含鞣花酸、維生素、多糖、多酚、黃酮等功能性化合物[3]。其中,覆盆子多糖具有廣泛的藥理作用,如抗氧化、抗衰老、降壓、提高免疫力等功效[4],為更好地對覆盆子多糖進行開發(fā)利用,本文采用單因素及正交試驗設(shè)計方法,探索超聲輔助下覆盆子多糖的較佳提取條件,以期對覆盆子的廣泛應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
1 材料與方法
1.1 實驗材料、試劑及設(shè)備
覆盆子,市售;AL204分析天平,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;HH-S11-S-S水浴鍋,上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,上?;ゼ褍x器設(shè)備有限公司;循環(huán)式真空泵,臺州市信力設(shè)備有限公司;紫外分光光度計(TU-1810S);超聲儀,寧波江南儀器廠。
1.2 實驗方法
1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
將葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品配成濃度為1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別準(zhǔn)確移取1,3,5,7,9mL標(biāo)準(zhǔn)溶液于各100mL容量瓶中,分別用蒸餾水定容至100mL,再用移液管分別移取2mL加入至10mL容量瓶中,分別加入6%苯酚溶液1mL,混勻后加入5mL濃硫酸,振蕩后于室溫靜置30min,在 490nm處測其吸光度。
1.2.2 覆盆子多糖的提取
將覆盆子于80℃烘干后,粉碎,過60目篩待用。每次稱取1.5g的覆盆子粉末,加一定量75%乙醇,于一定功率、溫度下超聲30min,超聲完成后,過濾,將濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至固定體積后,定容至100mL容量瓶中搖勻,再從中移取1mL至10mL容量瓶中并定容搖勻。采用苯酚-硫酸法[5]進行檢測,用潔凈的移液管吸取2mL提取液加入1mL6%苯酚和5mL濃硫酸,混勻后靜置30分鐘,在紫外分光光度計下于490nm處測其吸光度。
1.2.3 單因素試驗設(shè)計
在固定其他因素的條件下,分別考察超聲功率(15%、25%、35%、45%、55%)、超聲時間(10min、20min、30min、40min、50min)、超聲溫度(35℃、40℃、45℃、50℃、55℃)以及液料比(20:1、30:1、40:1、50:1、60:1)對覆盆子多糖吸光度的影響。
1.2.4 正交試驗設(shè)計
在單因素試驗的基礎(chǔ)上,選取超聲溫度、超聲時間、液料比3個因素為自變量,以吸光度為評價指標(biāo),進行L9(33)正交試驗,試驗因素及水平見表1。
2 結(jié)果與分析
2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制結(jié)果
以吸光度(Y)為縱坐標(biāo),以被測葡萄糖溶液的濃度(X)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程Y=1.8514X-0.008,曲線R2=0.9993,說明在濃度范圍里,線性關(guān)系良好。
2.2 單因素試驗結(jié)果
在超聲功率為35%,超聲時間30min,超聲溫度50℃,液料比40:1條件下,覆盆子多糖的提取效果較佳,吸光度為0.126。
2.3 正交試驗結(jié)果
在單因素試驗的基礎(chǔ)上,對超聲時間、超聲溫度、液料比三因素進行正交試驗,結(jié)果如下表2所示。
通過對K值的分析可知,較佳的提取工藝為A3B2C1,即超聲溫度55℃,超聲時間30min,液料比30:1。從極差分析中可知,超聲輔助提取覆盆子多糖的影響大小依次為:超聲溫度>超聲時間>料液比。
在正交試驗的較佳提取條件下,進行三次平行試驗,得到覆盆子多糖三次的吸光度值分別為0.131、0.132、0.132,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得到覆盆子多糖平均含量為75.62mg/g,得率為5.04%。
3 結(jié)論
本試驗以浙產(chǎn)覆盆子為原料,采用超聲輔助提取覆盆子中多糖成分,通過苯酚-硫酸法檢測吸光度并得到較佳提取工藝條件為:超聲溫度55℃,超聲時間30min,液料比30:1,超聲功率35%。經(jīng)平行試驗證明,在超聲輔助下提取覆盆子多糖,條件溫和,提取效率高且結(jié)果穩(wěn)定,多糖含量為75.62mg/g,得率為5.04%。覆盆子在我國資源豐富,本提取方法可為充分利用覆盆子多糖提供理論參考。
參考文獻
[1]劉明學(xué),牛靖娥.覆盆子研究進展及其資源開發(fā)利用[J].科技視界,2014(22):26-27.
[2]鄭琴,吳玲,張科楠等.覆盆子研究概況及產(chǎn)品開發(fā)趨勢分析[J].中藥材,2019,42(05):1204-1208.
[3]程丹,李潔,周斌等.覆盆子化學(xué)成分與藥理作用研究進展[J].中藥材,2012,35(11):1873-1876.