孫藝文， 趙利娜， 鄭香峰， 林 珍， 李僑飛， 程洋洋， 張紅印★

（1. 江蘇大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院，江蘇 鎮(zhèn)江212013；2. 江蘇大學(xué) 生命科學(xué)研究院，江蘇 鎮(zhèn)江212013）

聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）指出，全世界25%的農(nóng)業(yè)作物受真菌毒素的污染，如曲霉屬、青霉屬、鐮刀菌屬等產(chǎn)生的真菌毒素[1-2]。 真菌毒素由低相對分子質(zhì)量的真菌代謝物組成，對人體健康有害[3]。 展青霉素（PAT）又稱為棒曲霉素，是蘋果及其衍生制品中最常見的真菌毒素，是由曲霉屬（Aspergillus）、青霉屬（Penicillium）、擬青霉（Paecilomyces）等真菌代謝產(chǎn)生的一種有毒的代謝產(chǎn)物[4-5]。 近年來，許多國家均報道了展青霉素的污染問題，如意大利、德國、美國、葡萄牙等[6-7]。 通過食用受PAT 污染的食物和飲料嚴重威脅著人類的健康[8]，PAT 可以氧化損傷人類細胞引起致突變性[9]、免疫毒性[10]、細胞毒性[11]、致畸性[12]以及遺傳毒性[13]等。

控制蘋果青霉病的發(fā)生及蘋果中PAT 的污染傳統(tǒng)的方法是使用化學(xué)合成殺菌劑。 然而，隨著化學(xué)殺菌劑的持續(xù)和大量使用，病原體逐漸產(chǎn)生了抗藥性，不僅防治效力降低，而且化學(xué)殘留物也會對食物造成污染。 因此，人們急需尋求可替代化學(xué)殺菌劑的新方法。 近年來，生物防治因其安全、綠色、高效等優(yōu)點成為一種有發(fā)展前景的防治方法。 大量研究表明， 部分酵母菌可以直接抑制PAT 的產(chǎn)生，有的甚至可以降解展青霉素。 例如：卡利畢克畢赤酵母 （Pichia caribbica）[14]、 膠紅酵母（Rhodotorula mucilaginosa）[15]、 紅 冬 孢 酵 母（Rhodosporidium kratochvilovae）[16]、 氧化葡萄糖酸 菌（Gluconobacter oxydans）[17]等拮抗菌均能不同程度地控制和降解PAT。 Zhu 等[18]的 研 究 表 明， 海 洋 紅 酵 母（Rhodosporidium paludigenum）可以降低蘋果體內(nèi)展青霉素的含量。 體外實驗也表明， 粘紅酵母（Rhodotorula glutinis）可以降解展青霉素，使其含量與對照組相比減少82%。

目前，利用生物方法降解真菌毒素的機制主要有：細胞的吸收作用[19]、細胞壁的吸附作用、胞外代謝物的降解作用[20]、胞內(nèi)酶的降解作用等。然而對于生物降解PAT 的機制研究較少，對于降解途徑的研究尚且不夠深入，因此，研究拮抗酵母降解PAT 的機制， 有助于推動生物技術(shù)降解PAT 的實際應(yīng)用，研究意義十分重大。 作者所在課題組首次發(fā)現(xiàn)擬粉紅鎖擲孢酵母（Sporidiobolus pararoseus）可以有效控制蘋果中PAT 的積累。 因此， 作者對S. pararoseus降解展青霉素的機制進行初步探索，可以為進一步研究其降解PAT 的機理和途徑奠定基礎(chǔ)，為真菌毒素的生物降解提供新的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 酵母菌 酵母菌S. pararoseus系作者所在實驗室分離鑒定并保存的菌種，于NYDA 培養(yǎng)基（酵母浸膏5 g，牛肉膏8 g，葡萄糖10 g，瓊脂20 g，無菌水定容至1 L）4 ℃低溫保存， 經(jīng)NYDB 培養(yǎng)基（酵母浸膏5 g，牛肉膏8 g，葡萄糖10 g，無菌水定容至1 L）活化（28 ℃，180 r/min 搖床培養(yǎng)20 h）后，將上述培養(yǎng)混合物在7 500 r/min 下離心10 min，無菌生理鹽水洗滌兩次，并用無菌生理鹽水重新懸浮酵母細胞，血球計數(shù)法計數(shù)并用無菌生理鹽水調(diào)至所需濃度。

1.1.2 病原菌 擴展青霉（Penicillium expansum）系作者所在實驗室保存的菌種。先接種在PDA 培養(yǎng)基（200 g 土豆沸水煮20 min 后，用紗布過濾，加入20 g 葡萄糖，20 g 瓊脂，用蒸餾水定容至1 L），25 ℃培養(yǎng)一周，將分生孢子挑取于無菌水中，用血球計數(shù)法計算孢子數(shù)量，根據(jù)試驗要求配制相應(yīng)濃度。

1.1.3 水果 正常商業(yè)成熟度的蘋果果實：品種為紅富士，選擇外觀勻稱，表面完好無機械損傷的果實， 用0.1%的NaClO 溶液進行浸泡消毒1 min，自來水沖洗若干次，室溫下自然風(fēng)干。

1.1.4 試劑與儀器 PAT 標準品：購于生工生物工程（上海）股份有限公司；環(huán)己酰亞胺（Cycloheximide）：購于美國Amresco 公司；酵母浸膏、葡萄糖、冰醋酸、牛肉膏、瓊脂：購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司；乙腈、 甲醇： 色譜純， 購自TEIDA； 微孔濾膜（0.22 μm）、注射器等：購于華東器化玻公司。

Agilent 1260 液相色譜儀： 購自美國安捷倫公司；恒溫搖床：太倉市強樂試驗設(shè)備廠產(chǎn)品；電子顯微鏡：江南光學(xué)儀器廠產(chǎn)品；高速冷凍離心機：湘儀離心機儀器有限公司產(chǎn)品；血球計數(shù)板：購自丹陽市健陵醫(yī)療器械公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 HPLC-DAD 檢測PAT 的條件 參考Cao 等[14]的方法，略有改動。 PAT 檢測條件：紫外波長276 nm；色譜柱：反相C18 柱，250 mm×4.6 mm；流動相為乙腈∶水=10∶90；流量：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；進樣量20 μL。

1.2.2S. pararoseus對蘋果傷口處PAT 的控制作用蘋果經(jīng)1.1.3 預(yù)處理后， 在每個蘋果果實表面赤道部位用滅菌的打孔器打3 個分布均勻且大小、深度一致的傷口（5 mm×3 mm），用移液器向傷口處分別注入30 μL 溶液。 1）S. pararoseus酵母菌懸液（濃度為1×106~109cells/mL 共4 個梯度）；2） 無菌蒸餾水（對照）。 放置2 h 后，再在每個傷口處注入30 μLP.expansum孢子懸浮液（5×104spores/mL）。 室溫下放置1 h 左右，將蘋果置于塑料筐中，用保鮮膜密封起來。 將其置于恒溫恒濕培養(yǎng)箱（20 ℃，95%RH）中貯藏12 d，用無菌刀沿蘋果腐爛傷口外緣1 cm 處將腐爛及周圍組織取出，提取凈化后測定蘋果傷口處的PAT 質(zhì)量濃度，參考曹婧[21]的方法。每個處理做3個平行，每個平行12 個蘋果，整個試驗重復(fù)2 次。

1.2.3S. pararoseus在體外對PAT 的降解作用 經(jīng)1.1.1 活化后的酵母細胞，用生理鹽水調(diào)整其濃度為1×108cells/mL， 在含有20 mL NYDB 培養(yǎng)基的150 mL 錐形瓶中加入1 mLS. pararoseus酵母菌懸液，再加入一定量的PAT 儲備液， 使其終質(zhì)量濃度為5 μg/mL，于28 ℃、180 r/min 搖床培養(yǎng)24 h，每6 小時取一次樣，7 500 r/min 離心10 min， 取上清液用微孔濾膜（0.22 μm）過濾后置于-20 ℃冰箱保存，使用HPLC 測定PAT 的質(zhì)量濃度。每個處理做3 個平行，整個試驗重復(fù)2 次。

1.2.4S. pararoseus降解PAT 的機制

1）S. pararoseus細胞壁對PAT 的吸附作用：經(jīng)1.1.1 活化后的酵母細胞，用生理鹽水調(diào)整其濃度為1×108cells/mL， 取5 mL 酵母懸浮液在100 ℃的沸水中滅活15 min， 在含有20 mL NYDB 培養(yǎng)基的150 mL 錐形瓶中分別加入1 mL 活的酵母細胞、熱殺死細胞、以及生理鹽水（對照），3 個處理均加入等量的PAT 儲備液， 使其終質(zhì)量濃度為5 μg/mL，于28 ℃、180 r/min 搖床培養(yǎng)18 h， 每3 小時取一次樣，每個樣品分為離心（7 500 r/min）和非離心2 種處理方法，將培養(yǎng)液經(jīng)微孔濾膜（0.22 μm）過濾后置于-20 ℃冰箱保存，待HPLC 測定PAT 的質(zhì)量濃度。 每個處理做3 個平行，整個試驗重復(fù)2 次。

2）S. pararoseus對PAT 的吸收作用：經(jīng)1.1.1 活化后的酵母細胞， 用生理鹽水調(diào)整其濃度為1×108cells/mL，在含有20 mL NYDB 培養(yǎng)基的150 mL 錐形瓶中分別加入1 mLS. pararoseus酵母菌懸液和生理鹽水（對照），兩個處理均加入等量的PAT 儲備液，使其終質(zhì)量濃度為5 μg/mL，于28 ℃、180 r/min搖床培養(yǎng)18 h，7 500 r/min 離心后用無菌生理鹽水洗兩次，確保除去培養(yǎng)基中殘留的PAT。 使用兩種方法測定S. pararoseus對PAT 的吸收作用。 1）參照曹婧[21]的方法，將酵母細胞使用超聲波破碎儀1 000 Hz 處理20 min，于分液漏斗中使用乙酸乙酯提取PAT。 2）將離心得到的酵母細胞使用液氮低溫研磨，加入相同體積的無菌水和乙酸乙酯，于分液漏斗中分層提取， 將油層于40 ℃高溫旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干，用1 mL 乙酸乙酯復(fù)溶。 經(jīng)微孔濾膜（0.22 μm）過濾后置于-20 ℃冰箱保存，待HPLC 測定PAT 的質(zhì)量濃度。每個處理做3 個平行，整個試驗重復(fù)2次。

3）S. pararoseus無細胞濾液對PAT 的降解作用：經(jīng)1.1.1 活化后的酵母細胞，7 500 r/min 離心10 min后，上清液繼續(xù)離心2 次，將3 次離心后的上清液用微孔濾膜（0.22 μm）過濾，除去全部酵母細胞，得到含細胞外代謝物的無細胞濾液。 在錐形瓶中加入20 mL 無細胞濾液作為處理組，等量的NYDB 培養(yǎng)基作為對照， 兩個處理均加入等量的PAT 儲備液，使其終質(zhì)量濃度為5 μg/mL， 于28 ℃、180 r/min 搖床培養(yǎng)18 h， 每3 小時取一次樣，7 500 r/min 離心后將上清液經(jīng)微孔濾膜（0.22 μm）過濾，置于-20 ℃冰箱保存，待HPLC 測定PAT 的質(zhì)量濃度。 每個處理做3 個平行，整個試驗重復(fù)2 次。

4）PAT 刺激下S. pararoseus產(chǎn)生的外代謝物對PAT 的降解作用：經(jīng)1.1.1 活化后的酵母細胞，用生理鹽水調(diào)整其濃度為1×108cells/mL，在含有20 mL NYDB 培養(yǎng)基的150 mL 錐形瓶中加入1 mLS. pararoseus酵母菌懸液， 再加入一定量的PAT 儲備液，使其終質(zhì)量濃度為5 μg/mL，于28 ℃、180 r/min 搖床培養(yǎng)6 h， 取出一組經(jīng)滅菌的微孔濾膜（0.22 μm）過濾，除去酵母細胞得到含酵母細胞外代謝物的無細胞濾液，對照組不處理，繼續(xù)在28 ℃、180 r/min 搖床培養(yǎng)18 h。 每3 小時取樣，7 500 r/min 離心10 min，取上清液用微孔濾膜（0.22 μm）過濾后置于-20 ℃冰箱保存，待HPLC 測定其中PAT 的質(zhì)量濃度。 每個處理做3 個平行，整個試驗重復(fù)2 次。

5）環(huán)己酰亞胺對S.pararoseus降解PAT 的影響：經(jīng)1.1.1 活化后的酵母細胞， 用生理鹽水調(diào)整其濃度為1×108cells/mL，在含有20 mL NYDB 培養(yǎng)基的150 mL 錐形瓶中加入1 mLS. pararoseus酵母菌懸液，分3 組處理：1）在0 h 加入25 μL 質(zhì)量濃度為1 mg/mL 的環(huán)己酰亞胺；2）培養(yǎng)6 h 后，加入25 μL質(zhì)量濃度為1 mg/mL 的環(huán)己酰亞胺；3）不添加環(huán)己酰亞胺 （對照）。 3 個處理均加入等量的PAT 儲備液，使其終質(zhì)量濃度為5 μg/mL，于28 ℃、180 r/min搖床培養(yǎng)18 h， 每3 小時取一次樣，7 500 r/min 離心后， 將上清液經(jīng)微孔濾膜 （0.22 μm） 過濾后置于-20 ℃冰箱保存， 待HPLC 測定PAT 的質(zhì)量濃度。 每個處理做3 個平行，整個試驗重復(fù)2 次。

6）S. pararoseus胞內(nèi)酶對PAT 的降解作用：參照Zheng 等[20]的方法，略有改動?；罨蟮慕湍讣毎? 500 r/min 離心10 min 后用Tri-HCl （50 mmol/L，pH 7.0）清洗兩次，取濕質(zhì)量5 g 的酵母細胞經(jīng)液氮快速研磨，溶于10 mL Tri-HCl 中，冰上放置30 min，促進胞內(nèi)酶的溶解，4 ℃、10 000 r/min 離心10 min，收集上清液。 未加酵母細胞的提取液作為對照，加入終質(zhì)量濃度為5 μg/mL 的PAT。 于28 ℃、180 r/min搖床培養(yǎng)3 h，取樣后用微孔濾膜（0.22 μm）過濾后置于-20 ℃冰箱保存，待HPLC 測定其中PAT 的質(zhì)量濃度。 每個處理做3 個平行，整個試驗重復(fù)2 次。1.2.5 數(shù)據(jù)分析 試驗結(jié)果用SPSS16.0/PC 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。 當(dāng)需要比較的試驗組總數(shù)超過3個時，采用ANOVA 程序?qū)Y(jié)果進行Duncan's 多重比較差異分析（P＜0.05），當(dāng)需要分析的組數(shù)為2 時，采用獨立樣本來實行平均數(shù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 S. pararoseus 對蘋果傷口處PAT 的控制作用

由圖1 可以看出， 使用S. pararoseus能顯著降低蘋果傷口處PAT 的積累量。 當(dāng)酵母濃度為1×108cells/mL 時，PAT 的積累量最低僅為6.08 μg/mL，而空白對照高達17.34 μg/mL。 經(jīng)過酵母處理后果實傷口處PAT 積累量與對照相比至少降低了1.2 倍。

圖1 S. pararoseus 對蘋果傷口處展青霉素積累的影響Fig. 1 Efficacy of S. pararoseus on controlling of patulin in wounds of apple fruits

2.2 S. pararoseus 在體外對PAT 的降解作用

如圖2 所示，PAT 可以被S. pararoseus降解，并且隨著時間的延長，PAT 的質(zhì)量濃度不斷降低，培養(yǎng)18 h 后PAT 的質(zhì)量濃度已無法檢測到， 然而對照組PAT 的質(zhì)量濃度在整個實驗中幾乎保持不變。

圖2 S. pararoseus 對PAT 的降解作用Fig.2 Efficacy of S.pararoseus on the biodegradation of PAT

2.3 S. pararoseus 降解PAT 的機制

2.3.1S.pararoseus細胞壁對PAT 的吸附作用 圖3顯示，無論是活細胞還是熱殺死細胞，取離心后上清液和直接取培養(yǎng)液進行測定，兩者之間PAT 的質(zhì)量濃度相差不大， 這就表明S. pararoseusY16 細胞壁沒有吸附PAT 的作用。 由此可知，S. pararoseusY16 降解PAT 的過程需要活的酵母細胞，并不是由于細胞壁對PAT 的吸附作用。

圖3 S.pararoseus 活細胞和熱殺死細胞對PAT 的降解作用Fig. 3 Efficacy of viable cells and heat-killed cells of S.pararoseus on the biodegradation of PAT

2.3.2S.pararoseus對PAT 的吸收作用S.pararoseus與PAT 共同培養(yǎng)18 h 后，使用無菌水洗滌除去殘留的PAT 和培養(yǎng)介質(zhì)，無論是使用超聲波破碎儀還是液氮研磨破碎細胞，使用HPLC 檢測其中的PAT 質(zhì)量濃度。結(jié)果顯示，破碎的細胞中均不含有PAT。因此，S. pararoseus對PAT 的降解并不是由于細胞對PAT 的吸收作用。

2.3.3S. pararoseus細胞外代謝物對PAT 的降解作用 如圖4 所示，在培養(yǎng)的18 h 內(nèi)，體系中PAT 的變化趨勢與對照組幾乎一致， 含有S. pararoseus細胞外代謝物的無細胞濾液并沒有降低PAT 的質(zhì)量濃度，由此可知，S. pararoseus在正常生長代謝過程中產(chǎn)生的細胞外代謝物不能夠降解PAT。

2.3.4 PAT 刺激下S. pararoseus產(chǎn)生的外代謝物對PAT 的降解作用 如圖5 所示，當(dāng)PAT 與S.pararoseus共同培養(yǎng)6 h 后濾除酵母細胞， 無細胞濾液中PAT的質(zhì)量濃度幾乎沒有變化，而未過濾酵母細胞的處理，共同培養(yǎng)15 h 后就幾乎檢測不到PAT 的存在。

圖4 S. pararoseus 細胞外代謝物對PAT 的作用Fig.4 Efficacy of cell-free culture filtrates of S.pararoseus on the biodegradation of PAT

圖5 PAT 刺激下S.pararoseus 外代謝物對PAT 的降解作用Fig. 5 Efficacy of S. pararoseus was filtered after 6 h onthe biodegradation of PAT

實驗結(jié)果表明，PAT 刺激下S. pararoseus并沒有產(chǎn)生降解PAT 的細胞外代謝物。

2.3.5 環(huán)己酰亞胺對PAT 降解的影響 未加入環(huán)己酰亞胺（S. pararoseus單獨處理）的處理組，在培養(yǎng)15 h 后顯著降低了PAT 的質(zhì)量濃度，然而0 h 添加PAT 的同時添加環(huán)己酰亞胺的處理組，培養(yǎng)18 h后PAT 的質(zhì)量濃度由6.1 μg/mL 降為4.2 μg/mL，說明添加環(huán)己酰亞胺確實影響了酵母細胞對PAT的降解作用。 當(dāng)添加PAT 共培養(yǎng)6 h 后再添加環(huán)己酰亞胺時，PAT 的質(zhì)量濃度隨著時間增長而降低，和不添加環(huán)己酰亞胺相比，S. pararoseus對PAT 的整體降解速率顯著低于未添加環(huán)己酰亞胺組，但是環(huán)己酰亞胺并沒有完全阻止酵母細胞對PAT 的降解作用，培養(yǎng)18 h 后未添加環(huán)己酰亞胺組已完全檢測不到PAT， 而添加PAT 共培養(yǎng)6 h 后再加入環(huán)己酰亞胺處理組中仍含有PAT 2.6 μg/mL。

圖6 不同時間添加環(huán)己酰亞胺對S. pararoseus 降解PAT的影響Fig. 6 Efficacy of S. pararoseus added cycloheximide on different time on the biodegradation of PAT

2.3.6S. pararoseus胞內(nèi)酶對PAT 的降解作用 經(jīng)液氮研磨提取的胞內(nèi)酶與PAT 共同培養(yǎng)3 h 后，經(jīng)HPLC 測定PAT 的質(zhì)量濃度發(fā)現(xiàn)，胞內(nèi)酶已將PAT完全降解，而對照組的PAT 質(zhì)量濃度并無變化。 結(jié)果表明， 高濃度的S. pararoseus胞內(nèi)酶可以迅速降解PAT。

3 討 論

微生物具有物種的多樣性，因而生物降解PAT的機理也是具有多樣性的。 為了探究S. pararoseus降解PAT 的作用機制，作者驗證了其降解機制。 結(jié)果證實， 無論是S. pararoseusY16 活細胞還是熱殺死細胞，離心前后PAT 的質(zhì)量濃度幾乎相同，說明PAT 并沒有被酵母細胞的細胞壁吸附。 由于滅活的細胞是沒有任何代謝能力的，只能利用細胞壁將毒素吸附，而細胞吸附的毒素往往可以通過反復(fù)清洗細胞的方法使部分毒素從細胞表面脫離。 由此可知，S. pararoseusY16 對于PAT 的降解作用并不是因為細胞壁的吸附作用， 而是必須有活細胞的參與。 這與Dong 等[22]的研究結(jié)果一致，研究表明PAT的降解需要活的Kodameae ohmeri酵母細胞。 而Yue 等[23]則發(fā)現(xiàn)滅活的釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）可以降解蘋果汁中75%的PAT。然而Zhu等[18]的研究則發(fā)現(xiàn)，滅活的R. paludigenum細胞可以吸附51%的PAT。

當(dāng)S. pararoseus與PAT 共同培養(yǎng)20 h 后，無論是經(jīng)超聲波破碎儀還是液氮研磨破碎細胞，經(jīng)HPLC 測定后均未發(fā)現(xiàn)PAT， 說明S. pararoseus降解PAT 也不是通過細胞的吸收作用。PAT 既沒有被細胞壁吸附，也沒有被細胞吸收進細胞內(nèi)，而又檢測不到PAT 的存在， 由此可以推測PAT 被酵母的代謝產(chǎn)物降解了。 Coelho 等[24]的研究也證實了PAT的降解機理之一是酶作用的過程。

作者研究了S. pararoseus細胞外代謝物對PAT的降解作用。由圖4、圖5 可知，S. pararoseus正常代謝過程中產(chǎn)生的細胞外代謝物和PAT 刺激S.pararoseus代謝產(chǎn)生的細胞外代謝物均不能降解PAT。 而Zheng 等[20]的研究結(jié)果表明，P. caribbica在PAT 的刺激下可以產(chǎn)生大量的胞內(nèi)和胞外代謝物，可以顯著降低PAT 的質(zhì)量濃度。

環(huán)己酰亞胺是一種蛋白酶抑制劑，可以阻斷蛋白質(zhì)的合成，影響多種酶的作用途徑。 因此，作者也研究了環(huán)己酰亞胺對酵母菌降解PAT 的影響。結(jié)果表明，在0 h 添加PAT 同時添加環(huán)己酰亞胺嚴重影響了酵母菌對PAT 的降解作用。而添加PAT 6 h 后再添加環(huán)己酰亞胺，S. pararoseus仍然可以降解PAT， 但其降解速度顯著低于未添加環(huán)己酰亞胺的處理組。 可以推斷，S. pararoseus可以產(chǎn)生降解PAT的酶，而環(huán)己酰亞胺切斷了相關(guān)酶的產(chǎn)生，因此添加環(huán)己酰亞胺后，S. pararoseus降解PAT 的效率顯著降低。 當(dāng)添加PAT 6 h 后再添加環(huán)己酰亞胺，因為此時S. pararoseus已經(jīng)產(chǎn)生了降解PAT 的酶，此時添加環(huán)己酰亞胺， 并不能完全抑制S. pararoseus對PAT 的降解作用。由此可知，S. pararoseus對PAT的降解作用確實是酶作用的過程。 Dong 等[25]的研究也得出了相似的結(jié)論，環(huán)己酰亞胺可以抑制S.cerevisiae對真菌毒素玉米赤霉烯酮（zearalenone， ZEN）的降解作用。 而S. pararoseus胞內(nèi)酶對PAT 的降解作用的結(jié)果表明，胞內(nèi)酶可以快速降解PAT，共同培養(yǎng)3 h 后，HPLC 已檢測不到其中的PAT。 說明S.pararoseus降解PAT 的作用機制不是由于細胞壁對PAT 的吸附作用，也不是由于酵母細胞的吸收作用，而是活的酵母細胞在正常代謝過程中產(chǎn)生的胞內(nèi)酶對PAT 的降解作用。

4 結(jié) 語

展青霉素是一種世界范圍內(nèi)的真菌毒素污染物，在許多水果及其制品中均有發(fā)現(xiàn)[26]。近年來由于生物降解安全、高效、無污染等優(yōu)點，真菌毒素的生物降解已經(jīng)成為研究熱點。 對于S. pararoseus降解PAT 作用機制的研究，可以為拮抗菌降解真菌毒素的研究提供一定的理論基礎(chǔ)。 然而若想完全了解拮抗菌降解真菌毒素的機制， 還需要進行更多的研究，如確定具有降解作用的胞內(nèi)酶并對其進行分離純化及鑒定； 利用蛋白質(zhì)組學(xué)或轉(zhuǎn)錄組學(xué)等技術(shù)，對降解過程中發(fā)揮重要作用的蛋白質(zhì)或基因進行篩選和鑒定，從而為真菌毒素的生物降解提供全新的視角和途徑。