邵兵

摘 要：玉米是我們?nèi)粘Ｉ钪谐Ｒ姷囊环N食物，含有人體所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)，包括脂肪、蛋白質(zhì)、碳水化合物以及各種微量元素。其中，蛋白質(zhì)含量最高。蛋白質(zhì)作為人體生命活動所必須的一種營養(yǎng)物質(zhì)，可以從各種食物中都獲得，玉米也是其中的一樣。玉米中含有大量的蛋白質(zhì)，人們經(jīng)常會從玉米中攝取所需要的蛋白質(zhì)。那么，玉米中到底含有多少成分的蛋白質(zhì)呢？其實(shí)，是可以通過一定的測量技術(shù)計算出來的。本文將針對玉米種蛋白質(zhì)含量測定的技術(shù)方法進(jìn)行一定的探究，僅供參考。

關(guān)鍵詞：蛋白質(zhì)提取;蛋白質(zhì)濃度測定;玉米

一、蛋白質(zhì)的提取方法

想要從玉米中提取一定含量的蛋白質(zhì)，就必須采用一定的化學(xué)藥劑，這些化學(xué)藥劑可以幫助實(shí)驗(yàn)者從玉米中提取一定數(shù)量的蛋白質(zhì)，讓蛋白質(zhì)作為一種清晰可見的物質(zhì)呈現(xiàn)在人們面前。另外，對于蛋白質(zhì)的提取與研究也可以促進(jìn)生命科學(xué)的發(fā)展，其技術(shù)的發(fā)展水平將直接影響著生命科學(xué)的發(fā)展進(jìn)步。蛋白質(zhì)的提取是對蛋白質(zhì)進(jìn)行研究的重要一步，它影響蛋白質(zhì)活性的研究、產(chǎn)率和結(jié)構(gòu)的完整性，因此，提取過程必須萬無一失，采用合適的提取方式是進(jìn)行蛋白質(zhì)提取的第一步。

（一）磷酸緩沖液法

磷酸緩沖液法在化學(xué)實(shí)驗(yàn)中是一種常見的化學(xué)藥劑，通常使用的有磷酸鈉緩沖液（NaH2PO4&Na2HPO4）和磷酸鉀緩沖液（K2HPO4&KH2PO4），由于他們有兩極解離，因而被用作提取蛋白質(zhì)的藥劑。用這種方法進(jìn)行蛋白質(zhì)提取時，在存放的過程中對于溫度有一定的要求，溫度不宜太高，不然會破壞蛋白質(zhì)的生物結(jié)構(gòu)特性。這種方法，過程非常復(fù)雜，且耗時較長，但是蛋白質(zhì)提取的效率很高，因而也是常用的一種提取方法。磷酸緩沖液是利用磷酸鉀和磷酸鈉兩種化學(xué)物質(zhì)配比得來的，因此，在應(yīng)用的過程中，要注意兩者之間的配比比例，按照一定的比例配比成功之后，才能夠具體用于實(shí)驗(yàn)當(dāng)中。

（二）Tris法

Tris緩沖溶液（英文：buffer solution）是一種能在加入少量酸或堿和水時大大減低pH變動的溶液。蛋白質(zhì)作為一種物質(zhì)從玉米中提取出來，在自然環(huán)境的影響下，其物質(zhì)結(jié)構(gòu)特性很容易受到改變，在溫度、濕度以及陽光的照耀下，蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)會被打破。而采用Tris緩沖溶液進(jìn)行蛋白質(zhì)的提取，可以保證蛋白質(zhì)在自然環(huán)境中的ph值，可以應(yīng)用這種緩沖體系來抵抗蛋白質(zhì)在提取的過程中發(fā)生的ph值變化。

（三）TCA-acetone法

TCA-acetone法與其說是一種方法，還不如說是一種裂解液，在蛋白質(zhì)的提取過程中，裂解液可以充分的將蛋白質(zhì)從玉米中分離出來，這種利用解離液的方法相比較于前兩種方法來說，其過程操作非常復(fù)雜，且每一步步驟都必須嚴(yán)格按照操作規(guī)則來進(jìn)行，如果中間出現(xiàn)錯誤，那么就會對蛋白質(zhì)的提取產(chǎn)生一定的影響，且會破壞蛋白質(zhì)本身的結(jié)構(gòu)特性。另外，這種方法對蛋白質(zhì)存儲的環(huán)境也有一定的要求，在高于或者低于一定范圍的溫度時，會破壞蛋白質(zhì)本身的結(jié)構(gòu)特性。蛋白質(zhì)本身具有的結(jié)構(gòu)特性才能在食物中提供人們身體所需要的營養(yǎng)物質(zhì)，如果在實(shí)驗(yàn)中破壞了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，就要考慮重新進(jìn)行提取與測量過程了。

二、蛋白質(zhì)濃度測定方法

（一）Bradford

Bradford法測量蛋白質(zhì)的濃度屬于染料結(jié)合法的一種。蛋白質(zhì)與Bradford結(jié)合在2min左右的時間內(nèi)達(dá)到平衡，完成反應(yīng)十分迅速。這種測量方法所需要的實(shí)驗(yàn)藥劑需要進(jìn)行現(xiàn)場配比，在常溫條件保存在棕色試劑瓶中三個月，但這段時間可能會出現(xiàn)染料的沉淀，所以每次使用前需混合均勻。在實(shí)驗(yàn)開始之前，進(jìn)行搖晃，可以讓兩者之間充分混合均勻，使他們的作用能發(fā)揮到最大，在實(shí)驗(yàn)中能進(jìn)行充分反應(yīng)。

（二）紫外分光光度法

紫外線在我們的生活中是一種常見的光束，每天我們都會被紫外線照射，但是紫外線長時間的照射會對人的身體造成一定的傷害。紫外線在工業(yè)化學(xué)領(lǐng)域中也發(fā)揮著重要的作用，尤其是在室內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，紫外線的照射能發(fā)現(xiàn)很多化學(xué)原料內(nèi)在的性質(zhì)。同樣的，紫外線的光照也可以測量出玉米中各個部位的蛋白質(zhì)含量。在玉米中測量蛋白質(zhì)含量的方法，利用的是紫外分光光度法。紫外-可見分光光度法是在190～800nm波長范圍內(nèi)測定物質(zhì)的吸光度，用于鑒別、雜質(zhì)檢查和定量測定的方法。紫外分光光度法是一種采用光束對于蛋白質(zhì)濃度進(jìn)行測量的一種方法，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)對于光波的吸收程度不一樣，對比不同濃度下蛋白質(zhì)對于光波的吸收程度，從而判斷出蛋白質(zhì)的濃度。

三、對玉米中蛋白質(zhì)含量測定結(jié)果的分析

玉米中含有豐富的、大量的蛋白質(zhì)，通過以上幾種提取與測量濃度方法的分析發(fā)現(xiàn)，在玉米中不同部位，蛋白質(zhì)含量是不同的，而要測量蛋白質(zhì)的含量，就需要在實(shí)驗(yàn)中針對不同玉米不同部位采用不同的方法進(jìn)行測定。在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中，提取蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)可以多做幾組，通過應(yīng)用不同的提取方法，或者實(shí)驗(yàn)的變量可以改為是玉米中不同的部位。最終得出不一樣的結(jié)論。

四、小結(jié)

本文分析了幾種提取蛋白質(zhì)與濃度測量的方法。在實(shí)際的實(shí)驗(yàn)過程中，實(shí)驗(yàn)者應(yīng)當(dāng)根據(jù)現(xiàn)場的自然環(huán)境確定采用何種方法，避免外界環(huán)境對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)性質(zhì)產(chǎn)生影響，同時也要保證蛋白質(zhì)的生物結(jié)構(gòu)特性在提取、測量的過程中不會發(fā)生變化。本文針對玉米中含有的蛋白質(zhì)含量進(jìn)行了探究，首先探討了玉米中提取蛋白質(zhì)的方法，主要有磷酸緩沖液法、Tris法、TCA-acetone法，這三種方法都是采用化學(xué)試劑完成的，因而在實(shí)驗(yàn)中要注意試劑的配比與反應(yīng)，另外，化學(xué)試劑在實(shí)際環(huán)境中具有一定特殊的性質(zhì)，可能會發(fā)生揮發(fā)，也可能會發(fā)生氧化，因而要注重化學(xué)試劑的保存方法。其次，介紹了蛋白質(zhì)含量的測定方法，即測量在玉米中含有多少蛋白質(zhì)，應(yīng)用的方法有Bradford和紫外分光光度法，對于測量方法的應(yīng)用，研究者在實(shí)驗(yàn)的過程中要充分考慮實(shí)驗(yàn)環(huán)境的情況，確定采用哪種方法才是最為合適的，對測量結(jié)果進(jìn)行最終的總結(jié)與分析。

參考文獻(xiàn)：

[1]張龍翔，張庭芳，李令媛.生化實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)[M].北京：高等教育出版社，1981：164-169.