褚苗 千新來(lái)

【摘 ?要】目的：應(yīng)用染色體核型分析技術(shù)，探討染色體核型異常對(duì)兒童急性淋巴細(xì)胞白血病（ALL）患兒預(yù)后判斷的意義。方法：回顧性分析2017年一2018年收治的初診且伴染色體異常ALL患兒共65例的臨床資料。結(jié)果：（1）65例異常核型中單純數(shù)目異常者21例（32%），單純結(jié)構(gòu)異常者14例（22%），數(shù)目及結(jié)構(gòu)同時(shí)異常者30例（46%）;（2）染色體結(jié)構(gòu)異常者中，t（12;21）2例，t（9;22）6例，t（1;19）3例，t（4;11）2例。染色體數(shù)量異常者中，超二倍體核型最多，有29例（57%）;（3）至隨訪截止時(shí)間，本組病例中生存49例，死亡11例，失訪5例，復(fù)發(fā)9例。超二倍體和t（12;21）預(yù)后好，亞二倍體、t（1;19）和t（4;11）預(yù)后差;（4）本組患兒融合基因陽(yáng)性22例，包括BCR/ABL6例，MLL2例TEL/AMLI8例，E2A/PBX16例。與染色體結(jié)果比對(duì)，8例TEL/AMLI僅測(cè)得2例t（12;21），6例E2A/PBX1中測(cè)得2例t（1;19），另外一例t（1;19）對(duì)應(yīng)的融合基因陰性。結(jié)論：（1）本組ALL患兒染色體改變以數(shù)目及結(jié)構(gòu)同時(shí)異常為主，數(shù)目異常中以超二倍體核型最為常見(jiàn)。（2）染色體核型與ALL預(yù)后有密切聯(lián)系。（3）t（12;21）及t（1;19）染色體檢剛陽(yáng)性率低于融合基因陽(yáng)性率。

【關(guān)鍵詞】急性淋巴細(xì)胞白血病;兒童;染色體異常;預(yù)后

【中圖分類(lèi)號(hào)】R197??????【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A??????【文章編號(hào)】1672-3783（2020）03-0279-01

引言

急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）是起源于定向B或T系列發(fā)育的原始淋巴細(xì)胞的惡性克隆性疾病。與急性髓細(xì)胞白血?。ˋML）一樣，ALL在臨床和遺傳學(xué)上也都是異質(zhì)性疾病。常規(guī)核型分析揭示，大多數(shù)ALL患者存在克隆性染色體異常，其具有重要的診斷和預(yù)后意義。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象

回顧性分析2017年10月24日-2018年4月23日我院收治的65例初診且伴染色體檢測(cè)異常的ALL患兒的臨床資料，隨訪至2015年12月31日，中位年齡6（1一16）歲。男40例，女25例。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

ALL的染色體制備成功率不如AML，為70%～75%，其原因在于分裂相缺乏（培養(yǎng)后ALL白血病細(xì)胞易于凋亡）或顯帶質(zhì)量低劣難以識(shí)別。在染色體制備成功的病例中60%～79%成人ALL和57%～82%兒童ALL可檢出克隆性染色體畸變，其類(lèi)型包括高超二倍體、亞二倍體、近單倍體、近四倍體等數(shù)目畸變和平衡易位、倒位、缺失、重復(fù)、等臂染色體等結(jié)構(gòu)畸變。ALL主要染色體改變的類(lèi)型、頻率及其與免疫表型、基因重排及預(yù)后間的聯(lián)系見(jiàn)表1。與AML相比，ALL的染色體改變具有下述特點(diǎn)。①AML的染色體易位主要與形態(tài)學(xué)的法、美、英（FAB）亞型相關(guān)，而ALL除了t（8;14）（q24;q32）與FAB分型的L3亞型相關(guān)外，大多數(shù)易位主要與免疫表型相關(guān);②AML的染色體易位常導(dǎo)致新的融合基因，ALL的染色體易位除了可導(dǎo)致融合基因外，還有不少可導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子或癌基因和免疫球蛋白重鏈（14q11的IgH）、輕鏈（2p22的κ和22q11的λ）基因或T細(xì)胞受體基因（14q11的TCRα/δ、7q34的TCRβ、7p15的TCRγ）的促進(jìn)子或增強(qiáng)子序列相鄰，以致高表達(dá)，這在T-ALL中尤為多見(jiàn)（約占35%）;③AML中僅inv（16）由于異常比較細(xì)微，以致常規(guī)核型分析易被忽略，需經(jīng)熒光原位雜交（，F(xiàn)ISH）和（或）反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）技術(shù)方能檢出。ALL特別是T-ALL中隱匿易位更多見(jiàn)，如兒童B-ALL的t（12;21）（p13;q22）及兒童T-ALL的SIL-TAL1、t（5;14）（q35;q32）和NUP214-ABL1等，必須更多借助FISH和（或）RT-PCR技術(shù)才能識(shí)別之。（1）染色體培養(yǎng)取ALL患兒骨髓血4mL，采用短期培養(yǎng)法及R顯帶技術(shù)處理標(biāo)本，顯微鏡下分析至少20個(gè)分裂相，核型描述參照《人類(lèi)細(xì)胞遺傳學(xué)國(guó)際命名法體制（ISCN）1995》。（2）融合基因取ALL患兒骨髓血2mL，用Ficoll法提取單個(gè)核細(xì)胞后提取RNA，經(jīng)多重巢式聚合酶鏈反應(yīng)，電泳及掃描后得到結(jié)果。

1.3診斷及治療方案

治療方案和療效評(píng)定標(biāo)危ALL按全國(guó)小兒白血病協(xié)作組方案DOLP（柔紅霉素、長(zhǎng)春新堿、左旋門(mén)冬酞胺酶、潑尼松）行28d的誘導(dǎo)治療;高危ALL用CODLP（C為環(huán)磷酞胺）方案誘導(dǎo)治療，緩解后用CAT（A為阿糖胞昔，T為6一硫代鳥(niǎo)嘿吟）鞏固，HD一MTX（大劑量氨甲喋吟）沖擊庇護(hù)治療以及用替尼泊貳、鬼臼噬吩貳（Vm26）和Ara一。（阿糖胞昔）早期強(qiáng)化治療。30例中，2例標(biāo)危ALL，3例高危ALL因經(jīng)濟(jì)原因未進(jìn)行HD一MTX沖擊庇護(hù)治療。本組ALL患兒均按照《中華兒科雜志》《兒童急性淋巴細(xì)胞性白血病診療建議（第三次修訂草案）》診斷和治療。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

計(jì)數(shù)資料采用百分比或構(gòu)成比表示，計(jì)量資料采用中位數(shù)表示。

2 結(jié)果

2.1染色體核型改變

65例異常核型中單純數(shù)目異常者21例（32.3%），單純結(jié)構(gòu)異常者14例（21.5%），數(shù)目及結(jié)構(gòu)同時(shí)異常者30例（46.2%）。其中，攜帶t（9;22）核型有6例（9.2%），攜帶t（1;19）核型患兒共有3例（4.6%），2例患兒攜帶t（12;21）核型（3.1%），t（4;11）僅2例（3.1）。發(fā)現(xiàn)超二倍體患兒29例，占本組總?cè)藬?shù)44.6%，假二倍體患兒有17例（26.2%），亞二倍體患兒11例（16.9%）。

2.2融合基因結(jié)果

本組65例異常染色體核型ALL患兒中檢測(cè)出22例融合基因陽(yáng)性，占33.9%，其中BCR/ABL6例，MLL2例，TEL/AML18例，E2A/PBX16例。各類(lèi)融合基因?qū)?yīng)染色體核型見(jiàn)表1。

3 討論

隨著免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)研究的深人及ALL的MICM診斷已在國(guó)內(nèi)外開(kāi)展。研究表明，造血系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞中細(xì)胞遺傳學(xué)改變具有獨(dú)特的診斷意義及對(duì)預(yù)后的判斷價(jià)值。ALL患兒的染色體核型對(duì)指導(dǎo)治療及預(yù)后判斷具有重要作用，可作為兒童ALL獨(dú)立的預(yù)后因素。

參考文獻(xiàn)

[1] 顧龍君.兒童急性淋巴細(xì)胞白血病診療建議（第三次修訂草案）.中華兒科雜志，2016.

[2] 張維忠.急性淋巴細(xì)胞白血病染色體改變及其意義.中華心血管病雜志，2017.