韋翡翡 呂蓉 何微微

【摘 要】 目的：對藥材蕤仁進(jìn)行生藥學(xué)研究。方法：通過性狀鑒別、顯微鑒別和薄層鑒別的方法。結(jié)果：果核質(zhì)堅(jiān)硬、呈不對稱的扁心臟形或扁卵形，呈深棕色至暗棕色，有凹凸的淺縱溝壑。粉末中含有較多的石細(xì)胞，果皮細(xì)胞和油管;將提取溶液點(diǎn)于硅膠G薄層板，以氯仿-乙酸乙酯-乙醇（2∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]2）為展開劑展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏后，供試液色譜中，在與熊果酸對照品色譜相應(yīng)的位置，顯相同的黃色斑點(diǎn)。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)方法簡便并且宜于操作，可以為藥材蕤仁研究和質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 蕤仁;性狀鑒別;顯微鑒別;薄層鑒別

【中圖分類號(hào)】R284.2 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2020）2-0022-03

Abstract：Objective To study the pharmacology of Prinsepiae Nux. Methods Methods for trait identification， microscopic identification and thin layer identification. Result The nucleus was hard， asymmetrical flat-hearted or flat-ovate， dark brown to dark brown， with shallow longitudinal sulcus. The powder contains more stone cells， pericarp cells and tubing; the extraction solution is spotted on a thin layer of silica gel G， and developed with chloroform-ethyl acetate-ethanol （2∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]2） as a developing agent， taken out， and dried. After being smoked with iodine vapor， the chromatogram of the test solution showed the same yellow spots at the position corresponding to the chromatogram of the bear fruit garlic reference substance. Conclusion This method is simple and suitable for operation， and can provide reference for the research and quality control of medicinal materials.

Keywords：Prinsepiae Nux;Trait identification;Microscopic identification;Thin layer identification

蕤仁為薔薇科植物蕤核Prinsepia uniflora Batal.或齒葉扁核木Prinsepia uniflora Batal.var.serrata Rehd.的干燥成熟果核。具有養(yǎng)肝明目、疏風(fēng)散熱的功效，用于目赤腫痛，瞼弦赤爛，目暗羞明等治療[1]。

蕤仁在中醫(yī)眼科和成藥組方中應(yīng)用較廣，除此之外具有較高的營養(yǎng)價(jià)值，藥材的主要含有黃酮類、羧酸類和木質(zhì)素等化學(xué)成分[2]，果肉中含有豐富的維生素和氨基酸，種仁中含有脂肪、蛋白質(zhì)和微量元素等，應(yīng)用于食物和保健品中補(bǔ)充人體所需營養(yǎng)物質(zhì)[3]。植物資源主要分布于河南、內(nèi)蒙、甘肅和四川等地[4]。因藥材現(xiàn)在以野生資源為主，所以在黃土高原地區(qū)也將其作為生態(tài)和經(jīng)濟(jì)樹種，減小野生資源的過度利用，也增加當(dāng)?shù)氐氖杖隱5]。而生藥學(xué)方面研究較少，本文將通過生藥鑒定方法進(jìn)行蕤仁的相關(guān)研究，為蕤仁藥材的質(zhì)量評價(jià)研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 材料 蕤仁藥材收購于安國藥市和亳州藥市10批（見表1），均由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)晉玲教授鑒定為薔薇科植物蕤核Prinsepia uniflora Batal.的干燥成熟果核。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)（RM2235）、電腦生物組織攤烤片機(jī)（浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司）、顯微成像分析系統(tǒng)（尼康80i）、隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海越近醫(yī)療器械一廠）、水浴鍋、超聲清洗機(jī)（康士潔超聲波科技有限公司）、層析缸、硅膠G薄層板（青島海洋化工有限公司）等。

1.3 試劑 無水乙醇、三氯甲烷、二甲苯、甲醇、乙酸乙酯、碳酸鈣、石油醚（天津市大茂化學(xué)試劑廠）;石蠟（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）、藏紅T（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）、固綠（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）;中性樹膠（中國上海標(biāo)本模型廠）苦杏仁甙對照品（北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)研究院HPLC≥98%）等。

2 方法

通過石蠟切片制作了蕤仁的橫切圖，方法為浸泡軟化→乙醇脫水→石蠟固定→切片→染色→封片，完成了蕤仁的石蠟切片制作;通過粉末制作觀察顯微特征;通過2015版中國藥典薄層色譜法進(jìn)行理化鑒定。

3 結(jié)果

3.1 性狀鑒別 果核質(zhì)堅(jiān)硬、呈不對稱的扁心臟形或扁卵形，呈深棕色至暗棕色，有凹凸的淺縱溝壑。去掉果殼，可見包裹著內(nèi)種皮的種仁;呈棕色，呈類圓形或扁卵形，長5～8mm，寬約4～6mm，厚約2～3mm，尖端有種臍，圓端有合點(diǎn)，中間有深色種脊;內(nèi)種皮上有淺褐色的紋理4～6條，內(nèi)種皮質(zhì)脆而薄;子葉2，類白色，富含油性，氣微，味微苦。如圖1所示。

3.2 顯微鑒別 蕤仁橫切：內(nèi)果皮細(xì)胞為多層石細(xì)胞組成，種皮為深棕色，由4～6層細(xì)胞組成，有壁孔不常見，其下為數(shù)列頹廢的薄壁細(xì)胞，種皮的內(nèi)表皮為1列無色大型薄壁細(xì)胞，種子表皮是排列緊密的一層表皮細(xì)胞，向內(nèi)為薄壁細(xì)胞多為方形、多邊形，兩片子葉中含20～30個(gè)子葉細(xì)胞，并且含內(nèi)胚乳，含油滴和糊粉粒。如圖2所示。

粉末鑒別：粉末呈灰色至灰褐色，多見石細(xì)胞，石細(xì)胞多為長圓形，長條形，少數(shù)類圓形，直徑14～130μm，石細(xì)胞壁極厚，孔溝明顯，中部常成環(huán)狀斷裂，偶有胞腔內(nèi)含黃棕色物。果皮細(xì)胞呈黃色，多為長橢圓形至不規(guī)則形，多為數(shù)層細(xì)胞緊密排列的組織團(tuán)塊，含有少量油管。如圖3所示。

3.3 薄層鑒別 從藥材蕤仁中抽取3批不同產(chǎn)地的樣品，每份樣品取0.5g，加入相同量碳酸鈣（CaCO3）進(jìn)行研磨至完全碎，將混合品轉(zhuǎn)移至具塞三角瓶內(nèi)，加石油醚（60～90℃）4mL浸泡過夜后，將石油醚進(jìn)行吸干，后再吹干，再加入乙醇4mL冷浸過夜，最后用乙醇的浸出液進(jìn)行點(diǎn)樣，并以熊果酸作為對照品，吸取上述二種溶液分別點(diǎn)樣于硅膠G薄層板上，以氯仿-乙酸乙酯-乙醇（2∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]2）為展開劑展開，取出，晾干，以碘蒸氣熏后，供試液色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置，顯相同的黃色斑點(diǎn)。如圖4所示。

4 討論

據(jù)文獻(xiàn)考證，蕤仁在歷史上用藥歷史比較悠久，但是品種卻比較單一，不存在混淆使用的情況[6];在制作切片過程中，蕤仁軟化時(shí)間應(yīng)該控制合理，時(shí)間太短，切片過程中易破裂;時(shí)間過長容易使藥材解體。在浸蠟過程中溫度高會(huì)導(dǎo)致蕤仁的種皮收縮變形。包埋時(shí)溫度要也要設(shè)置合理，溫度如果太高，會(huì)使藥材組織變脆，并容易收縮變形。切片過程中應(yīng)該注意臘塊與刀片的角度問題，防止組織變形。染色中也應(yīng)該注意染色時(shí)間，紅色染色時(shí)間過長，可能會(huì)使導(dǎo)致固綠的著色程度。

薄層鑒別中應(yīng)該保證G板的在點(diǎn)樣前期過程中充分飽和，避免薄層展開過程中的拖尾問題，點(diǎn)樣量也會(huì)導(dǎo)致條帶色度的不均勻問題，所有過程中應(yīng)盡量保持客觀變量的一致性。

本次實(shí)驗(yàn)采集了10批不同批次的藥材，通過了藥材性狀、顯微切片觀察、顯微粉末觀察和薄層鑒別的現(xiàn)代手段進(jìn)行了藥材蕤仁的生藥學(xué)研究，結(jié)果具有代表性和客觀性，可為蕤仁的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]國家藥典委員會(huì).中國藥典2015年版（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：371-372.

[2]李宏軒.蕤仁的化學(xué)成分研究[D]. 沈陽：沈陽藥科大學(xué)， 2006.

[3]張曉玲.蕤仁的生態(tài)學(xué)特性及開發(fā)利用研究[J].山西林業(yè)科技，2011，40（3）：38-39.

[4]中國科學(xué)院中國植物志委員會(huì).中國植物志第38卷[M].北京：科學(xué)出版社， 1986：4-8.

[5]郭芳華，楊保慶.蕤仁造林，黃土高原陽坡治理的新嘗試[J].中國林業(yè)， 2006（10）.

[6]李百華，王俊平.中藥蕤仁的品種調(diào)查和本草考證[J].西北藥學(xué)雜志，1991（4）：42-44.

（收稿日期：2019-06-14 編輯：陶希睿）