(1.西南民族大學(xué) 青藏高原動(dòng)物遺傳資源保護(hù)與利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 四川 成都 610041；2.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院省部共建青稞和牦牛種質(zhì)資源與遺傳改良國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，西藏 拉薩 850009)

肌細(xì)胞增強(qiáng)因子-2(Myocyte enhancer factor 2, MEF2)定位于細(xì)胞核內(nèi)，屬于MADS-box轉(zhuǎn)錄因子家族[1]。MEF2蛋白最早發(fā)現(xiàn)于發(fā)育中的骨骼肌肌管，具有DNA結(jié)合活性，能夠與肌肉肌酸激酶(MCK)基因啟動(dòng)子中的A/T序列相結(jié)合[2]。MEF2家族在脊椎動(dòng)物中由4種亞基組成，分別包括MEF2A、MEF2B、MEF2C和MEF2D，在動(dòng)物不同組織生長發(fā)育過程中發(fā)揮調(diào)控作用[3]。MEF2蛋白家族N端均含有高度保守的MADS-box結(jié)構(gòu)域和MEF2結(jié)構(gòu)域，其結(jié)構(gòu)差異性主要集中在C端的轉(zhuǎn)錄活性區(qū)[4]。MEF2廣泛存在于肌肉細(xì)胞中，且能夠結(jié)合大多數(shù)肌肉特異性基因的啟動(dòng)子或增強(qiáng)子，增強(qiáng)相關(guān)基因的表達(dá)，可作為肌源性基因表達(dá)的主要調(diào)節(jié)物[5-6]。MEF2A是一種由MEF2A基因編碼的蛋白質(zhì)，位于染色體15q26，該蛋白在冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中高表達(dá)，在心臟和平滑肌細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生和肌細(xì)胞生成過程發(fā)揮關(guān)鍵作用[7]。研究顯示，MEF2A在骨骼肌和心臟組織中發(fā)揮作用存在差異，其靶向基因能夠影響MAP激酶的活性和凋亡[8]；通過對MEF2A缺失的MBs(心肌細(xì)胞)RNA-seq分析，MEF2A具有兩種不同作用，MEF2A的丟失不僅會(huì)導(dǎo)致肌肉功能的下調(diào)，還會(huì)造成與細(xì)胞遷移和運(yùn)動(dòng)相關(guān)基因的上調(diào)。

類烏齊牦牛主要生活在西藏自治區(qū)東部昌都市類烏齊縣境內(nèi)的高山草甸草原地區(qū)，海拔4 500 m以上，其形成歷史悠久，具有基本一致的外貌特征和繁殖性能，屬于以產(chǎn)肉為主的肉乳兼用型牦牛，是培育牦牛新品種或品系的重要基因資源[9]。本研究以普通牛MEF2A基因mRNA序列設(shè)計(jì)引物，克隆類烏齊牦牛MEF2A基因CDS區(qū)，進(jìn)行生物信息學(xué)和差異性表達(dá)分析，為進(jìn)一步探討MEF2A基因?qū)﹃笈Ｈ赓|(zhì)性狀的影響提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，并為類烏齊牦牛特色性狀的選育提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

選取西藏自治區(qū)昌都市類烏齊縣4.5歲健康成年的類烏齊牦牛作為試驗(yàn)樣本，分別采集其臀肌、心臟、肝臟、肺臟等組織，用DEPC水處理后，迅速用錫箔紙包裝，并置于液氮中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 主要試劑

Trizol RNA提取試劑盒(TIANGEN)；瓊脂糖(Amresco)、D2000 DNA Ladder(BioMIGA)；反轉(zhuǎn)錄試劑盒(TIANGEN)；DNA純化試劑盒(TIANGEN)；RNase-Free ddH2O；pMD19-T載體(TaKaRa)；DH5α感受態(tài)細(xì)胞等。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 總RNA提取及RT-PCR反應(yīng) 稱取80～110 mg組織樣品于研缽中，邊研磨邊倒液氮，隨后將研磨好的組織迅速轉(zhuǎn)移至含Trizol裂解液的離心管，提取總RNA，1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測。采用分光光度計(jì)測定RNA樣品的濃度及OD260/280值。利用DNase I去除殘留DNA，然后反轉(zhuǎn)錄成cDNA，1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測其質(zhì)量，于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 引物設(shè)計(jì) 參照GenBank中普通牛MEF2A基因cDNA序列(NM_001083638.2)，采用Primer 5.0軟件設(shè)計(jì)特異性引物(表1)，經(jīng)NCBI Primer-Blast程序檢測后，將擴(kuò)增引物交由英濰捷基(上海)生物技術(shù)有限公司合成。

表1 牦牛MEF2A基因的引物Table 1 Primer of MEF2A gene in yak

1.3.3 PCR擴(kuò)增 PCR總反應(yīng)體系為25 μL：上下游引物各1 μL、Taq Green PCR Master Mix(2×, 1.25 mL) 12.5 μL、ddH2O 9.5 μL、DNA模板1 μL。PCR反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性3 min；95 ℃變性30 s，56.2 ℃退火30 s，72 ℃延伸2 min，循環(huán)35次；72 ℃延伸8 min，4 ℃保存。PCR產(chǎn)物用1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測，利用DNA純化試劑盒純化回收PCR產(chǎn)物，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.4 目的片段TA克隆與鑒定 回收純化后的PCR產(chǎn)物在16 ℃與pMD19-T載體過夜連接，將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化至DH5α感受態(tài)細(xì)胞，篩選陽性克隆，送成都擎科梓熙生物技術(shù)有限公司測序。

1.3.5 生物信息學(xué)分析 使用NCBI中ORF Finder程序?qū)︻悶觚R牦牛MEF2A基因進(jìn)行開放閱讀框分析，利用DNAStar軟件分析堿基組成。運(yùn)用SOPMA、PHYREZ、Raswin等在線軟件預(yù)測MEF2A基因二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)。利用TMHMM Server v.2.0、NetPhos 3.1 Server等軟件分析MEF2A基因的跨膜區(qū)、磷酸位點(diǎn)，PSORT Prediction在線軟件對亞細(xì)胞定位進(jìn)行預(yù)測和分析；利用MegAlign和MEGA 6.0軟件進(jìn)行同源性比對和系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建。

1.3.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR) 根據(jù)GenBank中β-actincDNA序列設(shè)計(jì)特異性引物，并以克隆所得MEF2A基因序列設(shè)計(jì)后續(xù)定量引物。qRT-PCR反應(yīng)體系(10 μL)：上、下游引物各0.4 μL，模板cDNA 0.8 μL(將反轉(zhuǎn)錄后的cDNA稀釋3～5倍使用)，2×SuperReal Pre-Mix Plus(SYBR Green) 5 μL，RNAase-Free ddH2O 3.4 μL。PCR擴(kuò)增程序：Segment1：95 ℃ 30 s；Segment2：95 ℃ 5 s；60 ℃ 20 s，39個(gè)循環(huán)。溶解曲線由BIORED熒光定量PCR儀自帶程序繪制。采用2-ΔΔCt法對MEF2A基因mRNA表達(dá)水平進(jìn)行相對定量分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 牦牛MEF2A基因總RNA提取

類烏齊牦牛肝臟組織總RNA經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測，存在5S、18S、28S條帶(圖1)，說明RNA的完整性良好，滿足后續(xù)試驗(yàn)需要。

2.2 牦牛MEF2A基因目的片段擴(kuò)增與TA克隆

經(jīng)檢測MEF2A基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物長1 882 bp，目的條帶單一、明亮，片段大小與預(yù)期結(jié)果一致(圖2)。篩選陽性菌液進(jìn)行測序，經(jīng)Blast比對分析，類烏齊牦牛MEF2A基因序列與普通牛MEF2A基因序列同源性達(dá)99%。

2.3 牦牛MEF2A基因CDS區(qū)核苷酸序列及編碼氨基酸序列分析

應(yīng)用NCBI中ORF Finder程序分析牦牛MEF2A基因序列，包括5個(gè)開放閱讀框，根據(jù)Kozak法則，獲得長1 469 bp ORF，起始密碼子ATG位于269 bp處，終止密碼子TAA位于1 738 bp處，由此得出牦牛MEF2A基因CDS區(qū)全長1 469 bp，其堿基組成分別為A (27.41%)、T(21.29%)、G(23.40%)、C(27.89%)，其中(G+C)略高于(A+T)，共編碼489個(gè)氨基酸(圖3)。

2.4 牦牛MEF2A蛋白理化性質(zhì)分析

利用ProtParam與Proteam軟件預(yù)測牦牛MEF2A蛋白的理化性質(zhì)，可知牦牛MEF2A蛋白分子式為C2263H3601N647O742S20，分子量為52 385.58，總原子數(shù)為7 273，理論等電點(diǎn)(pI)為6.27，該蛋白屬酸性蛋白質(zhì)。氨基酸中Ser(13.9%)、Pro(11.7%)的含量較高，極性氨基酸占41%，疏水性氨基酸占39.9%，酸性氨基酸占9.0%，堿性氨基酸占10.0%(表2)。消光系數(shù)(γ=280 nm/( mol·cm) )為27 515，不穩(wěn)定指數(shù)60.68，表明該蛋白質(zhì)為不穩(wěn)定蛋白。脂溶系數(shù)64.60，親水性平均值為-0.604，故此蛋白為親水性蛋白。

表2 牦牛MEF2A基因編碼蛋白氨基酸組成Table 2 The composition of amino acid coded byyak MEF2A gene

運(yùn)用ExPASy-ProtScale在線分析軟件預(yù)測牦牛MEF2A基因編碼蛋白的親水性/疏水性(圖4)，第30位Cys疏水性最強(qiáng)(Max=2.162)，第66位Glu親水性最強(qiáng)(Min=-2.608)，MEF2A含有較強(qiáng)的親水區(qū)域，屬于可溶性蛋白。

使用TMHMM Server v.2.0軟件對MEF2A蛋白進(jìn)行跨膜區(qū)分析，結(jié)果顯示MEF2A蛋白包含489個(gè)氨基酸，其氨基酸均位于細(xì)胞膜表面，未發(fā)現(xiàn)跨膜螺旋區(qū)(圖5)，這與該蛋白質(zhì)親水性區(qū)域的分析結(jié)果基本一致。

2.5 牦牛MEF2A蛋白二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測分析

蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)主要是指多肽鏈主鏈骨架中局部的構(gòu)象，對其進(jìn)行預(yù)測分析可以有效認(rèn)識(shí)蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)[10]。使用SOPMA 在線軟件預(yù)測牦牛MEF2A蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明，牦牛MEF2A蛋白分別由63.83%無規(guī)則卷曲、21.06%α-螺旋、10.84%延長鏈和3.27%β-轉(zhuǎn)角構(gòu)成。用SWISS-MODEL在線軟件對牦牛MEF2A進(jìn)行同源建模，得到三級(jí)結(jié)構(gòu)模型(圖6)，發(fā)現(xiàn)其主要由無規(guī)卷曲、 螺旋和延長鏈在空間上折疊形成，與二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測結(jié)果基本一致。

2.6 牦牛MEF2A亞細(xì)胞定位及蛋白質(zhì)功能結(jié)構(gòu)預(yù)測

利用PSORT II Prediction軟件對牦牛MEF2A基因的亞細(xì)胞定位進(jìn)行預(yù)測分析。結(jié)果顯示，MEF2A基因在細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、線粒體、分泌系統(tǒng)囊泡中的分布比例分別為52.2%、26.1%、17.4%和4.3%，在細(xì)胞核中的分布最多。利用Psipred的FFpred預(yù)測蛋白質(zhì)功能，結(jié)果見圖7，發(fā)現(xiàn)該蛋白主要富集在分子功能(Molecular Function,MF)、生物學(xué)過程(Biological Process,BP)和細(xì)胞組成(Cell Component,CC)3個(gè)部分；在生物學(xué)過程方面主要參與轉(zhuǎn)錄、調(diào)節(jié)基因表達(dá)、高分子生物合成過成、氮化合物代謝過程、以及RNA合成過程；分子功能方面則主要在調(diào)節(jié)區(qū)DNA結(jié)合、RNA聚合酶II調(diào)節(jié)區(qū)的DNA結(jié)合以及細(xì)胞骨架蛋白、微管蛋白、肌動(dòng)蛋白結(jié)合方面發(fā)揮調(diào)控作用。

運(yùn)用NetPhos 3.1 Server在線分析軟件對牦牛MEF2A基因編碼蛋白的磷酸化位點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測，結(jié)果顯示該基因編碼蛋白共含有71處磷酸化位點(diǎn)(圖8)。其中包含絲氨酸(serine)磷酸化位點(diǎn)48處，蘇氨酸(Threonine)磷酸化位點(diǎn)17處，酪氨酸(Tyrosine)磷酸化6處。

2.7 牦牛MEF2A同源性及系統(tǒng)發(fā)育分析

利用MegAlign軟件對普通牛、家貓、家犬、綿羊、小鼠、金錢豹、寬吻海豚、抹香鯨、美洲野牛、白犀、馬、東北虎、猴13個(gè)物種的MEF2A基因CDS區(qū)編碼氨基酸序列進(jìn)行Clustal W比對，結(jié)果見表3。通過Mega 6.0軟件中NJ法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，其中美洲野牛和小鼠聚為一類，牦牛與普通牛、綿羊聚為一類，且氨基酸序列同源性較高，親緣關(guān)系較為接近，與金錢豹、東北虎的親緣關(guān)系稍遠(yuǎn)，符合進(jìn)化規(guī)律(圖9)。

2.8 牦牛MEF2A基因在不同組織間的表達(dá)

對牦牛MEF2A基因的臀肌、心臟、肝臟、肺臟進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量分析。結(jié)果表明，MEF2A基因在臀肌組織中的表達(dá)量最高，為2.500±0.405，其次是心臟(1.461±0.010)和肝臟(0.801±0.357)，肺臟最低(0.452±0.158)，不同組織表達(dá)量差異顯著(P<0.05)。

3 討 論

MEF2A基因又稱為MEF2因子，屬于MADS超家族成員之一，存在于所有真核生物中。MEF2A基因在神經(jīng)元、心肌細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等多種特殊細(xì)胞類型中具有重要調(diào)控作用[10]。Zhu等[11]利用神經(jīng)干細(xì)胞研究了轉(zhuǎn)錄因子MEF2A在體外神經(jīng)元分化和發(fā)育中的作用，發(fā)現(xiàn)MEF2A存在于未分化的神經(jīng)干細(xì)胞中，且分化后在神經(jīng)元子集中的表達(dá)水平明顯高于非神經(jīng)元細(xì)胞，證明MEF2A與神經(jīng)干細(xì)胞的分化和成熟有關(guān)。Meyer等[12]通過轉(zhuǎn)錄因子MEF2A改變下丘腦神經(jīng)元形態(tài)，OTR-MAPK-MEF-2A通路在下丘腦神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)改變中起關(guān)鍵作用。Foroughmand等[13]研究顯示MEF2A基因多態(tài)性與冠心病(CAD)病因顯著相關(guān)。劉本榮等[14]認(rèn)為，轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)(TFBS)受到MEF2A啟動(dòng)子區(qū)SNPs的影響，其轉(zhuǎn)錄活性具有差異性，啟動(dòng)子的純合度與CAD易感性呈正相關(guān)。此外，在畜禽育種方面，MEF2A基因被認(rèn)為是影響屠宰性狀與生長發(fā)育的候選基因。易恒潔等[15]揭示了MEF2A基因多態(tài)性與三穗鴨屠體性狀的相關(guān)性。祁艷霞等[16]研究發(fā)現(xiàn)，在南陽黃牛肌肉發(fā)育過程中，MEF2A基因在3月齡時(shí)表達(dá)量最低，在12月齡和18月齡時(shí)表達(dá)量顯著升高，隨后表達(dá)量下降。彭邦星等[17]對興義鴨的研究則闡明了MEF2A基因功能和結(jié)構(gòu)對其遺傳效應(yīng)的影響。

表3 牦牛與其它物種MEF2A基因的序列同源性比對Table 3 Sequence homologies alignment of yak and other species for MEF2A gene

圖9MEF2A基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹
Fig.9 The phylogenetic tree ofMEF2AGene

目前，已有鼠、黃牛、豬、羊、鴨等物種MEF2A基因的研究報(bào)道，而關(guān)于牦牛MEF2A基因的研究卻鮮有報(bào)道。本研究采用RT-PCR技術(shù)結(jié)合生物信息學(xué)分析方法，成功獲得牦牛MEF2A基因CDS區(qū)核苷酸序列，全長1 469 bp，共編碼489個(gè)氨基酸，這與陳付英等[18]對黃牛MEF2A基因CDS區(qū)克隆結(jié)果相似，且發(fā)現(xiàn)MEF2A基因長度和編碼氨基酸殘基數(shù)與普通牛、綿羊相似，與個(gè)別物種如家犬、馬、家貓等略有不同。MEF2A基因第4位堿基G為偏好堿基，其翻譯起始位點(diǎn)遵循Kozak規(guī)則，這表明MEF2A基因具有較高翻譯效率。對類烏齊牦牛MEF2A基因編碼蛋白的理化性質(zhì)分析發(fā)現(xiàn)，絲氨酸和脯氨酸占比最大。作為一種非必需氨基酸，絲氨酸在對細(xì)胞膜的加工、肌肉組織和包圍神經(jīng)細(xì)胞鞘的合成中均發(fā)揮作用[19]，這與MEF2A基因參與細(xì)胞大分子生物合成的功能預(yù)測結(jié)果相一致。MEF2A蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)在空間結(jié)構(gòu)上主要由無規(guī)則卷曲、 螺旋和延長鏈盤旋折疊而成，其中無規(guī)則卷曲占63.83%。作為構(gòu)成蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)的重要元素之一，無規(guī)則卷曲受側(cè)鏈相互作用的影響較大，常參與構(gòu)成酶活性部位和其它蛋白質(zhì)特異功能部位，如在很多鈣結(jié)合蛋白中能夠與鈣離子EF手型結(jié)構(gòu)的中央環(huán)結(jié)合[20]。蛋白質(zhì)功能預(yù)測表明MEF2A基因在細(xì)胞內(nèi)部能夠調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白結(jié)合過程，這間接勢必會(huì)造成細(xì)胞骨架的分布狀態(tài)發(fā)生變化，推測這可能與該蛋白結(jié)構(gòu)中高比例的無規(guī)則卷曲相關(guān)。蛋白質(zhì)磷酸化是調(diào)節(jié)和控制蛋白質(zhì)活力與功能的重要調(diào)控機(jī)制，大多發(fā)生在絲氨酸(serine, S)，蘇氨酸(threonine, T)或酪氨酸(tyrosine, Y)三個(gè)殘基上[21]。MEF2A蛋白共含有71處磷酸化位點(diǎn)，其中serine磷酸化位點(diǎn)為48處，這表明MEF2A蛋白在蛋白激酶的催化下，能夠轉(zhuǎn)移更多ATP或CTP磷酸基團(tuán)到底物蛋白氨基酸殘基，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)部信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)。Chen等[22]研究顯示，蛋白激酶B2(AKT2)能夠通過EndoG-MEF2A信號(hào)誘導(dǎo)心肌細(xì)胞的體積減小，其缺乏會(huì)造成心肌細(xì)胞發(fā)育遲緩，并認(rèn)為MEF2A需要與跟信號(hào)應(yīng)答相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子協(xié)同作用才能激活肌肉進(jìn)行表達(dá)，這與本研究中對磷酸化位點(diǎn)進(jìn)行分析所得出的結(jié)果相吻合。

亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示，該基因主要分布于細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、線粒體以及分泌系統(tǒng)的囊泡中，且在細(xì)胞核中占比最高。細(xì)胞核是遺傳信息的儲(chǔ)存場所，DNA對轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)需要依靠轉(zhuǎn)錄因子和RNA聚合酶。功能預(yù)測表明，MEF2A蛋白在生物學(xué)過程中參與轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)與DNA模板化，能夠影響RNA聚合酶II調(diào)節(jié)區(qū)的DNA結(jié)合，這在Silva等[23]研究中有所涉及，但并未揭示其詳細(xì)的調(diào)控機(jī)制。同源性能直觀反映出物種間親緣關(guān)系的親疏性。從牦牛與普通牛、家貓、家犬、綿羊、小鼠、金錢豹等13個(gè)物種的氨基酸序列同源性比對可知，不同物種間氨基酸親緣關(guān)系較接近，而利用MEF2A氨基酸序列構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹與動(dòng)物分類觀點(diǎn)相一致，表明MEF2A基因在漫長的物種進(jìn)化過程中高度保守。

在肌肉發(fā)育過程中，MEF2基因家族成員表達(dá)具有組織特異性和發(fā)育時(shí)空性[24]。牦牛MEF2A基因的組織表達(dá)結(jié)果顯示，MEF2A基因在牦牛臀肌中表達(dá)量最高，其次是心臟，在肝臟和肺臟中亦有較低的表達(dá)量。這與李善高等[25]在正常大鼠肝臟組織中得到的結(jié)果一致。高等動(dòng)物個(gè)體運(yùn)動(dòng)主要依賴于骨骼肌的收縮。肌球蛋白作為肌細(xì)胞的重要組成部分，是細(xì)胞骨架中微絲(又稱肌動(dòng)蛋白絲)的主要結(jié)構(gòu)，在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中能夠形成細(xì)胞的收縮性結(jié)構(gòu)。MEF2A基因作為肌生成過程中的重要轉(zhuǎn)錄因子，能夠參與激活骨骼肌的修復(fù)再生[26]。馮劍等[27]通過對骨骼肌損傷修復(fù)過程中參與骨骼肌損傷后再生的生長因子進(jìn)行歸納,揭示了骨骼肌生長因子、肌球蛋白重鏈及膠原在骨骼肌損傷修復(fù)中的作用。由此推測，MEF2A在非肌肉組織中的微量表達(dá)可能與細(xì)胞骨架中微絲的生成有關(guān)，但是具體的生命活動(dòng)過程尚處未知。

4 結(jié) 論

本研究通過RT-PCR技術(shù)及生物信息學(xué)分析方法克隆分析類烏齊牦牛MEF2A基因CDS區(qū)序列，并采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)行組織定量分析，發(fā)現(xiàn)牦牛MEF2A蛋白由489個(gè)氨基酸組成，屬于親水性蛋白，且沒有跨膜結(jié)構(gòu)，主要存在于細(xì)胞核中；該基因在臀肌中的表達(dá)量較高，說明該基因與牦牛肌肉代謝有關(guān)。研究結(jié)果為進(jìn)一步改善牦牛肉質(zhì)和優(yōu)質(zhì)育種，探究MEF2A基因的生物學(xué)功能奠定初步的理論基礎(chǔ)。