楊丹
喹諾酮類藥物,特別是氟喹諾酮類抗生素的發(fā)展史可追溯到半個世紀(jì)之前。氟喹諾酮類藥物又可稱為吡啶酮酸類、吡酮酸類、沙星類藥物,屬于含氟第三代氟喹諾酮類化學(xué)合成抗生素,是廣泛應(yīng)用的人工合成抗菌藥。喹諾酮類藥物主要通過阻斷DNA回旋酶,造成細(xì)菌DNA不可逆損害來達(dá)到抗菌效果,它們具有抗菌、抗支原體、抗球蟲等作用。因喹諾酮類藥物對多種革蘭氏陰性菌具有良好的殺菌作用,是養(yǎng)殖中常用到的三大類藥物之一,主要用于預(yù)防和治療畜禽及魚類的感染性病狀。因為喹諾酮類藥物價格低廉、抗菌譜廣,被廣泛應(yīng)用于臨床和獸藥領(lǐng)域。
濫用引發(fā)的環(huán)境危害和人類疾病風(fēng)險成為目前的焦點,甚至在經(jīng)濟利益的誘惑下,在養(yǎng)殖、加工貯存等過程中添加過量的抗菌藥物,造成抗生素類藥物殘留量超標(biāo)。喹諾酮類藥物殘留通過食物進入人體,造成人類中毒、過敏,甚至致癌、致畸、致突變等嚴(yán)重后果,給消費者的健康帶來潛在的危害。有些國家將喹諾酮類藥物列為禁藥,或嚴(yán)格要求用量。目前,歐盟制定的喹諾酮類藥物在動物源性食品中的殘留標(biāo)準(zhǔn)是不超過100納克/毫升。
目前,常用于畜產(chǎn)品中氟喹諾酮類抗生素殘留的前處理方法有固相萃取法、基質(zhì)固相分散萃取法、超臨界流體萃取法、固相微萃取、分子印跡聚合物法、分散液液微萃取等方法。檢測畜產(chǎn)品中殘留的喹諾酮的方法有高效液相色譜法、液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜—四極桿—飛行時間質(zhì)譜法、熒光免疫測定法、免疫學(xué)方法等。膠體金免疫層析技術(shù)分為競爭法、間接法和雙抗夾心法。膠體金法檢測原理是以條狀纖維層析材料為固相,樣品溶液在毛細(xì)作用下在層析條上泳動,使樣品中的層析材料上針對待測物質(zhì)的受體與待測物產(chǎn)生特異性強、親和性高的結(jié)合。在層析過程中免疫復(fù)合物容易被截留或富集在層析材料的一定范圍內(nèi),可以通過酶促的顯色反應(yīng)或直接使用可目測的著色標(biāo)記物來標(biāo)記,在短時間內(nèi)就可以觀察到直觀的實驗結(jié)果。禽蛋中的藥物殘留主要使用膠體金免疫層析技術(shù)的競爭法。試紙條對含有恩諾沙星、沙拉沙星、雙氟沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、培氟沙星、依諾沙星和惡喹酸等藥物的豬尿樣品的檢出限值為20微克/升,檢測的特異性高,在37℃時可保存160天左右;在4℃時,可保存24個月。膠體金免疫層析技術(shù)在基層養(yǎng)殖場易操作、易廣泛應(yīng)用,對工作人員的專業(yè)要求技術(shù)水平不高,應(yīng)用到基層養(yǎng)殖場比較切合實際且便捷。
質(zhì)譜分析是先將樣品離子化,按離子的質(zhì)荷比再進行分離,測量每個離子譜峰的強度,實現(xiàn)分析目的的分析方法。色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用將色譜的分離能力與質(zhì)譜的定性功能相配合起來,實現(xiàn)對復(fù)雜混合物進行更精準(zhǔn)的定量和定性分析,簡化了樣品的前處理過程,使分析樣品的過程更簡單、快捷。高效液相色譜法擁有靈敏、快速、高分辨率、重復(fù)性穩(wěn)定的優(yōu)點,已經(jīng)普遍應(yīng)用到物質(zhì)的定量和定向分析檢測。在分析氟喹諾酮類抗生素殘留中,高效液相色譜需要根據(jù)不同動物源性樣品選用相應(yīng)的檢測器進行操作,通過回收率、定量限和檢出限等系列參數(shù)計算出喹諾酮類藥物的殘留量。