張媛媛，祁秀玲，焦艷

（滄州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河北 滄州 061000）

微球技術(shù)在近些年出現(xiàn)的一種新的藥物傳遞系統(tǒng)工藝和技術(shù)。當(dāng)前針對(duì)微球制劑的研究主要是針對(duì)難溶性藥物，主要是在這一藥物微球制備中存在多種問(wèn)題。例如，包封率低、載藥量不足等等，容易出現(xiàn)突釋情況，對(duì)于微球技術(shù)的應(yīng)用廣泛性具有限制作用。本次則對(duì)鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的制備及其緩釋效果展開(kāi)分析，以能夠提出相應(yīng)的制備工藝優(yōu)化方案。

1 項(xiàng)目背景

載藥緩釋條件對(duì)于藥物緩釋性和療效具有顯著提升作用，可以降低藥物對(duì)其他臟器組織的不良作用。目前，材料領(lǐng)域和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中均非常重視對(duì)于具有靶向緩釋效果藥物載體的研究。截止到目前關(guān)于載藥材料的研究主要是在碳納米管、石墨烯以及多功能分子等上，但是這一制備工藝比較復(fù)雜，同時(shí)價(jià)格也偏高［1-2］。鹽酸二甲雙胍在II型糖尿病患者治療中是常用藥物之一，但是在應(yīng)用中經(jīng)常會(huì)因?yàn)槲钢邢富蛭杆岬母g作用影響，從而出現(xiàn)過(guò)早釋放行為。針對(duì)這一問(wèn)題，經(jīng)常會(huì)將要去通過(guò)藥物載體制作成為藥物緩釋材料，為實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物過(guò)早釋放的阻止，能夠確?；颊唧w內(nèi)鹽酸二甲雙胍藥物能夠長(zhǎng)時(shí)間維持有效濃度，主要采用的有非水溶劑蒸發(fā)法制備乙基纖維素漂浮微球、殼聚糖-乙烯基吡咯烷酮載體制備共混微球等［3］?；诖耍敬吾槍?duì)鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的制備工藝實(shí)施優(yōu)化分析，探討不同合成條件下對(duì)微球平衡吸附量（Q）、通過(guò)吸附容量值來(lái)比較各因素對(duì)微球合成的影響，探討這一微球制備工藝下的藥物包封率和緩釋效果，為鹽酸二甲雙胍藥物緩釋性和療效提供新的研究方向，同時(shí)也能夠?yàn)椴捎没颊吲R床鹽酸二甲雙胍藥物治療提供新的方向，提升患者臨床治療總有效性，改善患者預(yù)后［4］。

2 鹽酸二甲雙胍分子印跡微球制備工藝

2.1 鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的制備

將模板分子鹽酸二甲雙胍與溶劑、功能單體混合并攪拌30min，放置12h后得到混合溶液。加入交聯(lián)劑EGDMA，超聲30min，得到了預(yù)聚合溶液，再加入致孔劑，通N2除O215min后，加入引發(fā)劑AIBN、密封，于適宜溫度下水浴攪拌聚合反應(yīng)10h。離心后得聚合物，用甲醇／乙酸的溶液進(jìn)行模板分子的洗脫，直至檢測(cè)不到洗脫液中含有的模板分子為止，然后用甲醇洗去殘留的乙酸，再使用超純水將聚合物洗滌，于真空烘干至恒重，得到MIPs。空白對(duì)照組 （NIPs）的制備過(guò)程與MIPs制備過(guò)程相同，只是不添加鹽酸二甲雙胍。

2.2 鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的制備工藝優(yōu)化

實(shí)驗(yàn)采用單因素法考察不同合成條件下對(duì)微球平衡吸附量 （Q）、通過(guò)吸附容量值來(lái)比較各因素對(duì)微球合成的影響。

主要考慮范圍：

①溶劑選擇：無(wú)水乙醇、甲醇。

②溶劑用量：15、20、30、40mL。

③功能單體的選擇：丙烯酰胺 （AM）、甲基丙烯酸 （MAA）。

④功能單體用量：mol（鹽酸二甲雙胍：功能單體）：1∶1、1∶2、1∶4、1∶6。

⑤合成溫度：50℃、55℃、60℃。

⑥交聯(lián)劑用量：mol（鹽酸二甲雙胍：EGDMA）：1∶10、1∶15、1∶20、1∶30。

2.3 研究目的

本次實(shí)驗(yàn)研究主要是實(shí)現(xiàn)以下目的：

1）鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的制備工藝及優(yōu)化方案，以能夠探討不同合成條件下對(duì)微球合成的影響。2）針對(duì)鹽酸二甲雙胍分子印跡微球表征以及性能實(shí)施評(píng)價(jià)，以能夠探討鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的表面形態(tài)、分子結(jié)構(gòu)，并通過(guò)動(dòng)態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)探討聚合物吸附量的動(dòng)態(tài)變化特點(diǎn)分析，實(shí)現(xiàn)對(duì)其性能的評(píng)估分析。3）針對(duì)洗脫前后溶液中的鹽酸二甲雙胍濃度實(shí)施檢測(cè)對(duì)比，采用紫外分光光度法測(cè)定鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的載藥量，且對(duì)其體外釋放性能展開(kāi)分析，以能夠確定相應(yīng)的應(yīng)價(jià)值［5-6］。

3 實(shí)驗(yàn)過(guò)程

3.1 材料選擇和設(shè)備應(yīng)用

材料主要包括有：鹽酸二甲雙胍、溶劑、功能單體、致孔劑、甲醇／乙酸、超純水。

設(shè)備主要有：S-3400N鎢燈絲、德國(guó)Bruker公司FTIR Tensor-27IS10傅里葉紅外光譜儀、UV2550島津有限公司紫外分光光度計(jì)、恒溫振蕩器。

3.2 MIPs的表征及性能評(píng)價(jià)

1）MIPs電鏡掃描。采用 S-3400N鎢燈絲掃描電子顯微鏡對(duì)鹽酸二甲雙胍-MIPs進(jìn)行掃描，觀察其表面形態(tài)。

2）MIPs紅外光譜。用IS10傅里葉紅外光譜儀，用KBr壓片法，對(duì)鹽酸二甲雙胍、鹽酸二甲雙胍-MIPs及NIPs，在4000～400cm-1進(jìn)行紅外光譜分析，通過(guò)鑒定未知物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)。

3）MIPs吸附行為研究。a）動(dòng)態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)。通過(guò)MIPs吸附動(dòng)力學(xué)研究，得出聚合物吸附量隨時(shí)間變化的關(guān)系。b）等溫吸附實(shí)驗(yàn)。通過(guò)MIPs等溫吸附實(shí)驗(yàn)，得出聚合物的吸附量與鹽酸二甲雙胍濃度的關(guān)系。c）選擇性吸附實(shí)驗(yàn)。通過(guò)選擇性吸附實(shí)驗(yàn)，比較聚合物對(duì)鹽酸二甲雙胍、鹽酸丁二胍、鹽酸苯乙雙胍的選擇性吸附。

3.3 鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的體外釋放性能研究

1）模擬胃液的配制：將2.0g氯化鈉溶于7mL12mol／L鹽酸溶液中，超純水定容至1L即得模擬胃液 （pH＝1.2）。

模擬腸液的配置：取0.2mol／L磷酸二氫鉀溶液250mL，加入0.2mol／L氫氧化鈉溶液118mL，用水稀釋至1L得模擬腸液 （pH＝6.8）。

2）體外釋放試驗(yàn)：將吸附鹽酸二甲雙胍后的MIPMs和NIPMs各50mg，分別置于磨口錐形瓶中，各加入人工胃液 （pH＝1.2）10 mL于轉(zhuǎn)速為70 r／min的恒溫振蕩器上震蕩，每隔1h、取出上層清液，利用紫外光度法檢測(cè)其中鹽酸二甲雙胍濃度。

將吸附鹽酸二甲雙胍后的MIPMs和NIPMs各50mg，分別置于磨口錐形瓶中，各加入人工腸液（pH＝6.8）10 mL于轉(zhuǎn)速為70 r／min的恒溫振蕩器上震蕩，每隔1h、取出上層清液，利用紫外光度法檢測(cè)其中鹽酸二甲雙胍濃度。

通過(guò)檢測(cè)模擬胃腸液中鹽酸二甲雙胍的濃度來(lái)觀察鹽酸鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的緩釋效果。

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

4.1 載藥微球的制備

通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)鹽酸二甲雙胍分子印跡微球，在交聯(lián)溫度在25～40℃，包封率在溫度升高過(guò)程會(huì)逐漸加大，達(dá)到40℃后包封率達(dá)到63.83%。

4.2 載藥微球的表征

為能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)載藥微球內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察，采用電子顯微鏡對(duì)其橫切面形貌進(jìn)行觀察。觀察發(fā)現(xiàn)，載藥微球表面粗糙，放大觀看可以發(fā)現(xiàn)藥物均勻分布在交聯(lián)結(jié)構(gòu)中，相互交錯(cuò)，從而在載藥微球內(nèi)部形成了復(fù)合結(jié)構(gòu)，有助于顯著提升藥物的包封率和緩釋性能。

4.3 載藥微球的緩釋性能分析

為針對(duì)載藥微球緩釋性能分析，將其分別在人工胃液和人工腸液中進(jìn)行試驗(yàn)分析，對(duì)比鹽酸二甲雙胍的濃度，以此對(duì)其緩釋效果評(píng)估。結(jié)果顯示載藥微球在人工胃液酸性環(huán)境下，即pH＝1.2情況下，溶脹比相對(duì)偏小，但是在人工腸液中性環(huán)境下，即為pH＝6.8情況下，溶脹比出現(xiàn)顯升高后穩(wěn)定趨勢(shì)。由此可見(jiàn)載藥微球在中性環(huán)境中的溶脹比明顯高于在酸性環(huán)境中，可見(jiàn)載藥微球?qū)τ趐H具有較高敏感性。

5 討論

通過(guò)以上分析，實(shí)現(xiàn)了對(duì)以下問(wèn)題的分析：1）針對(duì)鹽酸二甲雙胍分子印跡微球制備工藝實(shí)施優(yōu)化分析，采用單因素法針對(duì)不同合成條件下對(duì)微球平衡吸附量 （Q）、通過(guò)吸附容量值來(lái)對(duì)比，以此探討各因素對(duì)微球合成的影響［7］；2）比較了鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的體外釋放性能，通過(guò)檢測(cè)模擬胃腸液中鹽酸二甲雙胍的濃度來(lái)觀察鹽酸鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的緩釋效果。同時(shí)也獲取了以下相關(guān)成就：1）獲得鹽酸鹽酸二甲雙胍分子印跡微球表征、性能、載藥量以及緩釋效果實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)，為鹽酸鹽酸二甲雙胍分子印跡微球有更加全面的認(rèn)識(shí)。2）基于對(duì)鹽酸鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的緩釋效果的了解，優(yōu)化鹽酸鹽酸二甲雙胍分子印跡微球的合成條件，合理使用鹽酸鹽酸二甲雙胍分子印跡微球，改善患者預(yù)后［8-9］。