梁倩 李春燕 單正威 秦趙曦 胡勇 劉蔚漪

摘要：為篩選對(duì)煙蚜具有顯著殺蟲(chóng)活性的植物資源，采用浸漬法測(cè)定了20種植物粗提物對(duì)煙蚜的室內(nèi)毒力活性。結(jié)果表明，濃度為48.83mgL時(shí)，節(jié)節(jié)草（Equisetum ramosissimum，）、禿瘡花（Dicranostigma leptopodum）和臭（Ailanthusaltissima）粗提物24h校正死亡率均在50%以上，分別為53.3396，56.67%，74.67%，臭椿粗提物對(duì)煙蚜的校正死亡率最高。比較20種植物粗提物處理煙蚜的Co值，臭樁、禿瘡花、節(jié)節(jié)草和曼陀羅（Datura str'amoniumn）殺蟲(chóng)活性較強(qiáng)，LCso值依次為26.618，29.179，41.484和87.741mgL，均小于100mgL，臭樁粗提物的殺蟲(chóng)活性最強(qiáng)。研究結(jié)果為煙蚜的生物防治以及植物源的科學(xué)利用提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：植物粗提物臭樁;篩選;煙蚜

煙蚜（Myzus persicae Sulzer）俗稱蜜蟲(chóng)、膩蟲(chóng)等，屬同翅目（homoptera），蚜科（Aphididae）瘤蚜屬（Mzs），是世界性分布的害蟲(chóng)，危害包括煙草在內(nèi)的400多種植物，也是煙草的主要害蟲(chóng)，我國(guó)各煙區(qū)均有發(fā)生，。煙蚜以其口針刺吸煙葉汁液，導(dǎo)致煙葉產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差，化學(xué)成分發(fā)生變化。另外，煙蚜分泌的蜜露可誘發(fā)煤污病，使煙葉表面變黑、葉柄發(fā)脆、腐爛。除直接為害煙草外，煙蚜還傳播多種煙草病毒，如黃瓜花葉病毒（CMV）、煙草花葉病毒、馬鈴薯Y病毒（PVY）、煙草蝕紋病毒（TEV）等。

長(zhǎng)期以來(lái)，我國(guó)防治煙蚜主要依賴化學(xué)農(nóng)藥，如吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒和抗蚜威等，導(dǎo)致煙蚜敏感性降低，造成蟲(chóng)害頻繁發(fā)生和大爆發(fā)，煙農(nóng)不得不加大農(nóng)藥用量，導(dǎo)致農(nóng)藥殘留，對(duì)非靶標(biāo)有益生物構(gòu)成威脅，殺死害蟲(chóng)天敵，造成環(huán)境污染，削弱生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。煙葉生產(chǎn)過(guò)程中積極推廣煙蚜的綠色防控技術(shù)，如用防蟲(chóng)網(wǎng)覆蓋大棚育苗、打頂抹、間作套種以及選育抗蚜品種的農(nóng)業(yè)防治技術(shù)，運(yùn)用黃色誘蚜、銀灰色和白色驅(qū)蚜、高壓靜電滅蚜的物理防治技術(shù)，利用煙蚜繭蜂、瓢蟲(chóng)食蚜癭蚊、南方小花蝽等捕食性天敵的生物防治技術(shù)，利用苦參堿、魚(yú)藤酮、苦皮藤素等植物源農(nóng)藥的防治技術(shù)，利用綠僵菌叫、金色毛売菌、漸狹蠟蚧菌、少根根霉菌和蠟蚧輪枝菌等的微生物防治技術(shù)，利用蚜蟲(chóng)報(bào)警信息素來(lái)驅(qū)避蚜蟲(chóng)等，均對(duì)煙蚜的控制取得了較好的效果。植物源殺蟲(chóng)劑作用機(jī)理獨(dú)特，結(jié)構(gòu)新穎，活性多樣，對(duì)昆蟲(chóng)常表現(xiàn)出毒殺、麻醉、引誘、忌避、干擾昆蟲(chóng)正常行為和生長(zhǎng)發(fā)育等活性，所含的殺蟲(chóng)活性物質(zhì)較為復(fù)雜，對(duì)有害生物高效，保護(hù)害蟲(chóng)天敵，對(duì)人畜及非靶標(biāo)生物安全，易分解，害蟲(chóng)不易產(chǎn)生抗性，成為當(dāng)前創(chuàng)新型農(nóng)藥研制的熱點(diǎn)已報(bào)道的具有殺蟲(chóng)活性的植物有2400多種。20世紀(jì)30年代，我國(guó)就對(duì)煙草、魚(yú)藤、巴豆、百部等植物進(jìn)行了廣泛的研究，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)楝科、衛(wèi)矛科、柏科、瑞香科、豆科、菊科等多種植物具有殺蟲(chóng)活性，已有煙堿、苦參堿、印素、茴蒿素和茶皂素等40余種植物源農(nóng)藥登記注冊(cè)。不同植物的毒性差異較大，并且特定植物對(duì)特定害蟲(chóng)具有特異的作用效果2。為了開(kāi)發(fā)更多的植物源農(nóng)藥，以煙蚜為靶標(biāo)，本研究從《中國(guó)土農(nóng)藥志》、《中國(guó)有毒植物》及《西雙版納有毒植物圖鑒》中選取20種殺蟲(chóng)植物，對(duì)其粗提物進(jìn)行室內(nèi)毒力活性試，篩選對(duì)煙蚜具有良好殺蟲(chóng)活性的植物資源，為煙蚜的生物防治提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1供試材料

1.1.1供試植物樣品供試植物樣品采于2019年67月，經(jīng)西南林業(yè)大學(xué)林學(xué)院藥用植物教研室胡勇副教授鑒定，供試植物樣品的名稱、拉丁名、采集地和采集部位見(jiàn)表1，采集的樣品陰干粉碎備用。

1.1.2供試煙蚜由云南省綠葉生防有限公司提供，飼養(yǎng)在西南林業(yè)大學(xué)林學(xué)院智能溫室大棚的煙苗上，選擇個(gè)體一致的無(wú)翅成蚜作為試蟲(chóng)。

1.2試驗(yàn)方法和條件

植物粗提物的制備20種植物樣品陰干、粉碎，用95%乙醇溶液常溫超聲提取3次，每次30min減壓濃縮得到浸膏。

1.2.2供試溶液的配制分別精確稱取一定量的浸膏于50mL的燒杯中，先用少量乙醇溶解，再用0.5%6的吐溫80配成50gL的母液。用0.5%的吐溫80水溶液作陰性對(duì)照，除蟲(chóng)菊酯作陽(yáng)性對(duì)照。

1.2.3室內(nèi)毒力測(cè)定采用浸漬法2，略有改動(dòng)測(cè)定20種植物粗提物對(duì)煙蚜的殺蟲(chóng)活性。通過(guò)預(yù)試驗(yàn)確定每種植物粗提物的測(cè)試濃度范圍，然后對(duì)每種粗提物設(shè)5個(gè)濃度，每個(gè)濃度重復(fù)6次。選取帶有蚜蟲(chóng)的新鮮煙葉，剔除有翅蚜和小若蚜，保留無(wú)翅成蚜10頭，將帶蚜葉片浸入配置好的不同濃度的溶液中5s，取出吸取多余藥液2，將葉片放入9cm培養(yǎng)皿中，用保鮮膜封口，針刺小孔，置于人工氣候培養(yǎng)箱，溫度（25±1）℃，相對(duì)濕度（65±5）%，光周期L：D=16h：8h，24h后檢查煙蚜存活情況。用毛筆輕觸蚜蟲(chóng)蟲(chóng)體無(wú)反應(yīng)時(shí)，即為死亡。校正死亡率采用Abbott校正公式計(jì)算，使用范圍為對(duì)照組的死亡率《20%。

死亡率（%）=死亡蟲(chóng)數(shù)

處理總蟲(chóng)數(shù)×100校正死亡率（%）=（處理組死亡率-對(duì)照死亡率）/（1-對(duì)照組死亡率）×100

1.2.4數(shù)據(jù)處理采用SPSS23.0軟件進(jìn)行單因素

Anova檢驗(yàn)分析，計(jì)算20種植物粗提物的半數(shù)致死濃度LC、LCso值的95%置信區(qū)間及毒力回歸方程。采用卡方值（）檢驗(yàn)毒力回歸方程的適合性。

2結(jié)果

2.120種植物粗提物對(duì)煙蚜的觸殺活性

由表2可以看出，不同植物粗提物對(duì)煙蚜均有不同程度的觸殺活性，煙蚜校正死亡率隨著濃度的升高而增大。當(dāng)濃度為390.63mgL時(shí)，禿瘡花、蒺藜、曼陀羅和杺果粗提物處理煙蚜的24h校正死亡率均在50%以上，分別為64.009%、60.67%6、67.67%和64.33%，曼陀羅粗提物處理煙蚜的校正死亡率最高。當(dāng)濃度為195.31mgL時(shí)，禿瘡花、石楠、節(jié)節(jié)草、蒺藜、曼陀羅、臭樁和杺果粗提物處理煙蚜的24h校正死亡率均在50%以上，分別為60.67%、58.67%、67.67%、53.33%、64.009%、85.33%、53.33%臭樁粗提物的最高。濃度為48.83mgL時(shí)，禿瘡花、節(jié)節(jié)草和臭椿粗提物處理煙蚜24h校正死亡率均在50%以上，分別為56.67%，53.33%6，74.67%臭樁粗提物的最高。

陰性對(duì)照0.5%吐溫80水溶液處理煙蚜24h校正死亡率為7%，陽(yáng)性對(duì)照除蟲(chóng)菊酯4mgL時(shí)，煙蚜24h校正死亡率為90%。

2.220種植物粗提物對(duì)煙蚜的觸殺毒力

根據(jù)表2的試驗(yàn)數(shù)據(jù)計(jì)算各粗提物的Cso值、LCso值的95%置信區(qū)間，擬合毒力回歸方程，數(shù)據(jù)見(jiàn)表3。從表3可以看出，20種植物粗提物對(duì)煙蚜均有一定程度的觸殺活性，其中臭樁24h的觸殺活性最強(qiáng)，LCo值為26.6l8mgL，小于其他19種植物粗提物;禿瘡花、節(jié)節(jié)草和曼陀羅的觸殺活性次之，24h的IC值分別為29.179、41.484、87.741mgL杺果、石楠、蒺藜、樟、密蒙花、長(zhǎng)春花、杠板歸、南天竹和大蝎子草的LCs值介于100～-1000mgL枇杷24h的觸殺活性最低，LCso值為2167433mgL。

3討論

煙草是我國(guó)重要經(jīng)濟(jì)作物之。煙蚜為害在煙草整個(gè)生長(zhǎng)期均有發(fā)生，且煙蚜具有繁殖速度快，繁殖率高等特點(diǎn)，成為制約煙草產(chǎn)量和質(zhì)量的重要因素。為了尋找對(duì)煙蚜殺蟲(chóng)活性較好的植物源農(nóng)藥，本文研究了20種植物粗提物對(duì)煙蚜的觸殺活性。結(jié)果表明，每種植物粗提物均有不同程度的觸殺活性，臭樁粗提物觸殺活性最強(qiáng)，LCo值為26618mgLe王德艷等報(bào)道了6種入侵植物（美洲商陸、白車軸草、紅花月見(jiàn)草、三葉鬼針草、飛機(jī)草、紫莖澤蘭）提取物對(duì)煙蚜的殺蟲(chóng)活性，白車軸草24h的觸殺毒力最強(qiáng)，ICo值為11460mgL，美洲商陸48h的觸殺毒力最強(qiáng)，LCso值為4110mgL;王芳等2報(bào)道了10種植物粗提物（苦豆子、牛心樸子、伏毛鐵棒錘、狼毒、披針葉黃華、乳漿大戟、翠雀、匍根駱駝蓬、淡味獐牙菜、地榆）對(duì)枸杞主要害蟲(chóng)的殺蟲(chóng)活性，披針葉黃華24h對(duì)枸杞蚜蟲(chóng)觸殺毒力最強(qiáng)，LCso值為258.90mgL;陳海珊等2報(bào)道了植物提取物（醉魚(yú)草、石蒜、白花曼陀羅、馬桑、博落回、青蒿和巴豆）對(duì)蘿卜蚜的室內(nèi)毒力研究，醉魚(yú)草24h的觸殺毒力最強(qiáng)，ICo值為157.73mgL趙千等報(bào)道了氧化樂(lè)果對(duì)麥蚜的LCs值為206.39mgL從以上數(shù)據(jù)可以看出，臭樁葉子對(duì)煙蚜的殺蟲(chóng)活性，均優(yōu)于以上植物粗提物，具有顯著的殺蟲(chóng)活性，甚至優(yōu)于農(nóng)藥氧化樂(lè)果。臭樁還對(duì)光肩星天牛2、菜青蟲(chóng)2、米象28、銹赤扁谷盜2、大豆包囊線蟲(chóng)有較好的毒殺作用。室內(nèi)毒力測(cè)定可以避免田間外界環(huán)境因素的影響，在一定程度上可以指導(dǎo)田間用藥。一般而言，室內(nèi)毒力越高的藥劑，在田間的防治效果越好，可以用來(lái)推斷田間藥劑的使用劑量，減少藥劑浪費(fèi)和環(huán)境污染?；瘜W(xué)農(nóng)藥長(zhǎng)期大量的使用，導(dǎo)致煙蚜的抗性增加，對(duì)煙蚜的防治應(yīng)輪換使用不同種類的生物殺蟲(chóng)劑進(jìn)行綜合防治，減小抗性選擇壓力，延緩抗性產(chǎn)生。

臭樁與其他19種植物相比，對(duì)煙蚜的控制效果最好。臭椿因樹(shù)皮及枝葉具有苦澀的味道，葉子基部腺點(diǎn)發(fā)出特殊的臭味而得名。臭樁在我國(guó)分布廣泛，生長(zhǎng)迅速，耐干旱、貧瘠，適應(yīng)性強(qiáng)、容易繁殖、病蟲(chóng)害少3，為臭椿作為殺煙蚜植物資源的開(kāi)發(fā)利用提供了便利。臭中含有萜類、生物堿、木脂素、黃酮及揮發(fā)油類化合物。其中苦木素是苦木科植物的特征化學(xué)成分，是臭椿屬的主要活性成分，為高度氧化的降三萜類化合物343，有C-20，C-19，C-22，C-25化學(xué)骨架。大多數(shù)的苦木素類化合物是具有20個(gè)碳骨架的苦木烷，以四環(huán)三萜和五環(huán)三萜最為常見(jiàn)。因其具有抗癌、細(xì)胞毒性、抗瘧、抗炎、抗病毒、除草、化感、殺蟲(chóng)等廣泛的生物活性而備受關(guān)注。臭樁對(duì)煙蚜的殺蟲(chóng)活性成分可能是其所含的苦木素類物質(zhì)。今后的研究應(yīng)以煙蚜為靶標(biāo)，運(yùn)用活性跟蹤的方法研究臭提取物殺蟲(chóng)的活性部位、活性組分、活性成分、殺蟲(chóng)機(jī)理及對(duì)煙蚜天敵的影響，為臭樁植物資源的開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

4結(jié)論

本試驗(yàn)測(cè)定了20種植物粗提物對(duì)煙蚜的室內(nèi)毒力活性，結(jié)果表明，每種植物粗提物對(duì)煙蚜均有不同程度的觸殺活性，其中臭、禿瘡花、節(jié)節(jié)草和曼陀羅殺蟲(chóng)活性較強(qiáng)。下一步的研究工作需要采用靶標(biāo)追蹤的方法對(duì)臭等強(qiáng)殺蟲(chóng)植物中的殺煙蚜活性成分進(jìn)行分離鑒定并確定殺煙蚜機(jī)理，本研究為殺煙蚜植物源農(nóng)藥的創(chuàng)制提供了理論基礎(chǔ)。

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