何 蓮,李建明,成淑芬,黃至?xí)?/p>
(1.湖南化工研究院 國(guó)家農(nóng)藥創(chuàng)制工程研究中心/湖南省農(nóng)用化學(xué)品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,長(zhǎng)沙 410014;2.湖南加法檢測(cè)有限公司,長(zhǎng)沙 410014)
小麥赤霉病(Fusarium graminearumSehw.)是一種危害小麥的重要病害,其病原菌屬半知菌亞門鐮孢屬亞洲鐮刀菌。小麥赤霉病是中國(guó)小麥生產(chǎn)上的重要病害,且逐年加重,對(duì)小麥的產(chǎn)量和品質(zhì)影響極大。赤霉病不僅造成小麥減產(chǎn)降質(zhì),其病菌產(chǎn)生的毒素可造成人畜中毒,嚴(yán)重危害人體健康。目前小麥赤霉病的防治主體藥劑仍為苯并咪唑類農(nóng)藥、多菌靈及其復(fù)配劑。近年來(lái)赤霉病的流行和用藥次數(shù)的增多,抗性赤霉病菌株逐年增加[1]。因此,尋求新的藥劑防治小麥赤霉病已迫在眉睫[2]。丙硫菌唑是一種新型廣譜三唑硫酮類殺菌劑,主要用于防治谷類、麥類、豆類作物等眾多病害。該劑的作用機(jī)制為抑制真菌中甾醇前體——羊毛甾醇或 2,4-亞甲基二氫羊毛甾14位的脫甲基化作用。肟菌酯屬甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑,具有高效、廣譜、保護(hù)、治療、鏟除、滲透、內(nèi)吸活性、耐雨水沖刷、持效期長(zhǎng)等特性,對(duì)抗 1,4-脫甲基化酶抑制劑、苯甲酰胺類、二羧胺類和苯并咪唑類藥劑的菌株有效。將肟菌酯與其他不同作用機(jī)制的殺菌劑制成混劑,可以延緩病原菌抗藥性的產(chǎn)生,擴(kuò)大抗菌譜、提高藥效,降低用藥量,減少費(fèi)用。因此,本研究將丙硫菌唑與肟菌酯進(jìn)行混配,明確較合理的配比,為其開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。
98%丙硫菌唑原藥和 96%肟菌酯原藥由湖南化工研究院有限公司提供,藥劑用DMF溶解,配制成5%乳油備用。
小麥赤霉病菌(Fusarium graminearum Sehw.)由湖南化工研究院生物測(cè)定研究中心保存培養(yǎng)。
丙硫菌唑(編號(hào)為 A) 設(shè) 100、50、25、12.5、6.25、3.125 mg/L 6個(gè)質(zhì)量濃度,每個(gè)質(zhì)量濃度設(shè)4次重復(fù),另設(shè)空白對(duì)照。
肟菌酯(編號(hào)為 B)設(shè) 200、100、50、25、12.5、6.25 mg/L 6個(gè)質(zhì)量濃度,每個(gè)質(zhì)量濃度設(shè)4次重復(fù),另設(shè)空白對(duì)照。
丙硫菌唑(編號(hào)為A)、肟菌酯(編號(hào)為B)及二者分別以2∶1、1.5∶1、1∶1、1∶1.5和1∶2混配,設(shè)100、50、25、12.5、6.25、3.125 mg/L 6個(gè)質(zhì)量濃度。
將5%的丙硫菌唑以及丙硫菌唑與肟菌酯混配制劑配成含有有效成分100、50、25、12.5、6.25、3.125 mg/L的溶液,吸取3 mL藥液,加入冷卻至45 ℃的27 mL PDA培養(yǎng)基中,制成所需藥液濃度為10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125 mg/L的培養(yǎng)基平板。將5%肟菌酯和混劑配制成含有有效成分200、100、50、25、12.5、6.25 mg/L的溶液,吸取3 mL藥液,加入冷卻至45 ℃的27 mL的PDA培養(yǎng)基中,制成所需藥液濃度為20、10、5、2.5、1.25、0.625 mg/L的培養(yǎng)基平板。然后從培養(yǎng)7 d的小麥赤霉病菌菌落邊緣制取6 mm直徑菌絲塊,移至各系列含藥培養(yǎng)基上,菌絲面朝下,每處理4次重復(fù)。處理完畢,置于28 ℃的恒溫生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。視對(duì)照生長(zhǎng)情況,采用十字法用卡尺量取各處理菌落直徑(cm),求出校正抑制百分率。
試驗(yàn)處理4 d后十字交叉測(cè)量菌落直徑,計(jì)算生長(zhǎng)抑制率(%)。
式中:D表示菌落增長(zhǎng)直徑;D1表示菌落直徑;D2表示菌餅直徑。
式中:I表示菌絲生長(zhǎng)抑制率;D0表示空白對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑;Dt表示藥劑處理菌落增長(zhǎng)直徑。
用“DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)”3.11專業(yè)版進(jìn)行數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計(jì),求出回歸直線、EC50、相關(guān)系數(shù)[3]。根據(jù) Sun&Johnson (1960)的共毒系數(shù)法(CTC)來(lái)評(píng)價(jià)藥劑混用的增效作用,即 CTC≤80為拮抗作用,80<CTC<120為相加作用,CTC≥120為增效作用。
混劑理論毒力指數(shù)(TTI)=藥劑A的毒力指數(shù)×A藥劑在混劑中所占的百分?jǐn)?shù)(%)+藥劑B的毒力指數(shù)×B藥劑在混劑中所占的百分?jǐn)?shù)(%)
設(shè)置丙硫菌唑和肟菌酯5個(gè)代表性混配比例,并對(duì)這5個(gè)配比液和標(biāo)準(zhǔn)藥劑對(duì)小麥赤霉病菌進(jìn)行毒力測(cè)定。結(jié)果表明,丙硫菌唑、肟菌酯及5個(gè)配比液(質(zhì)量比分別為 2∶1、1.5∶1、1∶1、1∶1.5 和 1∶2)的EC50分別為 0.55、0.72、1.01、0.86、1.08 mg/L (表1)。
根據(jù)孫云沛共毒系數(shù)計(jì)算辦法[3]對(duì)測(cè)試結(jié)果進(jìn)行分析,結(jié)果表明,丙硫菌唑與肟菌酯復(fù)配的共毒系數(shù)為147.93~215.68,丙硫菌唑與肟菌酯質(zhì)量比為2∶1和1∶1.5時(shí)的共毒系數(shù)為215.68和205.79,增效作用最為明顯(表2)。
室內(nèi)生測(cè)結(jié)果表明,丙硫菌唑與肟菌酯質(zhì)量比為2∶1、1.5∶1、1∶1、1∶1.5和1∶2混配時(shí)對(duì)小麥赤霉病菌都有增效作用,其中二者以2∶1和1∶1.5的比例混配的增效作用最為明顯,因此可以視2∶1和1∶1.5為丙硫菌唑與肟菌酯混配的最佳配比。
在實(shí)驗(yàn)室條件下,通過(guò)菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了丙硫菌唑和肟菌酯復(fù)配對(duì)小麥赤霉病菌的聯(lián)合毒力。丙硫菌唑和肟菌酯以質(zhì)量比為2∶1、1.5∶1、1∶1、1∶1.5和 1∶2復(fù)配的共毒系數(shù) CTC分別為215.68、179.55、147.93、205.79和186.85,綜合增效作用考慮,2∶1和1∶1.5為丙硫菌唑和肟菌酯混配的最佳配比。因此,丙硫菌唑與肟菌酯以適宜的比例進(jìn)行混配,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有推廣應(yīng)用價(jià)值。
表1 丙硫菌唑與肟菌酯混配對(duì)小麥赤霉病菌的毒力測(cè)定結(jié)果
表2 丙硫菌唑與肟菌酯混配對(duì)小麥赤霉病菌的聯(lián)合毒力
關(guān)于丙硫菌唑與肟菌酯復(fù)配劑對(duì)小麥赤霉病的田間試驗(yàn)結(jié)果如何,尚有待進(jìn)一步試驗(yàn)研究。