◆作者：孫廣文 王卓鐸 劉敏 張海濤

◆單位：廣東恒興飼料實業(yè)股份有限公司農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南水產(chǎn)與畜禽飼料重點試驗室

魚粉富含蛋白質(zhì)和高不飽和脂肪酸，氨基酸營養(yǎng)均衡，適口性好，營養(yǎng)價值高，是傳統(tǒng)魚蝦飼料的最佳蛋白源。人類對水產(chǎn)品需求不斷增加，使可利用自然漁業(yè)資源不斷下降；同時，人工養(yǎng)殖規(guī)模的擴大也導(dǎo)致魚粉需求的急劇增加，價格不斷上漲。這些因素均影響了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)和水產(chǎn)飼料工業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

大豆?jié)饪s蛋白是以大豆為原料，經(jīng)粉碎、去皮、浸提、分離等加工工藝，去除了大豆中的油脂、低分子可溶性非蛋白組分(主要是可溶性糖、灰分、醇溶蛋白和各種氣味物質(zhì)等)后所得到的大豆深加工產(chǎn)品。由于消除了寡聚糖類脹氣因子、胰蛋白酶抑制因子、凝集素和皂甙等抗?fàn)I因子，大豆?jié)饪s蛋白中的營養(yǎng)素消化率有一定程度的提高，且產(chǎn)品風(fēng)味和品質(zhì)得到了改善（王秀等，2011）。玉米蛋白粉是以玉米為原料,在制作過程中通過分離及脫脂后除去淀粉、胚芽、外皮產(chǎn)生的副產(chǎn)品；淀粉和纖維含量較低，不含抗?fàn)I養(yǎng)因子，蛋白質(zhì)含量達60%～70%。

大黃魚 (Pseudosciaena crocea)屬鱸形目(Perciformes)、石首魚科(Sciaenidae)、黃魚屬，主要分布在我國黃海南部、東海、臺灣海峽以及南海北部。因肉質(zhì)鮮美而深受人類喜愛。目前，有關(guān)大黃魚營養(yǎng)生理學(xué)的研究及人工配合飼料的開發(fā)已取得了部分進展，但大黃魚飼料中魚粉替代的研究報道相對較少，且所選魚粉替代蛋白源不同，其替代比例也差異較大。本研究以大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉替代大黃魚料中的部分魚粉，探討其對大黃魚生長性能、肝體比、臟體比以及體成分的影響，以期為大黃魚飼料原料的使用、大黃魚飼料配方高效合理的設(shè)計提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

試驗飼料配方如表1所示，其中魚粉和豆粕為主要蛋白源，高精面粉為主要糖源，磷脂和魚油為主要脂肪源，配制5組等氮等脂（蛋白水平41.5%，脂肪水平10%)的試驗飼料。試驗以大豆?jié)饪s蛋白分別替代5%和10%的魚粉，記為 SPC5、SPC10；以玉米蛋白粉分別替代5%和10%的魚粉，記為 CGM5、CGM10，以魚粉組為對照組，記為FM。飼料原料經(jīng)粉碎后過80目篩網(wǎng),維生素和礦物質(zhì)預(yù)混料采取逐級擴大法混勻,然后加入適量的水揉勻；經(jīng)雙螺桿擠條機加工成2種粒徑大小的顆粒狀飼料(1.5mm×3.0mm和2.5mm×5.0mm),比例1∶2。38℃干燥箱中烘 12h，自然冷卻后放入密封袋中，置于-20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖試驗在福建省寧德市三都港大灣網(wǎng)箱養(yǎng)殖區(qū)域進行。試驗大黃魚均為當(dāng)年人工孵化的同一批次幼魚。試驗開始前，在體積為3m×3m×5m的小網(wǎng)箱中暫養(yǎng)兩周，暫養(yǎng)期間投喂對照組飼料，以適應(yīng)飼料投喂、投喂頻率和養(yǎng)殖環(huán)境。試驗魚經(jīng)2周的馴化，禁食24小時；以丁香酚麻醉后，挑選出規(guī)格一致、體格健壯、初始體重為28.5±3.5g的大黃魚1500尾，隨機分為5組，每組3個重復(fù)，共15個網(wǎng)箱，每個網(wǎng)箱100尾，分別投喂5組試驗飼料。每天投喂2次（5：00和17：00），飽食投喂至不爭搶飼料為準。根據(jù)天氣及攝食情況調(diào)整投喂量，高溫季節(jié)應(yīng)減少投喂量。每天記錄魚的攝食、死亡及飼料投喂量的情況。試驗共進行10周，前4周投喂小粒徑飼料（1.5mm×3.0mm），后6周投喂大粒徑飼料（2.5mm×5.0mm）。試驗期間的水質(zhì)條件控制如下：水溫26.5℃～29.5℃,鹽度約為28.5‰，溶氧量為7mg/L。

1.3 采樣與分析

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，每組選取50尾測量試驗魚的最終體重、內(nèi)臟重、肝臟重。每組隨機抽取10尾魚，經(jīng)麻醉處死后冰凍保存，用于分析常見的化學(xué)指標。水分的測定為105℃恒溫烘干至恒重（GB/T 6435—014）。粗灰分的測定采用箱式電阻爐550℃灼燒法（GB/T 6438—007）。粗脂肪的測定采用索氏抽提法（GB/T 6433—006）。粗蛋白的測定用凱氏定氮法（GB/T 6432—994）。

表1 試驗飼料配方及營養(yǎng)水平（干基，%）

各生長參數(shù)按下列公式計算：

注：以上公式中N0為初始數(shù)量，Nt為終末數(shù)量，WT為末重，W0為初始體重，T為試驗時間，WL為肝臟重，WV為內(nèi)臟重，WF為飼料重，L為體長。

采用SPCSS18.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行單因素方差分析（ANOVA），差異顯著后進行Turkey多重比較，顯著性水平設(shè)為P＜0.05。實驗結(jié)果以“平均值±標準差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉替代魚粉對大黃魚生長性能的影響

從表2可知，相比于FM組，SPC 5組、CGM 5組的大黃魚末體重、特定生長率以及存活率均沒有表現(xiàn)出顯著性差異(P＞0.05）。而SPC 10組和CGM 10組的存活率、末體重和特定生長率均顯著低于FM組(P＜0.05）。飼料系數(shù)上，除SPC5組外，隨著植物蛋白成分的增加，飼料系數(shù)也在增大，且顯著高于對照組(P＜0.05）。從表2可以看出，SPC處理組的肝體比和FM組無明顯差異(P＞0.05），而 CGM 處理組顯著性高于FM組(P＜0.05）。在臟體比方面各組之間無顯著性差異(P＞0.05），其數(shù)值為 4.97～5.72。各組間肥滿度無顯著性差異(P＞0.05）。

2.2 大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉替代魚粉對大黃魚體成分的影響

從表3可以看出，大黃魚的全魚水分含量在73.86%～74.91%，粗蛋白含量在15.38%～16.48%，粗脂肪在5.06%～5.71%，灰分含量4.02%～4.18%。相比FM處理組，SPC 5和SPC 10處理組的全魚粗蛋白含量無顯著性差異（P＞0.05），而 CGM 兩個處理組的粗蛋白含量顯著低于FM處理組(P＜0.05）。各組間脂肪含量、灰分無顯著性差異（P＞0.05）。四個處理組的水分含量高于FM對照組，但不存在顯著性差異（P＞0.05）。

3 討論

當(dāng)前，開發(fā)新型蛋白原料替代魚粉是保持水產(chǎn)養(yǎng)殖可持續(xù)增長的重要熱點。關(guān)于使用大豆?jié)饪s蛋白SPC、玉米蛋白粉CGM等植物蛋白源分別替代魚粉對魚的生長性能和體組成影響的研究已廣泛開展。

表2 大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉替代魚粉對大黃魚生長性能的影響

表3 大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉替代魚粉對大黃魚體組分的影響(%)

3.1 大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉對大黃魚生長性能的影響

多項研究表明，在不同品種的魚類中，SPC可部分替代魚粉而對魚的生長未產(chǎn)生顯著影響。SPC替代凡納濱對蝦飼料中25%（陳佳楠，2017）、黃顙魚飼料中 20%（李晨晨等，2018）、瓦氏黃顙魚幼魚飼料中60%（楊英豪，2011）、大黃魚幼魚飼料中75%（馮建等，2017）、軍曹魚飼料中 75%（Solze G 等，2010）、中華鱘幼魚飼料中15%（劉偉等，2010）的魚粉均未對這些魚蝦類的生長造成負面影響。本實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SPC替代大黃魚料中5%的魚粉對其生長性能無顯著影響，這與上述研究結(jié)果相似。

亦有部分研究發(fā)現(xiàn)，SPC部分替代水產(chǎn)料中的魚粉，顯著改善或抑制了水產(chǎn)動物的生長性能。唐濤等（2019）的研究表明，以SPC替代對照組飼料（魚粉含量55%）中48%的魚粉，顯著提高了黃鱔的增重率、特定生長率和蛋白質(zhì)效率(P＜0.05)，并且顯著降低了飼料系數(shù)(P＜0.05）。SPC對魚粉的替代水平超過60%會抑制瓦氏黃顙魚幼魚的生長（楊英豪，2011）。鄒文超（2014）綜合凡納濱對蝦的生長性能、血液免疫等指標分析，SPC對凡納濱對蝦飼料中魚粉的替代比例不宜超過50%。中華鱘幼魚飼料中SPC替代水平超過15%時，其生長性能降低（劉偉等，2010）。海鱸料中隨著SPC替代魚粉比例上升，增重率逐漸降低，替代比例超過40%后，實驗組顯著低于對照組（P＜0.05）；飼替代比例超過60%，飼料系數(shù)顯著增加（P＜0.05）；替代比例高于40%蛋白質(zhì)效率顯著下降（P＜0.05）（向芳琴，2017）。劉興旺等（2014）發(fā)現(xiàn)，大菱鲆的生長及飼料轉(zhuǎn)化率隨SPC替代量的提高直線下降，即使在最低替代水平12.5%時，大菱鲆生長性能仍顯著低于對照組。而本研究也發(fā)現(xiàn)，SPC對大黃魚料中的魚粉替代水平為10%時，其存活率、末體重和特定生長率均顯著低于對照組，飼料系數(shù)顯著高于對照組。這與馮建等（2017）的研究結(jié)果差異較大：SPC替代魚粉水平為0%～100%均未對大黃魚幼魚的增重率 (WGR)、特定生長率(SGR)、存活率(SR)以及飼料系數(shù)(FCR)產(chǎn)生顯著影響(P＞0.05)。其可能原因是，馮建等的飼料配方中補充了賴氨酸、蛋氨酸等晶體氨基酸，改善了飼料氨基酸結(jié)構(gòu)；另一方面該飼料配方中添加了誘食劑，從而使得魚粉替代水平提高。此外，該配方中加入了?；撬幔嚓P(guān)研究表明，牛磺酸的添加可提高低魚粉飼料中SPC的利用率（吳玉波，2014）。

3.2 大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉對大黃魚體組成的影響

一般來說，魚體的蛋白質(zhì)組分含量相對穩(wěn)定，而脂肪和水分呈相反關(guān)系（Belal I等，1995）。本試驗中，隨著SPC替代魚粉比例的增加，大黃魚的體組成中的脂肪含量降低，水分含量增加，而蛋白含量無顯著差異。此結(jié)果與中華鱘（劉偉等，2010）、巨型石斑魚、大菱鲆（劉興旺等，2014）、大西洋鮭（Storebakken T等，1998）等的研究結(jié)果類似。研究認為這是由于大豆?jié)饪s蛋白中的非淀粉多糖會導(dǎo)致腸炎的發(fā)生，從而使脂肪的吸收下降，影響了脂肪在動物體內(nèi)的累積。

3.3 玉米蛋白粉替代魚粉對大黃魚生長性能的影響

部分研究認為，CGM可高水平替代水產(chǎn)料中的魚粉而不影響其生長性能，如鱸魚料中CGM替代水平可達60%（門珂珂，2014）、異育銀鯽飼料中適宜替代量為33.33%～66.67%（華雪銘等，2012）、大黃魚幼魚料中的適宜添加量為45%（何嬌嬌等，2017）。而本研究中，CGM對魚粉的替代量處于較低水平即顯著降低了大黃魚的生長性能，這可能是由于大黃魚對玉米蛋白粉的消化率較低，導(dǎo)致其對必須氨基酸和能量攝入不足所引起。這與卵形鯧鲹（胡海濱等，2019）、大菱鲆（劉興旺等，2012）、凡納濱對蝦（姚春鳳等，2014）、黃顙魚（朱磊等，2014）、軍曹魚幼魚（周暉等，2013）的研究結(jié)果相似。

3.4 玉米蛋白粉替代魚粉對大黃魚體組成的影響

本研究中，CGM處理組的體蛋白低于其他處理組，而各組間水分、脂肪、灰分無明顯差異，該結(jié)果與大菱鲆（劉興旺等，2012）的研究結(jié)果類似。其原因可能在于CGM的添加影響了魚類的攝食率，降低了氨基酸的利用率，不利于魚體蛋白的合成（Zhang L等，2008；張帆等，2012）。

研究表明，飼料中的主要營養(yǎng)素，如碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)等會影響魚類形態(tài)學(xué)方面的指標，如肥滿度、臟體比和肝體比等（Kim J D 等，2001）。隨著玉米蛋白粉用量的增加，肥滿度出現(xiàn)降低的趨勢；6%玉米蛋白粉組的黃顙魚的臟體比、肝體比均小于對照組（朱磊等，2014）。本試驗中，大菱鲆的肥滿度和臟體比未受到飼料中SPC和CGM替代魚粉的影響。但是肝體比隨著植物蛋白的增加而略有增加，這可能是由于植物蛋白對能量代謝的影響所導(dǎo)致。