劉起勝 徐妮為 鄒艷 黃旭 徐筱紅

【摘要】 目的：探討Piwil2在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義。方法：收集本校附屬醫(yī)院病理科確診為三陰性乳腺癌的40例患者作為觀察組，另選40例非乳腺癌患者作為對(duì)照組，對(duì)所有患者的Piwil2表達(dá)情況進(jìn)行比較，并對(duì)Piwil2在不同病理分期三陰性乳腺癌中的表達(dá)進(jìn)行觀察。結(jié)果：Piwil2在三陰性乳腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為82.50%，對(duì)照組為7.50%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），TNM分期越高，患者Piwil2陽(yáng)性表達(dá)率越高;Pearson相關(guān)性分析顯示，Piwil2與三陰性乳腺癌TNM分期呈正相關(guān)（r=0.756，P<0.05）。結(jié)論：Piwil2與三陰性乳腺癌的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖呈正相關(guān)，可為有效分子靶向治療乳腺癌提供參考依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】

三陰性乳腺癌;Piwil2;陽(yáng)性表達(dá)

三陰性乳腺癌是乳腺癌中的常見(jiàn)類型，主要指孕激素受體、雌激素受體及人表皮生長(zhǎng)因子受體均為陰性的乳腺癌，該病具有侵襲性強(qiáng)、惡性程度高等特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅患者身心健康，目前是乳腺癌研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)課題[1]。三陰性乳腺癌的治療多樣化，靶向治療是目前的主要方向，隨著研究的深入，越來(lái)越多的基因、蛋白質(zhì)被人們認(rèn)識(shí)，Piwil2便是其中之一。本研究分析Piwil2在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義，以為靶向治療提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

收集本校附屬醫(yī)院病理科確診為三陰性乳腺癌的40例患者作為研究對(duì)象，分為觀察組，另選40例非乳腺癌患者為對(duì)照組。觀察組年齡26～67歲，平均年齡（42.37±6.42）歲;TNM分期為Ⅰ期11例，Ⅱ期21例，Ⅲ期8例。對(duì)照組年齡25～69歲，平均年齡（43.05±6.18）歲。本研究經(jīng)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均接受根治性手術(shù)，術(shù)前未接受放化療，無(wú)其他遺傳性疾病、惡性腫瘤，未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。

1.2方法

儀器用具包括：石蠟切片機(jī)、BX51顯微鏡、顯微攝像系統(tǒng)、自動(dòng)脫水機(jī)、自動(dòng)包埋機(jī)、移液器、濕盒等。試劑包括：Piwil2免疫組化試劑盒、酸性蘇木素染色劑、AEC顯色試劑盒等。以免疫組化法進(jìn)行，采用SP三步法：1）切片脫蠟至水;2）抗原修復(fù);3）0.3%H2O2處理切片10～20min;4）PBS洗3次，1min/次;5）加入血清孵育20min;6）摔干血清，加入一抗60min;7）PBS洗3次，2min/次;8）加入二抗孵育15min;9）PBS洗3次，2min/次;10）加入三抗，孵育15min;11）PBS洗3次，2min/次;12）AEC孵育切片5～10min;13）PBS洗，水洗;14）蘇木素染核5～10min;15）水洗，返藍(lán)并封固。

1.3結(jié)果判斷

在光鏡下形態(tài)學(xué)觀察，每張切片隨機(jī)選5個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，根據(jù)染色強(qiáng)度計(jì)分為0～3分，分別對(duì)應(yīng)無(wú)色、淡黃色、棕黃色及棕褐色，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞所占半分比計(jì)分0～4分，分別對(duì)應(yīng)<5%、5%～24%、25%～49%、50%～74%、≥75%。陰性（-）為0～1分;弱陽(yáng)性（+）為2～3分;陽(yáng)性（++）為4～5分;強(qiáng)陽(yáng)性為（+++）。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，采用χ2檢驗(yàn)及Pearson相關(guān)性分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1Piwil2在三陰性乳腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)情況

Piwil2在三陰性乳腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為82.50%（33/40），對(duì)照組為7.50%（3/40），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=45.454，P<0.05），TNM分期越高，患者Piwil2陽(yáng)性表達(dá)率越高。見(jiàn)表1。

2.2Pearson相關(guān)性分析結(jié)果

Pearson相關(guān)性分析顯示，Piwil2與三陰性乳腺癌病理分期呈正相關(guān)（r=0.756，P<0.05）。

3討論

三陰性乳腺癌通常發(fā)生于50歲以下的年輕女性，常伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，致死率高，該乳腺癌類型不表達(dá)激素受體和Her2，無(wú)法實(shí)施內(nèi)分泌治療或抗Her2治療，化療是主要治療選擇，不過(guò)三陰性乳腺癌細(xì)胞對(duì)化療藥物具有普遍耐藥性，因此傳統(tǒng)化療方案整體療效較差，針對(duì)化療耐藥的三陰性乳腺癌患者，分子靶向治療受到廣泛關(guān)注[2]。

分子靶向治療是以腫瘤細(xì)胞過(guò)度表達(dá)的某些基因和蛋白分子為基礎(chǔ)，目前在三陰性乳腺癌中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一些基因和蛋白分子存在陽(yáng)性表達(dá)的情況，有研究顯示，P53在三陰性乳腺癌中陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于非三陰性乳腺癌，miR93表達(dá)水平也明顯比非三陰性乳腺癌高，P53、miR93陽(yáng)性者通常比陰性者更容易發(fā)生轉(zhuǎn)移等情況，預(yù)后效果明顯降低[34]。近年來(lái)Piwil2也開(kāi)始受到臨床關(guān)注，其屬于Argonaute家族的PIWI亞家族，位于染色體8p21.3，約有23個(gè)外顯子編碼，973個(gè)氨基酸。有研究發(fā)現(xiàn)，Piwil2表達(dá)增加可使stat3和Bcl基因表達(dá)上調(diào)，對(duì)P53蛋白表達(dá)進(jìn)行抑制，而且可和NFKB共同表達(dá)在細(xì)胞核中，促進(jìn)腫瘤惡性增殖，而對(duì)Piwil2表達(dá)進(jìn)行抑制有助于恢復(fù)P53水平，減少腫瘤細(xì)胞G2/M期細(xì)胞，從而對(duì)腫瘤增殖進(jìn)行有效抑制[5]。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)Piwil2在DNA修復(fù)中有重要促進(jìn)作用，通過(guò)參與DNA修復(fù)發(fā)揮抑癌基因作用[6]。

目前關(guān)于Piwil2在許多惡性腫瘤中陽(yáng)性表達(dá)情況的研究報(bào)道已有不少，但其在三陰性乳腺癌中陽(yáng)性表達(dá)情況尚不明確。本研究通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)，Piwil2在三陰性乳腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為82.50%，明顯高于非乳腺癌患者，且三陰性乳腺癌病理分期越高，其陽(yáng)性表達(dá)率也越高。Pearson相關(guān)性分析顯示，Piwil2與三陰性乳腺癌病理分期呈正相關(guān)。由此可見(jiàn)，Piwil2表達(dá)水平對(duì)評(píng)價(jià)三陰性乳腺癌惡性程度可能存在參考價(jià)值，其可能成為分子水平治療三陰性乳腺癌的靶點(diǎn)。

綜合上述，Piwil2與三陰性乳腺癌的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖呈正相關(guān)，可為有效分子靶向治療乳腺癌提供參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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