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一例副豬嗜血桿菌病的臨床診斷與防治

2019-12-04 08:30:46張立憲白紅杰郎利敏朱文豪王克領(lǐng)河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所河南鄭州450002河南省畜禽繁育與營養(yǎng)調(diào)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室河南鄭州450002
養(yǎng)豬 2019年6期
關(guān)鍵詞:嗜血圈舍頭孢

張立憲,白紅杰,郎利敏,游 一,朱文豪,王克領(lǐng)(.河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,河南 鄭州 450002;2.河南省畜禽繁育與營養(yǎng)調(diào)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,河南 鄭州 450002)

副豬嗜血桿菌病是由副豬嗜血桿菌引起的一種常見傳染病,又稱革拉塞氏?。℅lasser's disease),以多發(fā)性漿膜炎和關(guān)節(jié)炎性腫為特征病變,發(fā)病率15%~90%,主要危害2~28 周齡仔豬和生長豬,特別是5~8 周齡保育豬,可引發(fā)較為嚴(yán)重的身體多部位疾病[1],已成為當(dāng)前對(duì)我國豬場(chǎng)斷奶仔豬和保育豬危害最大的細(xì)菌性疫病之一。副豬嗜血桿菌具有條件致病性,該病一般入冬至早春季節(jié)為高發(fā)期,而養(yǎng)殖場(chǎng)條件差更易發(fā)病,如飼養(yǎng)密度過大、圈舍潮濕、舍內(nèi)明火采暖、封閉嚴(yán)實(shí)空氣不流通等。副豬嗜血桿菌病傳播較快,病程較長,而且與圓環(huán)病毒病、藍(lán)耳病等常?;彀l(fā),發(fā)病后治療不當(dāng)效果普遍較差,且愈后恢復(fù)緩慢[2],給養(yǎng)豬企業(yè)往往造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

1 發(fā)病及病變情況

2019 年1 月下旬,新鄉(xiāng)市原陽縣某豬場(chǎng)5~7 周齡保育豬群突然發(fā)病,發(fā)病率約20%,病豬發(fā)燒40 ℃左右,采食量下降,陣發(fā)性咳嗽,有的跗關(guān)節(jié)腫大,跛行,被毛粗亂無光澤,后期腹式呼吸明顯,日漸消瘦,個(gè)別豬還出現(xiàn)歪頭轉(zhuǎn)圈和倒地亂劃等神經(jīng)癥狀,后期部分病豬出現(xiàn)耳朵、四肢末端或腹下紅紫。剖檢病變:淋巴結(jié)均腫大明顯,切面多汁,上有少量灰白色壞死點(diǎn),胸腹腔蓄積大量淡黃色米湯樣液體,胸肺粘連,心包和肺表面有多量纖維素化膿性干酪樣滲出物,有的腹腔粘連,表現(xiàn)明顯的腹膜炎癥狀,跗關(guān)節(jié)處有黏性清亮或混濁積液。

根據(jù)流行病學(xué)、剖檢癥狀和變化,可臨床診斷為副豬嗜血桿菌病。

2 實(shí)驗(yàn)室診斷與藥敏試驗(yàn)

2.1 實(shí)驗(yàn)室診斷

2.1.1 細(xì)菌培養(yǎng) 無菌采取病豬肺臟、關(guān)節(jié)液、心血接種于營養(yǎng)肉湯、含NAD 的血瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、巧克力瓊脂培養(yǎng)基、普通瓊脂和含5%乳牛血清的TSA 培養(yǎng)基,于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱厭氧培養(yǎng)24~48 h,觀察其生長形態(tài)及特征。培養(yǎng)結(jié)果見表1。

表1 細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果

挑取培養(yǎng)后的單菌落抹片,革蘭氏染色后在油鏡下觀察,可見單個(gè)、成對(duì)或短鏈狀的革蘭氏陰性細(xì)小桿菌(圖1)。細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果符合副豬嗜血桿菌特征,初步診斷為副豬嗜血桿菌病。

2.1.2 生化試驗(yàn) 將純化后的菌落接種于生化鑒定管,管中同時(shí)加入5 mL 0.01%的NAD,置于37 ℃5%的CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)48 h。結(jié)果見表2。

圖1 革蘭氏染色鏡檢細(xì)菌形態(tài)

表2 生化試驗(yàn)結(jié)果

上述生化試驗(yàn)符合副豬嗜血桿菌的生化特征,基本確定病豬患有副豬嗜血桿菌病。

2.1.3 PCR 鑒定試驗(yàn)結(jié)果 參照劉建奎等(2012)的文獻(xiàn)介紹對(duì)分離到的5 株菌株進(jìn)行PCR 擴(kuò)增,觀察產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果,顯示在821 bp 處出現(xiàn)特異性條帶(圖2),與預(yù)期片段大小相符,表明所分離到的菌株為副豬嗜血桿菌。

圖2 分離菌株的PCR 鑒定

2.1.4 小鼠致病性試驗(yàn) 將菌株接種于添加NAD的TSB,37 ℃培養(yǎng)48 h,無菌生理鹽水5 倍稀釋培養(yǎng)菌后,給一組小鼠皮下接種0.5 mL,對(duì)照組小鼠皮下接種0.5 mL 無菌生理鹽水。接種細(xì)菌組小鼠48 h 內(nèi)死亡,剖檢肺部有出血,肝臟明顯腫大,對(duì)照組正常。從死亡小鼠的肺和脾上分離得到和以上一致的細(xì)菌,證明該菌具有致病性。

2.2 藥敏試驗(yàn)

將分離菌株接種于添加NAD 的TSA 培養(yǎng)基,涂沫均勻,選取藥敏片貼于培養(yǎng)基上,于37 ℃5%的CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h,測(cè)量抑菌環(huán)直徑并判定。判定結(jié)果見表3。

從表3 可以看出:分離菌株對(duì)洛美沙星、恩諾沙星、頭孢拉定、頭孢噻肟、頭孢噻呋等敏感,對(duì)氨芐西林、丁胺卡那、克林霉素、阿莫西林等中介,對(duì)慶大霉素、鏈霉素、青霉素G、金霉素、磺胺間甲氧嘧啶等耐藥。

表3 副豬嗜血桿菌分離菌株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

3 治療措施

3.1 提高保育圈舍溫度至20 ℃以上。天氣晴好時(shí)中午11:00 至下午14:00 南向窗戶打開通風(fēng),以防空氣污濁。清掃圈舍糞便并減少?zèng)_洗圈舍次數(shù),每周帶豬噴霧消毒2~3 次,避免死角。保持圈舍干爽。杜絕霉變玉米和飼料。將可疑豬和發(fā)病豬全部換至病豬舍隔離飼養(yǎng)。將豬分圈,減少飼養(yǎng)密度。把病重豬和污染物及時(shí)清理,將其深埋或焚燒掉。

3.2 發(fā)病豬肌注洛美沙星和頭孢噻呋,1 d 1 次,連用3~5 d,按說明書用量使用;大群拌料加藥:恩諾健1 000 g+10%頭孢拉定500 g+柴胡甘草顆粒1 000 g+全價(jià)飼料1 t,連用7~10 d;同時(shí)在飲水添加優(yōu)質(zhì)多維1 000 g+葡萄糖20 kg+水1 t,連飲5~7 d。

經(jīng)過上述措施處理30 d 后,除少部分病重豬死亡外,大部分癥狀較輕病豬逐漸好轉(zhuǎn),疫情基本得到了控制。

4 小結(jié)

造成副豬嗜血桿菌病在該場(chǎng)流行的原因可能有4 點(diǎn):一是冬季圈舍溫度偏低,門窗封閉較為嚴(yán)實(shí),再加上糞尿清理不及時(shí),明顯感覺空氣污濁、氣味嗆人;二是飼養(yǎng)密度較大,因前期仔豬上保育較為集中,導(dǎo)致圈舍緊張,豬群擁擠打架增多;三是加藥預(yù)防沒有做好,仔豬由產(chǎn)房轉(zhuǎn)到保育舍應(yīng)激較大,飲水中沒有及時(shí)添加電解質(zhì)多維和葡萄糖等;四是沒有按規(guī)定及時(shí)消毒,造成病原微生物無限繁殖。

副豬嗜血桿菌主要侵害的是關(guān)節(jié)、漿膜和腦膜等器官,相對(duì)其他組織這些器官的毛細(xì)血管分布較少;而肺部作為重要的發(fā)病器官卻與血液之間又存在血肺屏障,因而一般藥物很難到達(dá)該菌分布最多的部位,通過藥敏試驗(yàn)選用的藥物不一定有效,必須結(jié)合臨床選用穿透性強(qiáng),組織分布濃度高,能夠深入副豬嗜血桿菌附著部位的藥物,才能發(fā)揮應(yīng)有的效果[4]。

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