黃章科 李麗卡

（1廣東省江門市新會(huì)會(huì)城華僑中學(xué) 廣東江門 5291002廣東省江門市新會(huì)第一中學(xué) 廣東江門 529100）

1 研究背景

飲水機(jī)以其方便、快捷的特點(diǎn)，成為學(xué)校、企業(yè)辦公場(chǎng)所的主要飲水類型。近年來(lái)，衛(wèi)生管理部門加強(qiáng)了對(duì)桶裝水生產(chǎn)企業(yè)的預(yù)防性衛(wèi)生監(jiān)督，確保為消費(fèi)者提供合格的桶裝水。然而，有證據(jù)顯示，目前許多學(xué)校內(nèi)飲水機(jī)中存放的水，以及飲水機(jī)內(nèi)膽不同程度地受到微生物污染，對(duì)教職員工和學(xué)生的健康構(gòu)成了潛在威脅［1］。徐述堅(jiān)總結(jié)了國(guó)內(nèi)桶裝水的衛(wèi)生狀況，指出了普遍存在的問題：微生物指標(biāo)不合格，導(dǎo)電率和亞硝酸鹽超標(biāo)，二次污染嚴(yán)重等［2］，根據(jù)GB 17324-2003《瓶（桶）裝飲用純凈水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》的說(shuō)明，飲水中微生物污染指標(biāo)包括飲用水中總細(xì)菌數(shù)、大腸桿菌數(shù)、霉菌數(shù)等，理化指標(biāo)包括pH 值、電導(dǎo)率等，這些指標(biāo)中只要有一項(xiàng)不達(dá)標(biāo)，即判斷為不合格［3］。在這種背景下，調(diào)查了某中學(xué)部分飲水機(jī)的使用情況，并對(duì)水質(zhì)的指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，以確認(rèn)飲水機(jī)中存放的水、飲水機(jī)內(nèi)膽是否受到微生物污染，以及廣大教職工和學(xué)生的飲水質(zhì)量是否得到保障，最后結(jié)合研究結(jié)果對(duì)中小學(xué)安全飲水提出相應(yīng)的措施。

2 實(shí)驗(yàn)儀器和材料

高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、移液槍及槍頭、無(wú)菌操作臺(tái)、放大鏡、掃描儀、75%乙醇、天平、250mL 錐形瓶、培養(yǎng)皿、量筒、涂布棒、平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基。

3 研究方法

3.1 水樣采集 隨機(jī)抽取某學(xué)校正在使用的20臺(tái)飲水機(jī)，采集流經(jīng)飲水機(jī)的桶裝水樣本時(shí)，為避免出水口污染，先用75%乙醇對(duì)冷、熱出水口及采樣人員手部進(jìn)行消毒，再將冷熱水閥打開，各流出50mL 水后，從冷水口取冷水，熱水口取沸水，采用無(wú)菌操作方式讓水自然流到無(wú)菌錐形瓶中，每次采樣100mL 備檢測(cè)，并做好標(biāo)記。

3.2 指標(biāo)檢測(cè) 參照GB 17324-2003《瓶(桶)裝飲用純凈水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》：菌落總數(shù)≤20CFU／mL，只要有此項(xiàng)指標(biāo)不合格即判定為不合格。多管發(fā)酵法和濾膜法是美國(guó)環(huán)境保護(hù)署認(rèn)可的幾種檢測(cè)大腸桿菌的方法，也是我國(guó)國(guó)標(biāo)中規(guī)定的檢測(cè)方法［3］。多管發(fā)酵法成本低，簡(jiǎn)單易操作，但準(zhǔn)確性低，只提供大腸桿菌的半定量計(jì)數(shù)，耗時(shí)長(zhǎng)，要48h，如需確認(rèn)，另外還需要48h。濾膜法簡(jiǎn)單易操作，但因?yàn)闉V膜法缺乏足夠的特異性，仍需要另外24h來(lái)確認(rèn)。而為了能在中小學(xué)中快速簡(jiǎn)便地檢測(cè)飲水質(zhì)量，本研究只檢測(cè)飲水中的菌落總數(shù)。

3.2.1 總細(xì)菌數(shù) 參照GB 4789.2-2010《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)：菌落總數(shù)測(cè)定》的方法，用移液槍吸取適量水樣，做不同梯度的水樣稀釋，后各加到平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基中，涂布棒涂抹均勻，在培養(yǎng)皿側(cè)面標(biāo)注清楚后，置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)1天，統(tǒng)計(jì)各平板的菌落總數(shù)。

3.2.2 不同的擺放位置對(duì)總菌數(shù)的影響 選取同一地點(diǎn)同一水位的飲水機(jī)桶裝水，分別對(duì)不同擺放位置進(jìn)行總菌數(shù)的檢測(cè)，總菌數(shù)測(cè)定方法同3.2.1，檢測(cè)不同的擺放位置對(duì)總菌數(shù)的影響。

3.2.3 不同的水位對(duì)總菌數(shù)的影響 選取同一地點(diǎn)同一位置的飲水機(jī)桶裝水，分別對(duì)不同的水位進(jìn)行總菌數(shù)的檢測(cè)，總菌數(shù)測(cè)定方法同3.2.1，檢測(cè)不同的水位對(duì)總菌數(shù)的影響。

3.2.4 存放天數(shù)對(duì)總菌數(shù)的影響 選取同一地點(diǎn)同一水位的飲水機(jī)桶裝水，分別在不同的存放時(shí)間進(jìn)行總菌數(shù)的檢測(cè)，總菌數(shù)測(cè)定方法同3.2.1，檢測(cè)不同的存放時(shí)間對(duì)總菌數(shù)的影響。

3.2.5 飲水機(jī)內(nèi)膽對(duì)總菌數(shù)的影響 選取10桶來(lái)源相同、水位相同的桶裝水，擺放在同一地點(diǎn)，一半桶裝在飲水機(jī)上采樣，另一半桶直接采樣，總菌數(shù)測(cè)定方法同3.2.1，檢測(cè)飲水機(jī)內(nèi)膽對(duì)總菌數(shù)的影響。

4 結(jié)果與分析

4.1 熱水（94℃）和冷水中的總細(xì)菌數(shù) 由表1、表2可看出，總菌數(shù)在熱水（94℃）和冷水中有明顯的差異，在所檢測(cè)的20個(gè)水樣中，冷水中總菌數(shù)合格率為0%，熱水（94℃）的合格率為100%。說(shuō)明冷水中細(xì)菌數(shù)超標(biāo)，熱水（94℃）中細(xì)菌因不耐熱全部死亡，飲水安全。

表1 200μL 水樣中的菌落數(shù)

表2 水樣中總菌數(shù)的合格率

4.2 不同的擺放位置對(duì)總菌數(shù)的影響 選擇水位大致相同的15臺(tái)飲水機(jī)進(jìn)行取樣調(diào)查，由下圖可看出，不同的擺放位置對(duì)飲水機(jī)中冷水總菌數(shù)有影響，其中，靠窗有陽(yáng)光照射的地方總菌數(shù)最少，室內(nèi)中間的次之，門口角落的總菌數(shù)最多，提示將飲水機(jī)放在光亮的地方飲水中細(xì)菌不易滋生，而放在陰暗角落則會(huì)容易滋生細(xì)菌。無(wú)論擺放位置如何，菌落總數(shù)都大于20CFU／mL，即都不合格。

圖1 不同擺放位置200μL 冷水中的總菌數(shù)

4.3 不同的水位對(duì)總菌數(shù)的影響 選擇擺放位置基本一樣的15臺(tái)飲水機(jī)進(jìn)行取樣調(diào)查，由表1、表2可知，不同的水位對(duì)飲水機(jī)中冷水總菌數(shù)有影響，其中，水位為100%時(shí)總菌數(shù)最少，50%時(shí)次之，只剩1%時(shí)總菌數(shù)最多，表明隨著飲水天數(shù)的增加，水位越低總菌數(shù)也越多。但是，無(wú)論水位如何，菌落總數(shù)都明顯大于20CFU／mL，即都不合格。

4.4 存放時(shí)間（天數(shù)）對(duì)總菌數(shù)的影響 由表1可知，隨著存放天數(shù)的增加，飲水機(jī)中的冷水總菌數(shù)也逐漸增加。

4.5 飲水機(jī)內(nèi)膽對(duì)總菌數(shù)的影響 由表1可知，無(wú)飲水機(jī)內(nèi)膽的水樣中總菌數(shù)明顯少于有飲水機(jī)內(nèi)膽的水樣，提示水樣中的細(xì)菌主要來(lái)源于飲水機(jī)內(nèi)膽。

5 討論和對(duì)策

本研究以桶裝飲用水的飲水安全為研究背景，對(duì)某中學(xué)飲水水樣進(jìn)行不同角度的探究，結(jié)果表明中學(xué)學(xué)生和教職工飲水存在安全隱患，表現(xiàn)為受不同程度的細(xì)菌污染。具體表現(xiàn)為：

1）飲水時(shí)將水煮沸能有效殺死細(xì)菌，飲水安全。

2）飲水機(jī)的擺放位置會(huì)對(duì)冷水中總菌數(shù)有影響，表現(xiàn)為靠窗有陽(yáng)光照射的地方總菌數(shù)最少，室內(nèi)中間的次之，門口角落的總菌數(shù)最多，建議將飲水機(jī)擺放在寬敞明亮的地方，飲水機(jī)中存放的水，及飲水機(jī)內(nèi)膽不易滋生細(xì)菌。

3）不同的水位會(huì)對(duì)冷水中總菌數(shù)有影響，水位越低細(xì)菌數(shù)越多，建議桶裝水應(yīng)盡快飲用。

4）隨著存放天數(shù)的逐漸增加，冷水中總菌數(shù)也在逐漸增加，建議桶裝水最好在1周內(nèi)飲用完。

5）飲水機(jī)內(nèi)膽對(duì)總菌數(shù)的結(jié)果提示，飲水中的細(xì)菌主要來(lái)自于飲水機(jī)內(nèi)膽，建議應(yīng)定期使用專用的消毒劑對(duì)內(nèi)膽進(jìn)行消毒，從源頭上杜絕細(xì)菌的滋生。