河南省平頂山市第一人民醫(yī)院(467000)房喜樂
乙型肝炎病毒(HBV)是一種雙鏈DNA病毒,會(huì)引起乙型肝炎病毒,但需注意的是除了引起肝炎外,還可能導(dǎo)致患者肝硬化或肝細(xì)胞癌疾病的發(fā)生[1]。本研究旨在探討乙肝血清標(biāo)志物聯(lián)合乙肝病毒DNA檢測在HBV感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值,現(xiàn)報(bào)告如下。
1.1 一般資料 選取2014年3月~2016年3月我院收治的乙肝患者132例,根據(jù)其HBV水平將其分為大三陽組、小三陽組和其他組三組,其中男76例,女56例,年齡14~71歲,平均(42.5±28.5)歲。對比患者一般資料不存在顯著差異,P>0.05,有可比性。
1.2 方法 所有患者均處于空腹?fàn)顟B(tài)時(shí)抽取其靜脈血3ml,靜止后離心分離出血清待測。采用羅氏酶標(biāo)儀和其配套試劑對其血清學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行定量檢測,檢測流程和判定標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格遵守操作指示和說明書進(jìn)行;采用ABI STEP ONE實(shí)時(shí)定量PCR儀及凱杰生物工程有限公司生產(chǎn)的乙肝病毒核酸擴(kuò)增定量檢測試劑盒進(jìn)行HBV-DNA定量檢測,具體方法為取200μl血清和200μl樣本前處理液,振蕩混勻,按照該核酸提取或純化試劑說明書操作步驟進(jìn)行核酸純化后,在PCR反應(yīng)管中分別加入30μl反應(yīng)液和酶的混合液,核酸純化標(biāo)本20μl,置于定量PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增。
1.3 觀察指標(biāo) 對患者血清學(xué)標(biāo)志物定量檢測結(jié)果和HBV-DNA定量檢測結(jié)果進(jìn)行判定,血清學(xué)標(biāo)志物定量檢測判定標(biāo)準(zhǔn)分為陽性:HBsAg≥0.2ng/ml、HBeAg≥0.5PEIU/ml;陰性:HBsAg<0.2ng/ml、HBeAg<0.5PEIU/ml。HBV-DNA定量檢測標(biāo)準(zhǔn):當(dāng)檢測結(jié)果<1×102IU/mL時(shí),表示被測樣品中HBVDNA的濃度低于定量線性范圍。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次研究所有患者臨床資料均采用SPSS19.0軟件進(jìn)行分析研究,計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn),以率(%)表示,計(jì)量資料采用t檢驗(yàn),以()表示。若P<0.05,則表示差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 HBV-DNA檢測結(jié)果 大三陽組26例患者中檢出陽性24例,陽性檢出率為92.31%,小三陽組59例患者中檢出陽性30例,陽性檢出率為50.85%,其他組47例患者中檢出陽性3例,陽性檢出率為6.38%??梢姶笕柦M陽性檢出率顯著高于其他兩組(x2=42.249,147.705,P<0.05)。
2.2 血清標(biāo)志物與HBV-DNA陽性率對比HBV-DNA呈陽性患者共計(jì)57例,HBsAg檢出率為94.74%(54/57);而HBeAg檢出率為45.61%(26/57)??梢奌BV-DNA陽性患者中多為HBsAg陽性者。同時(shí)HBsAg檢出符合率為72.73%,HBeAg檢出符合率為71.97%,可見HBsAg與HBeAg檢出符合率不存在顯著差異(x2=0.014,P>0.05)。
附表 不同HBV-DNA含量在不同血清學(xué)模式下的測定結(jié)果[n,(lg copies/ml)]
2.3 不同HBV-DNA含量在不同血清學(xué)模式下的測定結(jié)果 HBV-DNA在小于2.7lg copies/ml時(shí)小三陽和其他類患者較多,在HBV-DNA處于2.7~5.0lg copies/ml時(shí)小三陽患者占比較多,當(dāng)HBV-DNA大于7.0lg copies/ml時(shí)大三陽患者占比較多,詳見附表。
在本研究中,大三陽組陽性檢出率顯著高于另外兩組,同時(shí)可以發(fā)現(xiàn)HBVDNA呈陽性的患者中,其HBsAg攜帶率顯著高于HBeAg攜帶率,通過附表的數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)HBV-DNA與HBeAg呈明顯正相關(guān)關(guān)系,與劉佩,趙旭鴻等人的研究結(jié)果基本一致[2]??梢园l(fā)現(xiàn)乙肝血清學(xué)定量檢測可以反映出患者HBV感染情況,但需要注意的是在乙肝血清定量檢測中不少陰性患者檢測HBV-DNA呈陽性,可見HBV-DNA可以很好地彌補(bǔ)乙肝血清學(xué)定量檢測的不足。
綜上所述,可見乙肝血清標(biāo)志物聯(lián)合乙肝病毒DNA檢測在HBV感染診斷在應(yīng)用效果良好,具有推廣價(jià)值。