袁宗勝

摘要 在毛竹中心產(chǎn)區(qū)，通過(guò)竹腔注射的方式接種復(fù)合微生物菌液，研究?jī)?nèi)生細(xì)菌對(duì)毛竹的促生效果。結(jié)果表明，促生內(nèi)生細(xì)菌可以增加毛竹林立株數(shù)，提高毛竹冬筍營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，其中，施用復(fù)合微生物菌液的毛竹冬筍總糖含量與對(duì)照相比提高了25%，差異顯著。施用復(fù)合微生物菌液的毛竹林地出筍數(shù)量提高，發(fā)筍期提早和延長(zhǎng)，進(jìn)一步提高了毛竹林成竹率，新生毛竹眉徑與對(duì)照相比提高了3.85%。

關(guān)鍵詞 毛竹;內(nèi)生細(xì)菌;促生

中圖分類號(hào) S795.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2019）17-0120-03

Abstract In the main producing areas of Moso bamboo，the compound bacterial suspensions were injected into the bamboo cavity，and the effect of entophytic bacteria on the growthpromoting? bamboo was studied.The results showed that the entophytic bacteria could increase the number of bamboo shoots and improve the nutritional quality of winter bamboo shoots.Among them，the total sugar content of winter bamboo shoots which used the compound bacterial suspensions was increased by 25% compared with that of the control group，the difference was very significant.The number of bamboo shoots in bamboo forest which used the compound bacterial suspensions was increased，the time of bamboo shoots was earlier and prolonged，it also further improved the bamboo growth rate of bamboo forest，the eyebrow diameter of newborn bamboo was increased by 3.85% compared with that of the control.

Key words Moso bamboo;Entophytic bacteria;Growthpromoting

毛竹（Phyllostachys edulis）屬禾本科剛竹屬，為散生型竹種，其生長(zhǎng)快，適應(yīng)性強(qiáng)，用途廣，經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，是我國(guó)南方地區(qū)重要的森林資源。根據(jù)第6次森林資源清查統(tǒng)計(jì)，我國(guó)的毛竹林面積約為337.2萬(wàn)hm 2，約占世界毛竹林總面積的47%。毛竹筍高蛋白、低淀粉，含有多種氨基酸、礦物質(zhì)及維生素，素稱“寒土山珍”[1-2]。

植物內(nèi)生細(xì)菌生活史的一定階段或全部階段均生活在健康植物的各種組織和器官內(nèi)部，并且與植物建立了和諧聯(lián)合關(guān)系，因此內(nèi)生細(xì)菌不易受環(huán)境條件影響而在植物體內(nèi)長(zhǎng)期定殖、傳導(dǎo)，其對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育、抵抗疾病以及不良環(huán)境具有廣泛的生物學(xué)作用[3-9]。筆者利用從毛竹體內(nèi)分離并篩選出的具有高效解磷解鉀固氮功能的促生內(nèi)生細(xì)菌菌株CT-B09-2、JL-B06、WYS-A01-1[10]，通過(guò)竹腔注射接種的方式初步探討內(nèi)生細(xì)菌對(duì)毛竹促生的效果，以期為促生功能復(fù)合微生物菌劑的開發(fā)和利用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株、培養(yǎng)基與試驗(yàn)毛竹林地基地

1.1.1 供試菌株。菌株CT-B09-2、JL-B06、WYS-A01-1是由實(shí)驗(yàn)室從毛竹體內(nèi)分離并篩選出的具有高效解磷解鉀固氮功能的促生內(nèi)生細(xì)菌[10]。

1.1.2 培養(yǎng)基。

內(nèi)生菌培養(yǎng)采用NA培養(yǎng)基：牛肉膏3 g，蛋白胨10 g，NaCl 5 g，瓊脂18 g，水1 000 mL，pH7.0～7.2 （液體培養(yǎng)基則不加瓊脂）。

1.1.3 試驗(yàn)毛竹林地基地。

在福建省毛竹林中心產(chǎn)區(qū)[11]將樂(lè)縣龍棲山自然保護(hù)區(qū)毛竹林基地，選擇立地條件、毛竹林分等相對(duì)一致的成片毛竹林地，采取隨機(jī)區(qū)組法設(shè)置試驗(yàn)區(qū)組和對(duì)照區(qū)組。117°15′53.6″～117°16′0.4″E，26°31′32.2″～26°31′38.8″N，海拔為891 m。年平均氣溫為16 ℃，1月平均氣溫 6.2 ℃，7月平均氣溫 25.3 ℃，絕對(duì)最低氣溫-8.3 ℃，絕對(duì)最高氣溫 32.0 ℃，年平均降水雨量1 797 mm，雨季主要在春夏，秋冬降雨量較少。年平均相對(duì)濕度84%，年平均氣壓996.7 mPa，年日照時(shí)數(shù)1 701.5 h。無(wú)霜期長(zhǎng)297 d，霜期約68 d。

1.2 復(fù)合微生物菌液的制備及接種

1.2.1 復(fù)合微生物菌液的制備。

將篩選出的促生內(nèi)生細(xì)菌菌株CT-B09-2、JL-B06、WYS-A01-1分別接種于NA液體培養(yǎng)基中，28? ℃，180? r/min 條件下振蕩培養(yǎng) 72 h，用無(wú)菌水稀釋制成含1× 10 8 CFU/mL 的菌懸液，然后按照等比例混合，即制備好復(fù)合微生物菌液，待用。

1.2.2 竹腔注射法接種林間毛竹。在福建省將樂(lè)縣龍棲山自然保護(hù)區(qū)毛竹林基地試驗(yàn)林地，選取 Ⅱ 度毛竹，先用電鉆在距土表30 cm左右的竹稈部位鉆孔，然后取上述復(fù)合微生物菌液50? mL用無(wú)菌注射器注射至毛竹竹腔內(nèi)部，第2天重復(fù)接種50? mL，用泥土封住竹腔孔洞并做好標(biāo)記。每處理 100 株，3 次重復(fù)，以清水為對(duì)照。試驗(yàn)?zāi)攴莸?、10月各接種1次。分別于試驗(yàn)?zāi)攴荻S采收季節(jié)、第2年春筍采收季節(jié)及毛竹新竹長(zhǎng)成季節(jié)采樣或進(jìn)行林間調(diào)查。

1.3 試驗(yàn)毛竹林的保護(hù)與管理 試驗(yàn)毛竹林地設(shè)專人管理，遇有露根、露鞭，及時(shí)培土填蓋。出筍前后，禁止人畜進(jìn)入林地。試驗(yàn)?zāi)攴菝窳值貎?nèi)嚴(yán)禁放牧，不準(zhǔn)砍竹，不準(zhǔn)挖筍，讓筍和竹自然生長(zhǎng)。

1.4 毛竹冬筍樣品采集與處理

1.4.1 冬筍樣品的采集。

在冬筍發(fā)筍盛期（1月左右）選取大小均勻（200～300 g）、未出土、無(wú)破損、無(wú)病蟲為害、筍身結(jié)實(shí)、不空洞、無(wú)畸形、不干縮的毛竹冬筍，試驗(yàn)處理及對(duì)照區(qū)域各設(shè)3個(gè)采集區(qū)域，每個(gè)采集區(qū)域采集冬筍5～8個(gè)，并形成混合樣品。

1.4.2 冬筍樣品的處理。

采集的毛竹冬筍剝?nèi)スS籜、切除筍蔸等，然后將可食部分的筍切成小方塊，各處理冬筍樣品充分混合并選取鮮樣置于105 ℃烘箱殺青、60～70 ℃恒溫干燥，然后過(guò)0.5 mm篩粉碎處理后，保存于干燥器中，用于冬筍營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定。

1.4.3 冬筍營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定。

總糖的測(cè)定采用GB/T 5009.8 《食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測(cè)定》方法;粗纖維的測(cè)定采用GB/T 5009.10《植物類食品中粗纖維的測(cè)定》方法;脂肪的測(cè)定采用GB/T 5009.6《食品中脂肪的測(cè)定》方法;蛋白質(zhì)的測(cè)定采用GB 5009.5《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》方法;氨基酸的測(cè)定采用GB/T 5009.124《食品中氨基酸的測(cè)定》方法。

1.5 林間調(diào)查

1.5.1 筍期調(diào)查。

在毛竹發(fā)筍期（3—5月），即從試驗(yàn)地少量發(fā)筍開始至新竹全部展枝放葉結(jié)束，派專人對(duì)試驗(yàn)毛竹林地進(jìn)行筍期調(diào)查，調(diào)查發(fā)筍時(shí)間、出筍率、成竹率及新竹眉徑。

出筍率=出筍數(shù)/總立竹數(shù)×100%

成竹率=新竹數(shù)/總立竹數(shù)×100%

1.5.2 立竹調(diào)查。

對(duì)試驗(yàn)和對(duì)照毛竹林地內(nèi)毛竹進(jìn)行每竹調(diào)查，測(cè)定其立株數(shù)、年齡（度）、眉徑等指標(biāo)，統(tǒng)計(jì)出各毛竹林地內(nèi)單位面積立株數(shù)、平均眉徑等指標(biāo)[ 12-13]。

2 結(jié)果與分析

2.1 促生內(nèi)生細(xì)菌對(duì)毛竹冬筍營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響

2.1.1 總糖、粗纖維、脂肪及蛋白質(zhì)含量。

毛竹筍中的糖分是呈味物質(zhì)，即甘甜味;毛竹筍中蛋白質(zhì)含量是毛竹筍品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)，同時(shí)也是竹筍干物質(zhì)含量較高的組成部分;粗纖維可以衡量毛竹筍的脆嫩程度，一般情況下粗纖維含量高則質(zhì)地較為粗糙，含量低則質(zhì)地較為脆嫩[14-15];粗脂肪含量也是評(píng)價(jià)竹筍品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，竹筍的脂肪含量會(huì)隨著毛竹筍不斷生長(zhǎng)而呈逐步下降趨勢(shì)。

從表 1可以看出，與對(duì)照相比，施用復(fù)合微生物菌液的試驗(yàn)毛竹林地，冬筍的營(yíng)養(yǎng)成分中蛋白質(zhì)、 總糖、粗纖維等指標(biāo)均有不同程度的提高，其中總糖含量提高了25%，表明施用復(fù)合微生物菌液能夠明顯改善竹筍的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)和口味，提高其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。試驗(yàn)毛竹林地冬筍樣品粗纖維、蛋白質(zhì)含量略有提高，但差異不顯著。

2.1.2 氨基酸含量。

采用氨基酸自動(dòng)分析儀進(jìn)行毛竹冬筍氨基酸含量的測(cè)定，結(jié)果表明，毛竹冬筍含有17種氨基酸，種類較為齊全。其中，天冬氨酸含量最高，谷氨酸、脯氨酸次之，蛋氨酸、胱氨酸含量最低。

毛竹冬筍樣品中必需氨基酸的平均含量高低依次是賴氨酸、亮氨酸、纈氨酸、蘇氨酸、苯丙氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸。施用復(fù)合微生物菌液的試驗(yàn)毛竹林地冬筍樣品中氨基酸總含量為 28.4 g/kg，與對(duì)照相比提高4.80%;人體所必需的氨基酸與對(duì)照相比提高2.63%，差異不顯著（表2）。

2.2 促生內(nèi)生細(xì)菌對(duì)毛竹生長(zhǎng)的影響

以第1株筍破土為起始時(shí)間，定期記錄，至無(wú)筍出土為終止時(shí)間。統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)林地和對(duì)照林地出筍數(shù)、出筍率、成竹數(shù)、成竹率等。

從表3可以看出，施用復(fù)合微生物菌液的毛竹林地出筍數(shù)量提高，比對(duì)照增長(zhǎng)34.06%;出筍率比對(duì)照提高7.84百分點(diǎn)，發(fā)筍期提早和延長(zhǎng)，證明施用復(fù)合微生物菌液對(duì)毛竹促生效果明顯。施用復(fù)合微生物菌液的毛竹林成竹數(shù)高于對(duì)照20%，成竹率提高2.42百分點(diǎn)。施用復(fù)合微生物菌液對(duì)筍高增長(zhǎng)速度有一定控制作用，生長(zhǎng)速度較均勻。

施用復(fù)合微生物菌液后第2年10月，對(duì)試驗(yàn)和對(duì)照林地內(nèi)毛竹林資源進(jìn)行調(diào)查，包括單位面積立株數(shù)、各度毛竹數(shù)、平均眉徑等指標(biāo)。

從表4可以看出，施用復(fù)合微生物菌液的毛竹林總立株數(shù)高于對(duì)照5.58%，毛竹眉徑是構(gòu)成毛竹產(chǎn)量和質(zhì)量等級(jí)的重要指標(biāo)之一。由表3、4可知施用復(fù)合微生物菌液新竹眉徑增大，竹子增粗，對(duì)新竹生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，新竹眉徑由10.4 cm增至10.8 cm，提高3.85%，這對(duì)提高竹材質(zhì)量和增加竹林收入非常有利。

3 結(jié)論與討論

通過(guò)竹腔注射接種3種促生內(nèi)生細(xì)菌的復(fù)合微生物菌液對(duì)毛竹生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用。促生內(nèi)生細(xì)菌可以增加毛竹林立株數(shù)，增大新生毛竹眉徑，提高毛竹冬筍營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，特別是施用復(fù)合微生物菌液的毛竹冬筍總糖含量顯著高于對(duì)照;施用復(fù)合微生物菌液的毛竹林地出筍數(shù)量提高，提早和延長(zhǎng)了發(fā)筍期，進(jìn)一步提高了毛竹林成竹率，同時(shí)對(duì)筍高增長(zhǎng)速度有一定控制作用，生長(zhǎng)速度較均勻。

該研究?jī)H用3種促生內(nèi)生細(xì)菌的發(fā)酵液等比例混合制成復(fù)合微生物菌液，下一步應(yīng)繼續(xù)深度探討每種促生內(nèi)生細(xì)菌發(fā)酵條件、不同菌劑的復(fù)配比例等工藝條件，以達(dá)到最佳的促生效果;對(duì)微生物菌液的其他接種方式也應(yīng)進(jìn)一步探討。

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