于敏 岳丹霞 喬媛媛

摘要 研究了5種濃度辛硫磷處理液對泥鰍腦細胞谷丙轉氨酶（GPT）活性的影響。結果表明：低濃度的辛硫磷處理液對泥鰍腦細胞中的GPT活性起誘導作用，而高濃度則起抑制作用。建議以泥鰍腦組織GPT活性變化作為水環(huán)境監(jiān)測的生物指標，從而達到評價水生生態(tài)環(huán)境的目的。

關鍵詞 辛硫磷;泥鰍;谷丙轉氨酶;生物指標

中圖分類號 X503.225文獻標識碼 A

文章編號 0517-6611（2019）17-0089-02

Abstract Effects of 5 kinds of concentrations of phoxim on the activity of GPT for loach brain were studied.The results showed that the activities of GPT were induced by the lower concentration of phoxim，but restrained by the higher ones.It was suggested that the change of GPT activity in loach brain should be used as a biomarker for water environment monitoring，so as to achieve the purpose of evaluating aquatic ecological environment.

Key words Phoxim;Loach;GPT;Biomarker

辛硫磷（phoxim）是一種高效、低毒、低殘留的廣譜有機磷農藥[1]。辛硫磷抑制膽堿酯酶，使其在體內大量積蓄，使神經興奮失常，從而導致蟲體死亡[2]。閆建國等[3]采用微核試驗和單細胞凝膠電泳試驗對辛硫磷的遺傳毒性進行檢驗，結果表明辛硫磷對小鼠具有遺傳毒性;劉秀芳等[4]的研究也表明一定濃度的辛硫磷對小鼠生殖系統(tǒng)有毒性作用，并且對小鼠具有致畸性。

泥鰍是國內外常用的試驗魚種，它極容易飼養(yǎng)，在我國南北方均有廣泛的分布，因其分布廣泛，它不僅在作為試驗對象方面有重要意義，而且在作為檢測指標方面也有十分重要意義。近年來，生態(tài)毒理學和生態(tài)化學領域越來越多地將生物體內的酶指標作為生物學的標志物來評估受試化學品對生物的毒害作用[5]。谷丙轉氨酶（glutamicpyruvic transaminase，GPT）是泥鰍腦內的重要生物標志物[6]。生物標志物具有特異性強、反應靈敏的特點，并且能夠對毒性效應起到早期預警的作用。以泥鰍腦組織中谷丙轉氨酶作為生物標志物能夠反映出辛硫磷毒物對泥鰍腦的污染水平。

農藥會隨著水的遷移進入到環(huán)境中，導致水生生物得病，甚至導致水生生物死亡，目前在國內鮮見相關方面的報道。筆者以泥鰍為研究對象，以期為我國農藥的安全使用提供指導，從而達到保護環(huán)境和人體健康的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 泥鰍全部購自煙臺市紅旗水產市場，平均質量約8.0 g/條;辛硫磷乳油由山東勝邦魯南農藥有限公司生產（40%，乳油）;試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.2 方法

1.2.1 急性毒性試驗。通過預試驗，初步得到使泥鰍最高全部不死亡濃度和致使泥鰍最低全部死亡的濃度。根據最高全部不死亡濃度和最低全部死亡的濃度設計67.5、70.0、72.5、75.0、77.5、80.0、82.5 ml/L藥液共7個急性毒性濃度組，根據24 h和48 h所得出的數據，用加權概率法計算出半數致死濃度TLm，進而得到安全濃度。

1.2.2 慢性毒性試驗。從每個試驗組中挑選健康、體型均一、體表沒有破損的泥鰍若干條進行慢性毒性試驗。以即得的半數致死濃度為基礎，用等比數列的方法，設計出3.55、7.10、14.20、28.40、56.80 μL/L共5個濃度組（標記為1～5組，每個濃度組設置3個平行組），并按照設計好的濃度向各個水桶中加入相應的辛硫磷處理液。另設一不加辛硫磷的對照組（標記為0組），每個試驗組3次平行。在24、48、96 h后分別取各濃度組中有活力的泥鰍肝臟，對谷丙轉氨酶活性進行測定，腦組織勻漿的制備和轉氨酶活性的測定按照南京建成生物工程研究所提供的方法進行。

2 結果與分析

2.1 急性毒性試驗結果 根據處理過24 h和48 h的泥鰍死亡數，利用加權概率法，并用統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計處理分析，分別得出24 h半數致死濃度（TLm24）為81.52 μL/L，95%置信區(qū)間為（77.85，98.32）μL/L;48 h半數致死濃度（TLm48）為67.98 μL/L，95%置信區(qū)間為（19.02，72.26）μL/L。

根據上述得出的結果，按下面公式計算出安全濃度：

安全濃度=TLm48×0.3（TMm24/TLm48） 2

式中，TLm24 和TLm48 分別表示24 h半數致死濃度和48 h半數致死濃度。

代入上述試驗數據，求得其安全濃度為14.18 μL/L。

2.2 慢性毒性試驗結果 運用統(tǒng)計軟件IBMSPSS19和析因設計的方差分析研究辛硫磷對泥鰍腦谷丙轉氨酶（GPT）活性的影響。24、48、96 h不同濃度組谷丙轉氨酶活性的測定結果見表1;酶活性比較如圖1所示。

由表1可知，不同濃度的辛硫磷對泥鰍的誘導作用是不同的，相同濃度的處理液中，隨著時間的延長，誘導作用稍有變化。在經過相同時間段的處理之后，不同濃度的辛硫磷對泥鰍腦組織中谷丙轉氨酶活性的誘導作用有明顯差異。

由圖1可知，對照組的谷丙轉氨酶活性隨著時間的延長基本沒有變化。試驗1組中，谷丙轉氨酶活性總體呈現(xiàn)上升趨勢;2組中，谷丙轉氨酶活性隨著時間的延長呈現(xiàn)上升趨勢，48～96 h內的上升趨勢比24～48 h明顯;3組中，谷丙轉氨酶活性隨著時間的延長，呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，96 h的谷丙轉氨酶活性低于未處理時的水平;4組及5組中，谷丙轉氨酶活性隨著時間的延長一直呈現(xiàn)下降趨勢，4組中24～48 h的谷丙轉氨酶活性下降趨勢比48～96 h明顯。

3 結論

谷丙轉氨酶在動物的線粒體中廣泛存在，是一種對動物機體非常重要的轉氨酶，在動物機體的蛋白質代謝過程中能夠起到非常重要的作用[7-10]。該試驗結果表明，在較低的辛

硫磷濃度時，泥鰍腦組織中的谷丙轉氨酶活性首先呈現(xiàn)上升的趨勢，這可能是由于泥鰍對辛硫磷產生的應激反應造成的。但是隨著時間的延長，泥鰍腦組織中谷丙轉氨酶活性呈下降趨勢，這可能是因為泥鰍自身的抵抗能力有限，已經不能自己解除辛硫磷對其的毒害作用，辛硫磷對泥鰍產生了較強的毒害作用，所以造成谷丙轉氨酶活性下降。在經過較高濃度的辛硫磷毒液處理之后，泥鰍腦組織的谷丙轉氨酶活性一直呈下降趨勢，這可能是由于辛硫磷的濃度太高，泥鰍自身不能抵抗該濃度辛硫磷毒液的毒害作用。

參考文獻

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