何雪琴,任燕妮,王宏保,李 微,周 壇,王海燕

(同濟(jì)大學(xué)附屬楊浦醫(yī)院心內(nèi)科，上海 200090)

隨著生活水平的不斷提高，高尿酸血癥(HUA)的發(fā)生率呈明顯上升趨勢，患病率為3%～10%，其中20%可發(fā)展為痛風(fēng)，同時研究發(fā)現(xiàn)HUA是心血管疾病的獨立危險因素[1]。近年來，越來越多的研究表明血尿酸(UA)水平受遺傳因素的影響[2]。SLC2A9基因作為一種最有效的UA轉(zhuǎn)運體，可編碼人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白9(GLUT9)，對維持UA水平的穩(wěn)定具有重要作用。SLC2A9基因多態(tài)性的研究愈發(fā)引起關(guān)注，現(xiàn)已在不同民族、不同人群中發(fā)現(xiàn)其與血UA水平及痛風(fēng)密切相關(guān)，全基因組關(guān)聯(lián)分析(GWAS)發(fā)現(xiàn)SLC2A9基因是影響體內(nèi)血UA水平的關(guān)鍵基因[3-4]。本研究通過調(diào)查體檢人群HUA的患病情況，探尋導(dǎo)致血UA水平變化的影響因素，分析UA與SLC2A9基因多態(tài)性的關(guān)系，以期為HUA的發(fā)生、發(fā)展提供病因線索，為基因篩查提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年6-10月在上海市楊浦區(qū)中心醫(yī)院健康體檢中心接受體檢的人群共2 000例。納入標(biāo)準(zhǔn)：上海市楊浦區(qū)常住居民；年齡20～60歲，各項檢測指標(biāo)及資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重肝腎功能不全、惡性腫瘤、甲狀腺功能異常、自身免疫性疾病，以及正在服用利尿劑等影響UA藥物的人群。其中男1 068例，女932例，年齡20～60歲，平均(39.2±5.7)歲。

1.2方法

1.2.1健康檢查 由健康體檢中心專職醫(yī)師和護(hù)士測量身高、體質(zhì)量、腰圍、臀圍、血壓；抽取空腹肘正中靜脈血3 mL，采用貝克曼AU480全自動生化分析儀及其配套試劑盒檢測空腹血糖(FBG)、血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、UA等。另抽取3 mL肘正中靜脈血，放置于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管保存在-18 ℃的冰箱內(nèi)備用(用于檢測基因多態(tài)性)。

1.2.2基因多態(tài)性檢測 對備用的3 mL靜脈血提取DNA，采用改良PCR技術(shù)進(jìn)行基因擴(kuò)增。使用Sequenom MassARRAY Assay Design 3.0 Software設(shè)計SLC2A9基因單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點rs2241480的引物。上游引物：5′-ACG TTG GAT GCC ACT ACC TTC TCC CAT CAC-3′，下游引物5′-ACG TTG GAT GAA TGA GGG GCT ATA AGT CGG -3′。PCR反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性5 min，95 ℃變性30 s，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，共進(jìn)行40個循環(huán)；最后72 ℃延伸5 min。委托專業(yè)測序公司進(jìn)行引物合成，并將經(jīng)瓊脂糖凝膠純化回收的PCR產(chǎn)物進(jìn)行基因多態(tài)性進(jìn)行檢測。

1.3診斷標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)定義

1.3.1高血壓 收縮壓≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 3 Kpa)和(或)舒張壓≥90 mm Hg 或血壓雖<140/90 mm Hg，既往有高血壓史，目前正在服用抗高血壓藥。

1.3.2糖尿病 FBG≥7.0 mmol/L或正在接受降糖藥物治療。

1.3.3血脂異常 TC≥5.7 mmol/L 或LDL-C≥3.6 mmol/L或HDL-C≤1.0 mmol/L或TG≥1.7 mmol/L。

1.3.4HUA 正常嘌呤飲食狀態(tài)下非同日2次空腹血UA水平男性>420 μmol/L或女性>357 μmol/L[5]。

1.3.5超重和肥胖 計算體質(zhì)量指數(shù)(BMI),BMI=體質(zhì)量(kg)/身高2(m2)，BMI 24.0～27.9 kg/m2為超重，≥28.0 kg/m2為肥胖。

1.4分組 根據(jù)血UA水平[6]，將體檢人群分為3組，高UA組(男性>420 μmol/L或女性>357 μmol/L)217例，低UA組(<119 μmol/L)78例，介于高、低UA組之間的納入中UA組1 705例。

2 結(jié) 果

2.1不同性別、年齡的HUA的患病情況 在2 000例體檢對象中，共217例檢出HUA，患病率為10.85%。男性HUA患病率顯著高于女性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。不同年齡的HUA患病率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同性別、年齡的HUA的患病情況

2.2不同UA水平的體檢者臨床相關(guān)指標(biāo)及SLC2A9基因多態(tài)性比較 隨著UA水平的增高，BMI、SBP、DBP、FBG、TC、TG、LDL-C、BUN、Cr明顯升高，HDL-C明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。不同UA水平的體檢者rs2241480位點基因的分型比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3HUA影響因素分析 以是否患HUA(HUA=1，非HUA=0)為因變量，將性別(男=1，女=0)、BMI、SBP、DBP、FBG、TC、TG、LDL-C、HDL-C、BUN、Cr、rs2241480位點基因分型(CC=0，CT=1、TT=2)作為自變量引入模型進(jìn)行多因素logistics回歸分析。結(jié)果顯示，男性、BMI、SBP是HUA的獨立危險因素，HDL-C、rs2241480位點基因分型(CC)則是保護(hù)因素，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表2 不同UA水平的體檢者臨床相關(guān)指標(biāo)及SLC2A9基因多態(tài)性比較

續(xù)表2 不同UA水平的體檢者臨床相關(guān)指標(biāo)及SLC2A9基因多態(tài)性比較

注：-表示無數(shù)據(jù)

表3 HUA影響因素的logistics回歸分析

3 討 論

長期以來，HUA一直被視為與心血管疾病密切相關(guān)。本組體檢人群中，HUA總患病率為10.85%，接近全國平均水平，男性HUA 檢出率為12.92%，顯著高于女性8.48%，與陳濤等[7]研究結(jié)果基本一致，其主要的原因在于性激素水平及飲食習(xí)慣的差異，雌激素可促進(jìn)女性血UA的排泄，降低血UA水平[8]。此外，本研究顯示高UA人群中SBP、DBP、FBG、TG、TC、LDL-C均明顯升高，而HDL-C則出現(xiàn)下降，表明HUA患者存在明顯的血壓升高、血糖與血脂代謝紊亂，隨著UA水平的增高，罹患心血管疾病、代謝綜合征的風(fēng)險必將隨之升高，應(yīng)引起足夠重視。多因素logistics回歸分析進(jìn)一步證實，SBP是HUA的獨立危險因素，HDL-C則是保護(hù)因素(P<0.05)。因此，應(yīng)加強(qiáng)對該地區(qū)人群的健康宣教及促進(jìn)健康素養(yǎng)，倡導(dǎo)低嘌呤、低脂膳食的健康生活方式，從而減少心血管事件的發(fā)生。目前，多數(shù)研究集中于HUA對心血管疾病的危害，但關(guān)于低UA對機(jī)體的影響關(guān)注較少，以往被視為是沒有臨床意義的生化異常。但近年來研究發(fā)現(xiàn)，低尿酸血癥提示機(jī)體存在腎小管疾病或其他疾病，可誘發(fā)腎衰竭等并發(fā)癥[9]。MATSUO等[10]研究顯示，SLC2A9基因突變造成腎性低尿酸血癥，可能與GLUT9功能缺陷引起重吸收功能下降有關(guān)。DINOUR等[11]對存在嚴(yán)重遺傳性低尿酸血癥的家庭研究后發(fā)現(xiàn)，SLC2A9上L75R基因突變將對UA的正常重吸收造成嚴(yán)重影響。

大量研究已證實HUA的發(fā)病是環(huán)境、遺傳因素共同作用的結(jié)果，其中后者對HUA與痛風(fēng)的發(fā)生的影響占40%～70%，提示遺傳因素在UA的合成、排泄、重吸收過程中扮演著重要角色，但其分子機(jī)制與遺傳模式至今尚不明確[12-13]。近年來，HUA、痛風(fēng)相關(guān)易感基因位點的研究一直是國內(nèi)外研究的熱點，相關(guān)報道認(rèn)為HUA與多種基因不同位點的多態(tài)性有關(guān)，且GWAS已鎖定的血UA水平變異相關(guān)易感基因位點僅解釋約7%的UA變異，其中SLC2A9基因SNP與血UA水平密切相關(guān)[14]。有研究表明，SLC2A9基因?qū)A水平增高及誘發(fā)痛風(fēng)具有潛在影響，女性高達(dá)5.3%～6.0%、男性占1.2%～2.4%，是目前影響力最大的易感基因位點[15]。

本文重點探討SLC2A9基因rs2241480位點多態(tài)性與HUA的相關(guān)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著UA水平的升高，rs2241480位點CC基因型比例明顯增加，與張翻弟等[16]研究結(jié)果一致，說明rs2241480基因位點與UA水平存在一定相關(guān)性。YANG等[17]報道稱，攜帶TT+CT基因型人群發(fā)生HUA的風(fēng)險約為CC基因型的2.5倍。另有研究指出，SLC2A9基因能夠促進(jìn)UA從腎小管近曲小管上皮細(xì)胞向體外，從而發(fā)揮對血UA的直接調(diào)節(jié)作用[18]。在排除心血管疾病危險因素之后，多因素logistics回歸分析顯示，rs2241480位點CC基因型是HUA的保護(hù)因素(P<0.05)，說明SLC2A9基因SNP標(biāo)志可作為潛在HUA的分子標(biāo)志物。另有其他位點的多態(tài)性研究也得到類似結(jié)論，認(rèn)為攜帶rs734553 TT基因型人群心血管事件的發(fā)生率是其他基因型的2倍以上(HR=2.04)[19]。由此可見，SLC2A9基因多態(tài)性位點在升高血UA的基礎(chǔ)上，還可導(dǎo)致心血管事件的風(fēng)險增加。

4 結(jié) 論

血壓、血脂等傳統(tǒng)心血管危險因素均是血UA水平的獨立危險因素，SLC2A9基因多態(tài)性與HUA的發(fā)生可能存在一定相關(guān)性，但研究仍處于起步階段，與UA相關(guān)基因的單核苷酸多態(tài)性與心血管疾病的研究仍處于初步階段，多態(tài)性位點是如何影響UA水平仍需深入研究，從而為心血管疾病的早期防治開辟新的途徑。