李夢媛 馬卓

摘要：運(yùn)用奶牛隱性乳房診斷液、光學(xué)顯微鏡以及pH211酸度計(jì)測定乳汁中的pH值與體細(xì)胞的含量，以確定奶牛隱性乳房炎與牛乳中酸堿度的關(guān)系。結(jié)果表明，牛奶中pH的變化與奶牛體內(nèi)體細(xì)胞與炎性細(xì)胞呈現(xiàn)正相關(guān)，即牛乳樣本的正常值為6.4 - 6.6;當(dāng)體細(xì)胞含量處于20萬- 50萬/mL時(shí)，牛乳pH維持在6.6 - 6.8;而當(dāng)體細(xì)胞含有50萬- 150萬/mL時(shí)，則牛乳的pH為6.8 - 7.0;而體細(xì)胞含量在1 50萬- 500萬/mL，而此時(shí)牛孑LpH的變化至7.0 - 7.2;同時(shí)，當(dāng)體細(xì)胞含量超過500萬/mL時(shí)，此時(shí)牛乳的pH上升到7.2以上。

關(guān)鍵詞：奶牛隱性乳房炎;體細(xì)胞;酸堿度;牛奶

中圖分類號：S854.4

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.10.011

0 引言

相關(guān)研究表明，奶牛乳房炎的發(fā)病率為20%，而隱性乳房炎的患病率競高達(dá)50%。近年，在集中養(yǎng)殖化的不斷推廣下，并且抗生素預(yù)防與治療水平得到很大提升，我國大多數(shù)養(yǎng)殖場都實(shí)行嚴(yán)格的泌乳期與干乳期的抗生素預(yù)防與治療，奶牛的隱性乳房炎檢卅率極大降低，但奶牛的臨床乳房炎的發(fā)生率與危害性并沒有得到實(shí)質(zhì)性的緩解。而且盡管革蘭氏陰性菌的發(fā)生率有很大幅度下降，且無乳鏈球菌也在很大程度被消除，但乳房炎的整體危害還存在。因此，做好早期的診斷治療是預(yù)防隱性乳房炎與減少臨床性乳房病發(fā)病率的重要措施。而國際上公認(rèn)牛乳中有50萬/mL的體細(xì)胞，可基本確診患隱性乳房炎，而牛奶中的pH值在很大程度上能反映出牛奶中體細(xì)胞的含量[1]。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)?zāi)膛?/p>

試驗(yàn)選取的奶牛主要來白于本地奶牛飼養(yǎng)場，還有一些奶牛來白于我國蒙古、新疆等地。其中本地奶牛主要以初產(chǎn)為主，而蒙古、新疆等地情況比較復(fù)雜。

1.1.2 藥品與儀器

我國本土生產(chǎn)的奶牛乳房炎診斷試劑、光學(xué)顯微鏡、pH211酸度計(jì)、染色液等。

2 方法

2.1 乳樣收集

隨機(jī)選取某個(gè)奶牛場的泌乳期的奶牛若干頭，先用溫水擦拭乳頭，擦干后，再用0.1%新潔爾滅溶液的毛巾進(jìn)行擦洗，然后用70%的酒精對奶牛的乳頭與采集者的手指進(jìn)行消毒處理，最后進(jìn)行擠奶T作。在對牛乳進(jìn)行收集時(shí)，要運(yùn)用消毒滅菌后的試管，并且同時(shí)取2份，每份1O mL左右，1份放在專門的冰箱內(nèi)進(jìn)行保存，另外1份則立即做酒精陽性乳、pH的檢測以及體細(xì)胞的初步測定。

2.2 酒精陽性乳檢測

對試驗(yàn)采集到的乳樣要在0.5 h內(nèi)取其2-3 mL的乳汁，與等量的70%的酒精混合，如若有微細(xì)顆?；蛘咝鯛钅龎K的乳樣出現(xiàn)，則可以判斷其為酒精陽性乳。根據(jù)相應(yīng)的測定結(jié)果，選出酒精陽性乳的牛乳，測定其相應(yīng)的pH值，并且檢驗(yàn)其隱性乳房炎以及體細(xì)胞含量，比較酒精陽性乳與非酒精陽性乳的不同。

2.3 隱性乳房炎診斷

對于非酒精乳的乳樣，使用培養(yǎng)皿取2-3 mL的乳樣，并取等量的診斷液混合，靜置1 -2 min，判定相應(yīng)的結(jié)果。再根據(jù)相應(yīng)的判定標(biāo)準(zhǔn)，分別記錄好相應(yīng)的試驗(yàn)結(jié)果，然后用pH211酸度計(jì)測定個(gè)乳樣的pH值，并且計(jì)算相應(yīng)區(qū)域內(nèi)不同標(biāo)準(zhǔn)下的乳樣值。

3 結(jié)果與分析

3.1 酒精陽性乳對牛乳pH值的影響

酒精陽性乳與非酒精陽性乳的奶牛隱性乳房炎的陽性檢出率之間的差異并不十分顯著。同時(shí)，酒精陽性乳與非酒精陽性乳之間的pH基本也相同，各個(gè)方面所測量的原始數(shù)據(jù)經(jīng)過相應(yīng)的實(shí)踐分析后，發(fā)現(xiàn)彼此間的差異也不明顯。經(jīng)過顯微鏡染色鏡檢，2種乳樣之間的體細(xì)胞種類并沒有很大的變化。因此，酒精陽性乳與體細(xì)胞含量、種類、pH值變化并沒有相應(yīng)的聯(lián)系，而反應(yīng)出的則是酒精陽性乳與非酒精陽性乳彼此間能互相共存，由此說明乳房炎與酒精陽性乳是2種不同類型的臨床病癥，而通過pH的變化，可判定奶牛隱性乳房病對酒精陽性乳沒有影響。

3.2 牛乳體細(xì)胞含量與pH值的關(guān)系

不同區(qū)域內(nèi)牛乳pH平均值中，最小值為6.322，而最大值為7.413，可見牛乳的pH值通常處于6-7，而且它與乳汁的體細(xì)胞含量呈現(xiàn)正相關(guān)。在體細(xì)胞含量的不斷增加下，其白細(xì)胞的相應(yīng)比例也增加很多，而后通過顯微鏡進(jìn)行鏡檢觀察，奶牛隱性乳房病中嗜中性細(xì)胞為50% - 90%。因此，乳腺的炎癥反應(yīng)、白細(xì)胞數(shù)急增是牛乳體細(xì)胞含量增多的重要因素。另外，鏡檢技術(shù)與診斷試劑判定體細(xì)胞含量的結(jié)果大致一致。同樣，進(jìn)行抽樣鏡檢的每個(gè)乳樣體細(xì)胞含量，也與pH值的變化范圍相契合。因此，奶牛乳房炎乳汁pH值與體細(xì)胞數(shù)量之間是正相關(guān)的，如牛乳樣本的正常值為6.4 - 6.6;當(dāng)體細(xì)胞含量處于20萬- 50萬/mL時(shí)，牛乳pH維持為6.6 - 6.8;而當(dāng)體細(xì)胞含有50萬- 150萬/mL時(shí)，則牛乳的pH有6.8 - 7.0;而體細(xì)胞含量在150萬- 500萬/mL，此時(shí)牛乳pH的變化至7.0 - 7.2;同時(shí)，當(dāng)體細(xì)胞含量超過500萬/mL時(shí)，此時(shí)牛乳的pH竟然會(huì)上升7.2以上。

4 討論

利用牛乳中pH值的變化，不僅能間接確診奶牛的隱性乳房炎，而且在很大程度能反映出奶牛隱性乳房病的發(fā)病程度[2]。因此，在實(shí)際臨床實(shí)踐中，僅簡單運(yùn)用常規(guī)的pH試紙就能檢測到隱性乳房病，并且還能在一定程度上反映群體的健康狀況，可見其應(yīng)用前景極為廣闊。但其中也存在諸多不足，因?yàn)槟膛５拇x問題、其他疾病以及種族之間差異等因素的影響，使正常奶牛的體細(xì)胞數(shù)量也有不正常的現(xiàn)象。如當(dāng)對pH為6.4 - 6.6與6.6 - 6.8的乳樣進(jìn)行相應(yīng)的檢驗(yàn)分析時(shí)，發(fā)現(xiàn)體細(xì)胞數(shù)量差異并不十分明顯。因此，對于pH為6.4 - 6.6與6.6 - 6.8的牛乳，并不能只通過簡單的pH試紙判斷其是否為陽性，還需要通過進(jìn)一步的顯微鏡鏡檢，才能得到較為準(zhǔn)確的測定結(jié)果。

試驗(yàn)利用體細(xì)胞數(shù)量、pH值的大小作為判斷是否患有隱性乳房病的依據(jù)，而且通過對牛乳體細(xì)胞鏡檢可知，在奶牛體質(zhì)、細(xì)菌作用、毒力效果等作用的影響下，會(huì)導(dǎo)致乳腺組織炎癥進(jìn)一步加劇，增加血管的滲透性，而此時(shí)通過自身的調(diào)節(jié)，大量白細(xì)胞滲出，使體細(xì)胞數(shù)量急增，即大量白細(xì)胞數(shù)量增多。另外，在炎性反應(yīng)不斷加劇下，血液與牛乳之間的pH值的梯度差不斷降低，使牛乳中pH值異常升高，逐漸趨向于血液的pH值。因此，通過pH檢測奶牛乳房病的效果比用體細(xì)胞數(shù)量判斷更加簡單有效，而且運(yùn)用pH值檢測還能在很大程度上減少因胎次、年齡以及新陳代謝等客觀因素而引起其他正常體細(xì)胞數(shù)量減少或增加，降低對檢測結(jié)果m現(xiàn)誤判情況的出現(xiàn)，使檢測更加具備說服力與可信度[3]。

另外，剛從乳房擠出的牛乳中出現(xiàn)酒精陽乳與乳汁的pH值并沒有太大關(guān)系，即酒精陽乳與隱性乳房病是2種截然不同類型的臨床疾病。因此，在實(shí)際生產(chǎn)中，運(yùn)用常用酒精試劑檢驗(yàn)?zāi)膛Ｊ欠窕茧[性乳房病是極其不正確的檢驗(yàn)方法。因?yàn)榕Ｈ榫凭栃猿霈F(xiàn)以下2種情況：1種是由于外在管理保存不當(dāng)所致，使牛乳中微生物大量繁殖，乳糖分解成乳酸，進(jìn)而牛乳酸度升高，顯現(xiàn)出牛乳酒精陽性反應(yīng);另外1種則是由于奶牛自身新陳代謝異常，使牛乳本身的成分結(jié)構(gòu)遭受到破壞，也出現(xiàn)同樣的牛乳酒精陽性反應(yīng)，但是牛乳中的酸度不升高，成為區(qū)分2種出現(xiàn)牛乳酒精陽性反應(yīng)的指標(biāo)。

5 結(jié)束語

做好早期的診斷治療是預(yù)防隱性乳房炎與減少臨床性乳房病發(fā)病率的重要措施。應(yīng)用牛奶酸堿度變化可以確診奶牛是否患隱性乳房炎，而且操作簡單，值得推廣。

參考文獻(xiàn)

[l]李勇，葛秀國，竇忠英.奶牛隱性乳房炎研究進(jìn)展[J].黃牛雜志，2013（ 29）：16-18.

[2]張中文，吳國娟，劉風(fēng)華，等北京地區(qū)奶牛乳房炎病原菌的分離鑒定及藥敏實(shí)驗(yàn)[J].北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，17（ 40）：42-47

[3]胡松華.奶牛乳房炎抗生素防治失敗原因探討[J].中國獸醫(yī)雜志，2014，38 （2）：18-20.

作者簡介：李夢媛（1989-），女，獸醫(yī)碩士，助理講師，從事畜牧獸醫(yī)教學(xué)工作。

馬卓（1985-），男，碩士研究生，助理講師，從事畜牧獸醫(yī)教學(xué)T作。FA326CE1-171B-4461-92DA-90597DC12D85