王曉玉　蒲小蘭　安軍　王娃金　林書蘭

摘要：在本文的介紹中，我們重點提到了白酒中乳酸含量檢測實驗，通過建立測定白酒中的乳酸含量，得出關(guān)于乳酸含量的相應(yīng)檢測方法。研究結(jié)果顯示白酒中的乳酸在一定濃度范圍內(nèi)與峰面積呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，為此我們需要在檢測實驗中尋找出更為準確、簡便、快速的乳酸含量檢測方法，將其應(yīng)用到日后的白酒乳酸含量檢測作業(yè)中，使得所測出的乳酸含量數(shù)據(jù)能夠更加真實、可靠。

關(guān)鍵詞：白酒;乳酸;含量;檢測方法

【中圖分類號】R197??? 【文獻標識碼】A???? 【文章編號】1004-7484（2019）10-0220-03

關(guān)于白酒中乳酸含量的檢測方法研究這一話題，我們進行了對比分析，基于不同試驗情況下總結(jié)出了不同乳酸含量檢測方法的優(yōu)缺點;其次，酸類物質(zhì)的出現(xiàn)主要源于白酒中的一些呈香呈味物質(zhì)，這類物質(zhì)在白酒微量成分中所占據(jù)的比例較大，研究證明一些濃香型白酒的口感受該物質(zhì)的影響較大;此外，白酒中乳酸含量的多少將會直接影響到白酒品質(zhì)的好壞，進而受到制酒者的格外關(guān)注?？梢哉f對白酒中的乳酸含量進行的檢測，將會在很大程度上影響著整個制酒工業(yè)的發(fā)展，對白酒的勾兌以及一些白酒生產(chǎn)工藝的控制都有著較為深遠的影響。

1儀器與試劑

1.1 儀器：高效液相色譜儀（二極管陣列檢測器）Agilent1200;十萬分之一分析天平;

1.2 試劑：甲醇、乙腈為色譜純，水為實驗室一級用水（超純水），磷酸、磷酸二氫鉀均為分析純。乳酸對照品（含量89.9%），Dr. Ehrenstorfer Gmbh;L-乳酸對照品（含量90.08%），阿拉丁;DL-乳酸對照品（含量85%），百靈威;乙酸對照品（含量99+%），Alfa Aesar;

1.3 樣品：實驗室提供白酒

2 樣品測定

2.1 對照品溶液的制備：分別精密稱定乳酸對照品80mg、乙酸對照品65mg，置25mL容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，得對照品儲備液，精密吸取上述對照品儲備液0.125mL，0.25mL，0.5mL，1.0mL，2.0mL各置5mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，即得對照品工作液，供制作標準曲線用。

2.2 樣品制備：方法一：樣品直接用0.45μm濾膜過濾，備用。

方法二：取1mL酒樣于10mL進口塑料離心管，氮吹（40℃）至剩約0.5mL，再用水稀釋至2mL，用0.45μm濾膜過濾，備用。

2.3色譜條件：色譜柱：Agilent，（250mm×4.6mm，5μm）;檢測波長210nm，流速為1.0mL/min。

對照品色譜圖及光譜

3 色譜條件的確定

3.1 磷酸二氫鉀緩沖液pH的選擇：其它色譜條件保持不變，分別使用兩種pH的磷酸二氫鉀緩沖液作流動相，考察出峰情況。

對照品、樣品直接用0.45μm濾膜過濾，上機測試，色譜條件：100%0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液作流動相;柱溫40℃;進樣量20 μL;其中0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的pH分別調(diào)至2.5及2.0，由實驗結(jié)果可知，兩種pH條件下出峰情況無明顯差異，故pH，選擇2.0。

3.2 流動相的篩選：實驗設(shè)計了三種流動相：①100%0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液，②甲醇-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（5：95），③乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（1：99）。

對照品照“上述配制乳酸（198.68mg/L）及乙酸（523.5mg/L）單標，樣品直接用0.45μm濾膜過濾，上機測試，其它色譜條件：柱溫為40℃;進樣量為20 μL;0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的pH為2.0。

三種流動相下標品出峰情況沒有明顯差異，在第三種流動相下樣品目標峰分離度較好，故選用乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（1：99）作為本方法的流動相。

3.3 柱溫的選擇：樣品直接用0.45μm濾膜過濾，上機測試，分別考察柱溫40℃和25℃時樣品出峰情況。其它色譜條件：流動相為乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（1：99）;進樣量20 μL;0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的pH為2.0。

兩種溫度對出峰無明顯差異，考慮到高溫可能影響色譜柱的壽命，故選用25℃。

3.4進樣量的選擇：樣品按兩種方法各處理一份，上機測試，分別考察了進樣20μL和5μL樣品的出峰情況。其它色譜條件：流動為相乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（1：99）;柱溫為25℃;0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的pH為2.0。

兩種情況下標品均能能到較好的分離，樣品的出峰情況則有兩種：①直接過濾進樣，進樣量大的分離效果比進樣量小的稍差;②樣品氮吹，這種情況下，進樣量不影響出峰效果，均能達到良好分離。

最終確定的色譜條件：色譜柱Agilent，ZORBAX SB-Aq（250mm×4.6mm，5μm）;檢測波長210nm;乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（1：99）作流動相;流速1.0mL/min;柱溫25℃;進樣量20 μL（氮吹除醇）、5 μL（直接進樣）。

4樣品制備方式的確定

樣品水浴/電熱板揮干溶劑的處理方式所得結(jié)果重現(xiàn)性差且乙酸峰會出現(xiàn)丟失，故考慮采用40℃水浴同時氮吹的方式除醇。

可以發(fā)現(xiàn)，無論是水浴/電熱板揮干、還是氮吹吹干溶劑的方式，結(jié)果均不理想，考慮可能是在揮干溶劑的過程中造成的損失，而水浴或電熱板的方式均不能較好的控制除去的溶劑的量，故采用40℃水浴加氮吹的方式除去一定量的溶劑（主要是易揮發(fā)的醇）后再用水定容到原體積。實驗中考察了氮吹后剩余不同體積的出峰情況：取1mL酒樣于10mL進口塑料離心管，40℃氮吹至剩余約0.9mL、0.8mL、0.7mL、0.6mL、0.5mL、0.4mL、0.3mL，再用水稀釋至2mL，用0.45μm濾膜過濾，上機測定。

從樣品中乳酸及乙酸的分離情況來看，當(dāng)剩余0.3mL～0.5mL時，均能得到良好分離，當(dāng)剩余0.6mL～0.9mL時，分離度較差。從定量結(jié)果來看，隨著剩余體積的減少，含量也隨之減少;究其原因，一方面可能是氮吹帶來的損失;另一方面，剩余體積越多，除醇越少，峰分離越差，直接影響積分，進而影響定量結(jié)果。綜合考慮，選擇氮吹至剩余0.5mL。氮吹處理方法為：取1mL酒樣于10mL進口塑料離心管，40℃氮吹至剩余約0.5mL，再用水稀釋至2mL，用0.45μm水相有機濾膜過濾，備用。

5 精密度試驗

取一份樣品，連續(xù)測定6次乳酸的精密度，結(jié)果見表3。

結(jié)果表明，該方法精密度良好。

6回收率試驗

吸取1 mL已知含量的樣品，按上述方法二樣品處理，結(jié)果如表4。

加標回收試驗結(jié)果表明，該方法準確度高，方法可靠

7 結(jié)論與討論

通過本次對白酒中乳酸含量進行檢測實驗后，我們可以發(fā)現(xiàn)高效液相色譜法不但可以準確無誤的檢測出白酒中乳酸的含量，同時其還具有檢測效率快、檢測準確度高等特點。此外，與傳統(tǒng)實驗中所使用的氣相色譜測試法相比，高效液相色譜法適用范圍更廣。

8 結(jié)束語

綜上，本文針對“白酒中乳酸含量檢測方法”這一話題展開了一個深刻的論述，研究發(fā)現(xiàn)白酒中所含有的乳酸成分將會在一定程度上影響著白酒的制酒口感，對白酒制酒工藝以及白酒的品質(zhì)有著很大的關(guān)聯(lián)性，為此，在實際白酒成分檢測作業(yè)中，氣相色譜法配FID檢測器可以測定白酒中大多數(shù)有機酸，但作為四大酸之一的乳酸則在FID上沒有響應(yīng)，查閱相關(guān)資料可知，采用高效液相色譜儀直接進樣，可同時分析出白酒中乳酸及乙酸的含量，彌補了氣相色譜儀不能直接分析乳酸的缺點?；趥髟诩铀贆z測速度的同時，擴大了樣品濃度范圍、提高了檢測的精密度和準確度，對科學(xué)指導(dǎo)白酒生產(chǎn)有著重要的意義。

參考文獻

[1]孫艷.應(yīng)用高效液相色譜技術(shù) 有效提升食品檢測效率[J].中國食品，2020（08）：118.

[2]熊賽霞.高效液相色譜法的特點及應(yīng)用[J].現(xiàn)代食品，2020（03）：199-201.

[3]白麗真，劉洪銀，劉偉，張帆，朱婷婷，魏金旺.超高效液相色譜法檢測白酒中乳酸含量的方法及方法確認[J].釀酒科技，2020（01）：75-77.