馬 妍

（遼寧省林業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，遼寧 沈陽(yáng) 110001）

楊樹是我國(guó)地域分布最為廣泛的造林樹種，隨著楊樹栽植的面積不斷擴(kuò)大，楊樹爛皮病的發(fā)生逐漸呈現(xiàn)出上升的趨勢(shì)，長(zhǎng)此以往會(huì)造成新營(yíng)造的楊樹純林大面積死亡，給林業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)建設(shè)帶來(lái)巨大的阻礙。楊樹爛皮病病原菌為子囊菌亞門核菌綱的污黑腐皮殼菌。值得注意的是，該病為典型的寄主主導(dǎo)型病害，病原菌為弱寄生菌，只可以寄生在生長(zhǎng)不良或受日灼傷、凍傷以及受到機(jī)械損傷的樹木，因此給防治帶來(lái)相當(dāng)大的困難。

隨著現(xiàn)代林業(yè)的發(fā)展，化學(xué)農(nóng)藥（殺菌劑或殺蟲劑）的使用量已在逐年降低。但當(dāng)某種病害或蟲害大發(fā)生大流行的時(shí)候，化學(xué)防治依然是最能夠立竿見(jiàn)影的防治措施，故不可廢除。

本研究將常用的殺菌劑多菌靈作為研究對(duì)象，研究其對(duì)污黑腐皮殼菌的防治效果，并初步探討其抑菌機(jī)理。旨在為更好、更科學(xué)地研制楊樹爛皮病防治藥劑提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 菌株來(lái)源

污黑腐皮殼菌分離自沈陽(yáng)市區(qū)行道樹感病楊樹。

1.2 供試藥劑

多菌靈50%可濕性粉劑（山東德州大成農(nóng)藥有限公司）。

圖1 多菌靈對(duì)污黑腐皮殼菌生長(zhǎng)的影響

圖2 多菌靈對(duì)污黑腐皮殼菌可溶性蛋白含量的影響

圖3 多菌靈對(duì)污黑腐皮殼菌MDA含量的影響

1.3 多菌靈對(duì)病原菌生長(zhǎng)的影響

在無(wú)菌條件下，將多菌靈藥劑配成多個(gè)不同的藥劑濃度PDA培養(yǎng)基平板。濃度設(shè)定為：100、200、1000和2000毫克/升。用無(wú)菌打孔器打取直徑為5毫米的菌片，接于含藥劑培養(yǎng)基中央，置于25℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng)，以加入清水的培養(yǎng)基作為對(duì)照，每處理5次重復(fù)。培養(yǎng)后每天采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，連續(xù)測(cè)量5天。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，計(jì)算出各處理菌絲生長(zhǎng)的平均直徑。

1.4 多菌靈對(duì)病原菌生理代謝的影響

室溫下，將菌片分別用相應(yīng)濃度的多菌靈浸泡2小時(shí)，以無(wú)菌水浸泡菌絲體作為對(duì)照，每個(gè)處理3次重復(fù)。

采用考馬斯亮藍(lán)G 2 5 0法測(cè)定可溶性蛋白，采用硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛（MDA）。

2 結(jié)果與分析

2.1 多菌靈對(duì)病原菌生長(zhǎng)的影響

如圖1所示，污黑腐皮殼菌在各殺菌劑濃度培養(yǎng)基中生長(zhǎng)均接近“J”型曲線，接種1天后，除1000和2000毫克/升處理組的菌株未生長(zhǎng)外，其他各組處理均進(jìn)入生長(zhǎng)期。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，至培養(yǎng)第5天時(shí)，對(duì)照組長(zhǎng)至68毫米，為各處理組直接最大的，兩組高濃度處理（1000和2000毫克/升）也出現(xiàn)一定的生長(zhǎng)現(xiàn)象。該試驗(yàn)結(jié)果表明，多菌靈對(duì)污黑腐皮殼菌的生長(zhǎng)存在一定的抑制作用。

2.2 多菌靈對(duì)病原菌生理代謝的影響

通過(guò)觀察，研究結(jié)果如圖2和圖3所示。本研究當(dāng)中，不同濃度的多菌靈對(duì)污黑腐皮殼菌菌絲細(xì)胞均有不同程度的破壞作用。其中可溶性蛋白含量隨著多菌靈濃度的升高而含量降低，而MDA含量則是隨著多菌靈濃度的升高而升高。該結(jié)果表明，表明菌絲細(xì)胞在受到殺菌劑脅迫時(shí)，會(huì)通過(guò)提高自身細(xì)胞可溶性蛋白含量來(lái)增大細(xì)胞對(duì)于不良環(huán)境的抗性，但細(xì)胞膜依然受到破壞，膜脂化加劇，產(chǎn)生大量的MDA。

3 結(jié)論與討論

本文對(duì)污黑腐皮殼菌響應(yīng)多菌靈的脅迫問(wèn)題，分別在菌株生長(zhǎng)和生理代謝兩個(gè)層面進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，并初步探討了多菌靈對(duì)污黑腐皮殼菌的抑菌機(jī)理。研究發(fā)現(xiàn)，多菌靈無(wú)論在生長(zhǎng)和生理代謝層面，均對(duì)污黑腐皮殼菌有較好的抑制作用。

楊樹爛皮病又稱楊樹腐爛病、楊樹潰瘍病，其病程較為復(fù)雜，發(fā)病隱蔽，且發(fā)病率高，容易造成楊樹林的成片死亡，給現(xiàn)代林業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。該病自發(fā)現(xiàn)以來(lái)，一直是農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)的重點(diǎn)防治對(duì)象。林業(yè)生產(chǎn)上慣用的做法是，在林木發(fā)病之前，及時(shí)做好藥物保護(hù)，往往會(huì)收到較為理想的防治效果。多菌靈為廣譜性殺菌劑，由于其良好的殺菌效果，被廣泛的應(yīng)用于農(nóng)林業(yè)的苗圃當(dāng)中。通過(guò)本研究，從菌株生長(zhǎng)和生理代謝兩個(gè)層面可以得出結(jié)論：多菌靈對(duì)污黑腐皮殼菌的抑制作用主要體現(xiàn)在蛋白質(zhì)的代謝并造成病原菌的細(xì)胞膜脂化，給細(xì)胞帶來(lái)破壞，進(jìn)而起到殺菌作用。