陳燕 馬尚 白萬秋 尹顏軍 張?chǎng)瓮?時(shí)廣利

北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京胸科醫(yī)院檢驗(yàn)科 101149

肺癌是目前全球最常見的嚴(yán)重威脅人類健康和生命的惡性腫瘤之一,近幾年肺癌的發(fā)病呈年輕化的趨勢(shì),其病死率排在癌癥的第一位[1]。75%的肺癌患者為非小細(xì)胞肺癌 (non-small cell lung cancer,NSCLC),發(fā)現(xiàn)時(shí)大多數(shù)為晚期肺癌 (Ⅲ期和Ⅳ期),5年生存率大概只有10%,而早期肺癌 (Ⅰ期和Ⅱ期)患者的5 年生存率大約是40%[2]。因此,提高NSCLC 患者生存率的有效手段是早期發(fā)現(xiàn)和早期治療。異檸檬酸脫氫酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)普遍存在于人的細(xì)胞質(zhì)中,是一種蛋白酶,在細(xì)胞的代謝過程中起著重要作用,其主要功能是參與機(jī)體的應(yīng)激損傷防御[3]。目前有研究表明,IDH1在肺癌組織中表達(dá)異常,并參與肺癌發(fā)病相關(guān)信號(hào)通路的傳導(dǎo)[4]。細(xì)胞角蛋白19 片段 (cytokerantin-19,Cyfra21-1)是目前臨床上常用的肺癌腫瘤標(biāo)志物。本研究主要探索IDH1和Cyfra21-1 在NSCLC 患者血清中的濃度水平,分析聯(lián)合檢測(cè)血清IDH1和Cyfra21-1在NSCLC的早期診斷、輔助診斷和鑒別診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 納入2016年5月至2018年8月首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京胸科醫(yī)院腫瘤科NSCLC 患者247例為NSCLC 組,其中年齡 (51.2±23.4)歲,年齡范圍為42～76歲；男146例,女101例；腺癌180例,鱗癌67例。所有患者為初次發(fā)現(xiàn)的NSCLC患者,并經(jīng)過病理學(xué)確診,既往未經(jīng)過任何化療、放療或手術(shù)。肺部良性疾病組包括肺結(jié)核患者、肺炎患者或肺部良性結(jié)節(jié)患者共80例 (男34例、女46例)。健康組為北京胸科醫(yī)院體檢正常的職工50例 (男29例、女41例),血脂、肝腎功能指標(biāo)正常,無高血壓和糖尿病病史等。本研究符合 《赫爾辛基宣言》的原則。

1.2 研究方法 采集3組空腹靜脈血標(biāo)本各4 ml,在2 h內(nèi)離心分離血清,然后放置于-80 ℃超低溫冰箱中保存,最后集中進(jìn)行IDH1和Cyfra21-1的測(cè)定。IDH1的檢測(cè)采用北京現(xiàn)代高達(dá)生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)的IDH1酶聯(lián)免疫法定量檢測(cè)試劑盒,吸光度值的測(cè)定采用進(jìn)口酶標(biāo)儀 (型號(hào)：Multiskan),IDH1的臨界參考值為5μg/L。Cyfra21-1的檢測(cè)采用上海透景生物技術(shù)公司生產(chǎn)的全自動(dòng)流式熒光免疫分析儀完成 (型號(hào)：TESMI),Cyfra21-1的臨界參考值為4μg/L。所有標(biāo)本的檢測(cè)過程嚴(yán)格按照試劑盒和儀器的說明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,所有資料數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性分布檢驗(yàn),非正態(tài)分布數(shù)據(jù)以M(QR)表示,組間比較采用秩和檢驗(yàn)方法；采用四格表計(jì)算敏感度和特異度。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組NSCLC患者血清IDH1 和Cyfra21-1水平 NSCLC組血清中IDH1、Cyfra21-1水平均明顯高于肺部良性疾病組和健康組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (Z=6.414、6.811,P值均＜0.001),見表1。

表1 3組NSCLC患者血清IDH1和Cyfra21-1的濃度水平 [μg/L,M(QR)]

2.2 不同病理類型的NSCLC 患者血清IDH1 和Cyfra21-1水平比較 鱗癌和腺癌NSCLC 患者血清IDH1 水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (Z=0.338,P＞0.05)；鱗癌NSCLC患者血清Cyfra21-1水平高于腺癌,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (Z=2.114,P＜0.05),見表2。

2.3 不同TNM 分期的NSCLC患者血清IDH1和Cyfra21-1水平比較 Ⅰ期+Ⅱ期和Ⅲ期+Ⅳ期的NSCLC患者血清IDH1水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (Z=0.649,P＞0.05)；Ⅲ期+Ⅳ期的NSCLC患者血清Cyfra21-1水平高于Ⅰ期+Ⅱ期,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (Z=2.195,P＜0.05),見表3。

表2 不同病理類型的非小細(xì)胞肺癌患者血清IDH1和Cyfra21-1水平 [μg/L,M(QR)]

表3 不同TNM 分期的非小細(xì)胞肺癌患者血清IDH1和Cyfra21-1水平 [μg/L,M(QR)]

2.4 NSCLC 患者血清IDH1和Cyfra21-1的敏感度和特異度 NSCLC患者血清IDH1和Cyfra21-1的敏感度分別為46.5%和48.6%,特異度分別為88.5%和89.2%。二者聯(lián)合對(duì)NSCLC 檢測(cè)的敏感度明顯提高 (61.9%),特異度略有下降 (81.5%)。

2.5 不同病理類型的NSCLC 患者血清IDH1 和Cyfra21-1敏感度的比較 血清IDH1在腺癌和鱗癌NSCLC患者中檢測(cè)的敏感度分別為47.8%和43.3%,Cyfra21-1在鱗癌NSCLC 患者中檢測(cè)的敏感度 (59.7%)高于腺癌NSCLC 患者的敏感度(44.4%)。

2.6 不同TNM 分期的NSCLC患者血清IDH1和Cyfra21-1敏感度的比較 血清Cyfra21-1 在Ⅲ期+Ⅳ期NSCLC 患者中檢測(cè)的敏感度 (61.8%)高于Ⅰ期+Ⅱ期NSCLC 的敏感度 (14.5%),IDH1在Ⅰ期+Ⅱ期和Ⅲ期+Ⅳ期NSCLC 患者中的敏感度分別為44.9%和41.6%。

3 討論

目前肺癌的發(fā)病率高居各種惡性腫瘤的第一位,早期肺癌患者發(fā)病時(shí)沒有明顯的癥狀,大多數(shù)肺癌患者確診時(shí)已屬于中晚期,喪失了最佳的治療機(jī)會(huì),因此肺癌的病死率較高,全球每年大概有130萬人因患肺癌死亡[5]。目前早期肺癌患者的發(fā)現(xiàn)主要依靠影像學(xué),胸部CT 在肺癌中有較高的陽性率,但是對(duì)于一些良性結(jié)節(jié)的鑒別診斷,胸部CT 有一定的局限性。雖然有學(xué)者建議肺癌的早期篩查可應(yīng)用低劑量螺旋CT 的方式,但是此方式仍存在爭議,還沒有達(dá)成專家共識(shí)[6]。腫瘤標(biāo)志物是由腫瘤細(xì)胞分泌或者是由機(jī)體產(chǎn)生的、進(jìn)入到人的血液或體液中的物質(zhì),包括蛋白質(zhì)、酶和激素等,能夠在一定程度上反映腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程[7]。目前與肺癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床,例如癌胚抗原、Cyfra21-1、胃泌素前體、特異性神經(jīng)元烯醇化酶等,用于肺癌的輔助診斷、預(yù)后判斷和療效監(jiān)測(cè)。但是這些腫瘤標(biāo)志物在Ⅰ期和Ⅱ期肺癌中的敏感度較低,只有20%左右[8]。因此,為了盡快發(fā)現(xiàn)早期肺癌患者,尋找敏感度和特異度都比較好的肺癌相關(guān)腫瘤標(biāo)志物對(duì)提高肺癌患者的生存率具有重要的臨床意義。

IDH1基因位于人染色體2q33上,IDH1存在于細(xì)胞質(zhì)中,是三羧酸循環(huán)中重要的限速酶,可以促進(jìn)NADPH 的產(chǎn)生,并參與細(xì)胞的代謝功能以及參與不同的生物途徑、發(fā)揮不同的生物學(xué)功能[9-10]。孫濤等[4]應(yīng)用熒光定量聚合酶鏈的方法檢測(cè)了50例肺癌組織和癌旁組織中IDH1的表達(dá)水平,并且采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的方法檢測(cè)了50例肺癌患者和20例健康人血漿標(biāo)本中IDH1的表達(dá)水平。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),相對(duì)于癌旁組織IDH1在肺癌組織中過度表達(dá),IDH1在肺癌患者血漿中的表達(dá)水平顯著高于健康人,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Sun等[11]的研究結(jié)果同樣發(fā)現(xiàn),IDH1 在NSCLC患者血漿中的表達(dá)水平顯著高于健康人組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,IDH1 在 NSCLC 中的敏感度為75.8%、特異度為89.6%。Cyfra21-1 是在上皮細(xì)胞凋亡的過程中,細(xì)胞角蛋白降解后形成的一種可溶性物質(zhì),可以直接進(jìn)入人的血液中[12]。Cyfra21-1是目前臨床常用的腫瘤標(biāo)志物,2015 年版的 “中國原發(fā)性肺癌診療規(guī)范”中推薦Cyfra21-1主要用于NSCLC的輔助診斷、療效監(jiān)測(cè)和隨訪觀察[13]。

本研究的結(jié)果顯示,NSCLC 組患者血清中IDH1和Cyfra21-1水平高于肺部良性疾病組和健康組。IDH1在NSCLC 中的敏感度為46.5%、特異度為88.5%,Cyfra21-1 在 NSCLC 檢測(cè)中的敏感度為48.6%、特異度為89.2%,二者在NSCLC中的敏感度和特異度大致相同,均可以作為NSCLC的腫瘤標(biāo)志物。另外,本研究的重要發(fā)現(xiàn)是IDH1在早期NSCLC (Ⅰ期和Ⅱ期)中檢測(cè)的敏感度 (44.9%)高于Cyfra21-1 (14.5%),提示IDH1對(duì)于早期NSCLC 的檢測(cè)要優(yōu)于Cyfra21-1。2015年版的 “中國原發(fā)性肺癌診療規(guī)范”中建議腫瘤標(biāo)志物應(yīng)該聯(lián)合使用,可以提高檢測(cè)的敏感度和特異度。本研究的結(jié)果也顯示,將IDH1 和Cyfra21-1聯(lián)合使用,顯著提高了對(duì)NSCLC 檢測(cè)的敏感度,達(dá)到了61.9%。

綜上所述,血清IDH1的檢測(cè)對(duì)于NSCLC 的輔助診斷有很好的臨床應(yīng)用價(jià)值,尤其是對(duì)Ⅰ期和Ⅱ期NSCLC 檢測(cè)的敏感度優(yōu)于目前使用的Cyfra21-1,聯(lián)合檢測(cè)IDH1和Cyfra21-1可提高Ⅰ期和Ⅱ期NSCLC的敏感度。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突