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梅毒檢驗中酶聯(lián)免疫吸附法與甲苯胺紅不加熱血清法的比較

2019-07-31 06:36:58姚映生
質(zhì)量安全與檢驗檢測 2019年3期
關(guān)鍵詞:免疫吸附苯胺梅毒

姚映生

(汕頭市中心醫(yī)院檢驗科 廣東汕頭 515031)

1 前言

近幾年來,梅毒感染性檢出率明顯上升[1],成為社會共同關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。梅毒是由蒼白螺旋體引起的一種性傳播疾病[2],一般使用酶聯(lián)免疫吸附法檢測,雖然其靈敏度較高,特異性較好,且操作方便,但有假陽性高的不足,臨床篩查中存在一部分缺陷。隨著醫(yī)療水平的逐漸提升,臨床上應用了檢測準確性更高的梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗,缺點是試劑盒價格昂貴,所以難以作為常規(guī)的梅毒篩查方法廣泛應用。對于梅毒感染能否進行快速而精準的診斷,是當前亟待解決的首要問題。通過梅毒篩查的200 例患者臨床資料,比較甲苯胺紅不加熱血清試驗與酶聯(lián)免疫吸附法檢測在梅毒檢驗中的臨床應用價值。

2 資料與方法

2.1 一般資料

收集2018年3月—2019年5月接收的梅毒感染患者資料200 例,隨機均分為實驗組和對照組。實驗研究組男性患者56 例,女性患者44 例,年齡范圍 30~61 歲,平均年齡(44.73±11.67)歲;對照組男性患者 57 例,女性患者 43 例,年齡范圍 29~61 歲,平均年齡(45.26±10.78)歲。兩組患者在一般資料上無統(tǒng)計學意義(P>0.05),有可比性。

2.2 方法

2.2.1 檢測儀器

洗板機、全自動酶聯(lián)免疫分析儀、微量加樣器等。

2.2.2 試劑盒

深圳寶安康生物有限公司生產(chǎn)的甲苯胺紅不加熱血清試驗試劑盒、上??迫A生物工程股份有限公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫吸附試劑盒,均在有效期內(nèi)。

2.2.3 檢測方法

抽取梅毒感染者的靜脈血5 mL,放置5 min 后,分離血清并進行檢測,分別采用甲苯胺紅不加熱血清法與酶聯(lián)免疫吸附法進行梅毒檢測,檢測方法均為常規(guī)操作,操作按照試劑盒中的說明書進行。

甲苯胺紅不加熱血清法:(1)加樣:加入 50 μL 待測標本于預包被板條孔,分別設(shè)置空白對照、陽性和陰性,于 37℃中溫育 1 h;(2)加酶:加入酶標物 50 μL于 3 組中,搖勻后于 37℃中放置 0.5 h;(3)顯色:置入50 μL 底物緩沖液于各孔中,搖勻后于37℃中溫育0.5 h,并于隔孔內(nèi)加入50 μL 終止液,在全自動酶聯(lián)免疫分析儀上讀出數(shù)據(jù)并記錄。

酶聯(lián)免疫吸附法:(1)加樣:于卡片圈中均勻加入 50 μL 血清;(2)加抗原:于孔內(nèi)均勻加入 1 滴抗原液體;(3)反應:在立體脫色搖床中以 100 r/min 震蕩8 min,在亮光下觀察其結(jié)果。

2.3 統(tǒng)計學方法

兩組梅毒感染患者的觀察指標將采用SPSS16.0系統(tǒng)軟件統(tǒng)計分析。敏感性、特異性及陽性預測值為計數(shù)資料,用(n,%)表示;用 χ2檢驗,P<0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

3 結(jié)果

甲苯胺紅不加熱血清法與酶聯(lián)免疫吸附法梅毒抗體檢測結(jié)果比較結(jié)果表明,酶聯(lián)免疫吸附法檢測結(jié)果的敏感性、特異性及陽性預測值均高于甲苯胺紅不加熱血清法,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),具體內(nèi)容詳見表1。

表1 兩組檢測方法的敏感性、特異性及陽性預測值的比較

4 討論

據(jù)研究數(shù)據(jù)顯示[3],近年來,梅毒感染率始終呈上升態(tài)勢,且上升速度也逐年增長,其中也包括地區(qū)獻血人群的梅毒檢出率。梅毒感染的病原體是梅毒螺旋體,梅毒螺旋體侵襲機體后會產(chǎn)生一種非特異性抗體,此非特異性抗體臨床上檢出難度較高,通常在梅毒晚期可以檢出,有時會出現(xiàn)陰性結(jié)果,造成漏診的現(xiàn)象。至今臨床檢查中將特異性抗體作為感染梅毒的主要依據(jù),就是由于梅毒螺旋體的特異性抗體出現(xiàn)時間早而消失較晚。截止到目前,臨床上主要的梅毒檢測方法是甲苯胺紅不加熱血清法與酶聯(lián)免疫吸附法[4],甲苯胺紅不加熱血清法操作起來方便快捷,檢查費用低,但易受主觀因素影響;酶聯(lián)免疫吸附方法是對血清中的特異性抗體進行一系列檢測,決定結(jié)果的數(shù)據(jù)來自全自動酶聯(lián)免疫分析儀,能最大幅度降低主觀性判斷的誤差,檢出率相對精確。

綜上可知,酶聯(lián)免疫吸附法的篩查精準度高于甲苯胺紅不加熱血清法,臨床應用價值更高。使用酶聯(lián)免疫吸附法來檢測梅毒感染患者[5],可以將血清中梅毒抗體免疫球蛋白一并檢測。先使用甲苯胺紅不加熱血清法作為初篩,再采用準確度高的酶聯(lián)免疫吸附方法作進一步檢查,可有效提高梅毒陽性檢出率,同時能檢測出梅毒抗體是否呈陽性,有效預防篩查過程中的誤診漏診,充分發(fā)揮梅毒檢測的意義,提高梅毒的檢出率,值得作進一步臨床推廣。

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