范 維,高曉月,李賀楠,郭文萍,陳淑敏,孫 勇,李瑩瑩*
(中國(guó)肉類(lèi)食品綜合研究中心,北京食品科學(xué)研究院,北京 100068)
抗生素作為一種殺菌或抑菌藥物,在養(yǎng)殖、臨床、農(nóng)業(yè)等方面得到廣泛應(yīng)用,但濫用會(huì)導(dǎo)致其殘留于動(dòng)物體內(nèi),通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體,影響人類(lèi)疾病治療與康復(fù),甚至引起嚴(yán)重的食品安全和出口貿(mào)易問(wèn)題[1-4]。當(dāng)前,我國(guó)畜禽養(yǎng)殖業(yè)主要使用的抗生素包括四環(huán)素類(lèi)、氨基糖苷類(lèi)、β-內(nèi)酰胺類(lèi)及大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)等[5-6],為了增強(qiáng)抗生素療效,縮短療程,減少細(xì)菌耐藥性,現(xiàn)經(jīng)常把不同類(lèi)抗生素進(jìn)行配伍使用,這無(wú)形中加大了抗生素殘留檢測(cè)難度,預(yù)示著高通量的檢測(cè)方法將成為未來(lái)檢測(cè)發(fā)展趨勢(shì)。目前,抗生素殘留檢測(cè)方法主要有色譜法[7-8]、微生物法[9]和免疫分析法[10]等,其中色譜法較為常用,可以進(jìn)行定性定量檢測(cè),結(jié)果靈敏準(zhǔn)確,但設(shè)備投入大,不同類(lèi)別抗生素前處理和檢測(cè)條件不同,很難做到聯(lián)合檢測(cè)[11-12];免疫分析法雖靈敏度高,但是檢測(cè)成本昂貴,只能檢測(cè)單一類(lèi)抗生素[13],不易于高通量;相較于前兩種方法,微生物法是抗生素殘留檢測(cè)最早采用的方法,其成本低廉、操作簡(jiǎn)單、具有廣譜性,可作為一種高通量抗生素初篩方法在中小型食品企業(yè)得到普及。
目前已有的微生物法多用于牛奶中抗生素殘留檢測(cè),在禽畜肉中應(yīng)用較少,這主要是由于禽畜肉基質(zhì)較為復(fù)雜,抗生素提取存在難度[14]。而對(duì)于微生物顯色法試劑盒的開(kāi)發(fā),由于微生物本身活性受外界因素影響較大,且這種活性需要活化傳代維持,因此如何能在保障其活性的前提下,將其進(jìn)行保存和運(yùn)輸,并且不影響顯色反應(yīng),是目前制約其研制的技術(shù)難點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)合前期的研究成果[15],在確定了適用于禽畜肉中抗生素提取方法以及檢測(cè)液配方的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步克服了因菌種活化傳代耗時(shí)較長(zhǎng)及液體菌種無(wú)法運(yùn)輸?shù)葐?wèn)題,開(kāi)發(fā)出一種可檢測(cè)動(dòng)物源性食品中抗生素殘留的高通量微生物顯色初篩試劑盒,并對(duì)試劑盒的各方面性能加以驗(yàn)證。
1.1.1 樣品與菌種
禽畜肉購(gòu)自超市或農(nóng)貿(mào)批發(fā)市場(chǎng)。嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillus sterothermophilus CICC 10392) 食品安全菌種保藏中心。
1.1.2 試劑
β-內(nèi)酰胺類(lèi):阿莫西林、氨芐西林、青霉素G、青霉素V、氯唑西林、乙氧萘青霉素、雙氯青霉素、水合氨芐青霉素;四環(huán)素類(lèi):四環(huán)素、土霉素、金霉素、強(qiáng)力霉素;氨基糖苷類(lèi):慶大霉素、鏈霉素、新霉素、安普霉素、丁胺卡那霉素;大環(huán)內(nèi)酯類(lèi):紅霉素、羅紅霉素、泰樂(lè)霉素標(biāo)準(zhǔn)品 德國(guó)Dr. Ehrenstorfer公司;營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)培養(yǎng)基、腦心浸液肉湯(BHI)培養(yǎng)基、溴鉀酚紫葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基、蛋白胨、牛肉浸膏、葡萄糖、溴甲酚紫 北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司;海藻酸鈉、明膠、卡拉膠、聚乙烯醇、二醋酸纖維素、硼酸、氯化鈣、磷酸氫二鈉均為分析純。
抗生素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:將氨基糖苷類(lèi)和β-內(nèi)酰胺類(lèi)各抗生素標(biāo)準(zhǔn)品分別用去離子水溶解并定容至100 μg/mL,-20 ℃避光可保存1 個(gè)月;將大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)和四環(huán)素類(lèi)各抗生素標(biāo)品分別用甲醇溶解并定容至100 μg/mL,-18 ℃避光可保存12 個(gè)月以上。
檢測(cè)液:蛋白胨10.0 g、牛肉浸膏3.0 g、葡萄糖10.0 g、NaCl 5.0 g、溴甲酚紫指示劑0.04 g、蒸餾水定容至1 000 mL,pH值調(diào)至7.0,121 ℃高壓滅菌10 min[15]。
FC酶標(biāo)儀 芬蘭雷勃儀器有限公司;DHP-9272恒溫培養(yǎng)箱 上海一恒科學(xué)儀器有限公司;UltiMate3000-TSQ QUANTUM ULTRA液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(配有電噴霧離子源) 美國(guó)Thermo公司;1200-6410液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(配有電噴霧離子源)、1260高效液相色譜(配有可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器) 美國(guó)安捷倫公司;TD4離心機(jī) 鑫港儀器有限公司;PHS-3C pH計(jì) 上海雷磁儀器有限公司。
1.3.1 菌懸液制備
在無(wú)菌狀態(tài)下,從NA培養(yǎng)基上挑取已活化好的株菌,接入BHI培養(yǎng)基中,充分振蕩,以3 000 r/min離心5 min,棄去上清液,向離心管中重新加入BHI培養(yǎng)基,如此反復(fù)離心洗滌3 次后,用BHI培養(yǎng)基充分溶解沉淀,根據(jù)波長(zhǎng)為600 nm處的吸光度,制備一定濃度的菌懸液。
1.3.2 菌種微膠囊包埋方法確定
1.3.2.1 菌種包埋方法選擇
分別采用海藻酸鈉法[16]、明膠法[16]、卡拉膠法[16]、二醋酸纖維素法[17]及聚乙烯醇法[17]對(duì)一定濃度的指示菌進(jìn)行包埋,通過(guò)對(duì)包埋小球進(jìn)行包埋操作難易程度分析、機(jī)械強(qiáng)度及菌種成活率測(cè)試,選取適合微生物顯色法的包埋方法。
1.3.2.2 菌種包埋條件優(yōu)化
配制10 mL溴鉀酚紫葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基,向其中加入一定量的聚乙烯醇,使其質(zhì)量濃度分別為0.08、0.1、1.2 g/mL攪拌混勻,于121 ℃滅菌10 min。待冷卻至40 ℃后,向上述溶液中分別加入10 mL初始吸光度(A600nm)為0.5、0.8、1.0、1.2的指示菌懸液,混合均勻,用6號(hào)針頭緩慢滴入pH值分別為5.2、6.0、6.8、7.5的硼酸-磷酸鹽溶液中,于4 ℃靜置1 h,抽濾出包埋顆粒,用生理鹽水洗凈,密封4 ℃保存、備用。通過(guò)對(duì)包埋小球進(jìn)行機(jī)械強(qiáng)度、菌種成活率、抗生素敏感性及反應(yīng)時(shí)間測(cè)試,確定最佳包埋條件。
1.3.2.3 機(jī)械強(qiáng)度測(cè)試
兩塊載玻片之間放置粒徑相近的包埋小球,在上面的載玻片上加100 g砝碼,觀(guān)察小球外形有無(wú)變化,用裂痕和壓碎程度表征小球的機(jī)械強(qiáng)度。
1.3.2.4 菌種成活率測(cè)試
將4 ℃保存1 周的包埋菌株放到150 μL檢測(cè)液中,每菌株設(shè)置25 個(gè)平行,于62 ℃恒溫培養(yǎng),4 h內(nèi)使檢測(cè)液變黃的即為成活,對(duì)比觀(guān)察不同包埋條件菌種的成活情況,計(jì)算成活率。
1.3.2.5 抗生素敏感性實(shí)驗(yàn)
向96 微孔板中依次分別加入150 μL檢測(cè)液,50 μL菌懸液(或一顆包埋菌株顆粒)和100 μL 0.1 μg/mL的抗生素標(biāo)準(zhǔn)溶液,于62 ℃培養(yǎng),觀(guān)察檢測(cè)液變色情況及反應(yīng)時(shí)間。
1.3.3 樣品前處理
1.3.3.1 具體操作[15]
稱(chēng)取均質(zhì)好的10 g肌肉(瘦肉)樣品置于50 mL離心管中,加入10 mL pH 7.4的磷酸鈉緩沖溶液,旋渦1 min,密封置100 ℃沸水浴中加熱5 min,10 000 r/min離心3 min,上清液即為樣品提取液。
1.3.3.2 方法驗(yàn)證
以四環(huán)素為例,分別向豬、牛、羊、雞、鴨的肌肉(瘦肉)樣品中注射不同濃度的四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)溶液,每組進(jìn)行3 個(gè)平行,按1.3.3.1節(jié)的操作進(jìn)行樣品前處理,之后將樣品提取液進(jìn)行色譜測(cè)定,確定該前處理方法的提取效率,并將各樣品提取液進(jìn)行微生物顯色法驗(yàn)證,確定檢測(cè)效果。
1.3.4 試劑盒操作及結(jié)果判定
根據(jù)樣品數(shù)量取出已固定有指示菌包埋顆粒的微孔,依次向每孔中加入檢測(cè)液150 μL,陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、空白對(duì)照及樣品提取液各200 μL,對(duì)照組和樣品組各取3 個(gè)平行。于62 ℃恒溫培養(yǎng)至陰性對(duì)照變成黃色,觀(guān)察其他孔顏色變化。其中陽(yáng)性對(duì)照為抗生素標(biāo)準(zhǔn)溶液;陰性對(duì)照為無(wú)抗生素殘留的肌肉(瘦肉)提取液;空白對(duì)照為0.85%生理鹽水。結(jié)果判定:樣品孔檢測(cè)液呈黃色為陰性(-),紫色為陽(yáng)性(+)。
1.3.5 試劑盒檢出限確定
1.3.5.1 單標(biāo)抗生素檢出限
用去離子水將20 種抗生素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)迷噭┖羞M(jìn)行檢測(cè),確定各單標(biāo)抗生素的檢出限。
1.3.5.2 配伍抗生素檢出限
對(duì)常配伍使用的四環(huán)素類(lèi)和氨基糖苷類(lèi)抗生素、β-內(nèi)酰胺類(lèi)和氨基糖苷類(lèi)抗生素進(jìn)行混合,配伍方案及系列梯度中各抗生素終質(zhì)量濃度見(jiàn)表1。用試劑盒對(duì)混合抗生素梯度進(jìn)行檢測(cè),確定混合抗生素的檢出限。
表1 抗生素配伍方案及系列梯度Table 1 Antibiotic combinations with concentration gradients
1.3.6 試劑盒穩(wěn)定性
試劑盒密封好后于4 ℃保存1、3、5、10、15、18、20 d,用單標(biāo)抗生素稀釋梯度進(jìn)行檢出限和反應(yīng)時(shí)間驗(yàn)證,確定試劑盒最佳使用期限。
1.3.7 試劑盒的評(píng)價(jià)
從不同市場(chǎng)分別購(gòu)進(jìn)豬肉20 份、牛肉15 份、羊肉15 份、雞肉10 份、鴨肉10 份,共計(jì)70 份,分別用序號(hào)1~70標(biāo)識(shí),為保證有一定的陽(yáng)性檢出率,對(duì)一部分購(gòu)買(mǎi)樣品進(jìn)行人工添加。
用本實(shí)驗(yàn)研制的試劑盒對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè),之后用色譜法進(jìn)行驗(yàn)證。大環(huán)內(nèi)酯類(lèi):參照SN/T 1777.2—2007《動(dòng)物源性食品中大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素殘留測(cè)定方法》[18]進(jìn)行檢測(cè);四環(huán)素類(lèi)和氨基糖苷類(lèi):分別參照GB/T 21317—2007《動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類(lèi)獸藥殘留量檢測(cè)方法》[19]和GB/T 21323—2007《動(dòng)物組織中氨基糖苷類(lèi)藥物殘留量的測(cè)定》[20]方法進(jìn)行檢測(cè);β-內(nèi)酰胺類(lèi):參照SN/T 2050—2008《進(jìn)出口動(dòng)物源食品中14 種β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素殘留量檢測(cè)方法》[21]和GB 29682—2013《水產(chǎn)品中青霉素類(lèi)藥物多殘留的測(cè)定》[22]方法進(jìn)行測(cè)定。
從表2可知,雖然明膠和卡拉膠的菌株成活率較高,但兩者機(jī)械強(qiáng)度較低,顆粒易破碎使得被包埋細(xì)胞泄出,并且明膠在切塊時(shí)易黏連,不易操作,且通過(guò)后期顯色實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),這兩種載體存在顯色不均的情況,因此這兩種材料不適合作顯色反應(yīng)的載體。采用醋酸纖維素作包埋載體,雖然顆粒機(jī)械強(qiáng)度高,但成活率極低,其原因可能是醋酸纖維素中添加的丙酮對(duì)菌株細(xì)胞傷害較大[23],故也不適合作包埋載體。采用海藻酸鈉作載體,成球容易,菌株成活率高,但通過(guò)后期進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),海藻酸鈉化學(xué)穩(wěn)定性差,與肉提取液(磷酸鹽緩沖液)混合極不穩(wěn)定,易吸脹破裂,影響顯色反應(yīng)。因此,選擇聚乙烯醇作為包埋載體,其菌株成活率達(dá)到80%,機(jī)械強(qiáng)度高,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,抗微生物分解性能強(qiáng),且易操作[17]。
表2 不同包埋方法的難易程度及表觀(guān)特征Table 2 Difficulty and apparent characteristics of different embedding methods
對(duì)現(xiàn)有的聚乙烯醇-硼酸包埋法進(jìn)行改進(jìn),改用硼酸-磷酸鹽溶液作為交聯(lián)劑,并對(duì)相關(guān)條件進(jìn)行優(yōu)化。從表3可知,當(dāng)聚乙烯醇質(zhì)量濃度為0.1 g/mL時(shí),成球效果最佳。
表3 聚乙烯醇質(zhì)量濃度對(duì)包埋效果的影響Table 3 Effect of polyvinyl alcohol concentration on embedding efficiency
表4 交聯(lián)劑pH值對(duì)包埋及檢測(cè)效果的影響Table 4 Effect of pH value of cross-linking agent on the efficiency of embedding and detection
交聯(lián)劑pH值對(duì)包埋及檢測(cè)效果影響情況見(jiàn)表4。將交聯(lián)劑改為硼酸-磷酸鹽是因?yàn)榕鹚嶙陨矶拘砸约疤峁┑乃嵝原h(huán)境會(huì)降低菌種活性,加入磷酸鹽,一方面可以縮短在硼酸中的交聯(lián)時(shí)間減少毒性,另一方面可以改善pH值,為菌種提供適宜生存條件,提高菌種存活率[24]。從表4可知,當(dāng)pH值較低時(shí),成球形狀不規(guī)則,小球自身低pH值會(huì)使檢測(cè)液中的指示劑變色,影響顯色反應(yīng),且過(guò)酸會(huì)降低指示菌成活率;而當(dāng)交聯(lián)劑pH值較高時(shí),小球加入到檢測(cè)液后會(huì)升高其pH值,從而延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間。因此,選擇pH 6.0的硼酸-磷酸鹽溶液作為交聯(lián)劑。
表5 菌種初始A600 nm對(duì)檢測(cè)效果的影響Table 5 Effect of initial bacterial suspension concentration on detection efficiency
從表5可知,當(dāng)菌種初始A600nm為0.5時(shí),抗生素對(duì)菌株的抑制效果較好,但由于菌株濃度較低,導(dǎo)致反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)且存活率較低;當(dāng)菌懸液初始吸光度較高時(shí),抗生素對(duì)菌的抑制效果不明顯,反應(yīng)終點(diǎn)時(shí)檢測(cè)液變?yōu)辄S色,達(dá)不到檢測(cè)目的。因此,選擇初始A600nm為0.8的指示菌進(jìn)行包埋。
從表6可知,該提取方法對(duì)不同肌肉(瘦肉)樣品中抗生素殘留提取率為79.8%~88.1%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.5%~5.2%。進(jìn)一步對(duì)各提取液的檢測(cè)效果進(jìn)行驗(yàn)證發(fā)現(xiàn),經(jīng)加熱沉淀蛋白后,鴨、雞、豬肉樣品的提取液呈現(xiàn)無(wú)色,離心后較為澄清,而牛、羊肉樣品的上清液呈微紅色,但只要其中抗生素殘留超過(guò)微生物法檢出限,不會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響。
表6 不同樣品提取效率及顯色效果Table 6 Efficiency of extraction and color development of different samples
按1.3.5節(jié)方法進(jìn)行檢測(cè),檢出限效果見(jiàn)圖1,以顏色未發(fā)生變化的標(biāo)準(zhǔn)液質(zhì)量濃度為該抗生素的最小檢測(cè)質(zhì)量濃度。
圖1 檢出限效果圖Fig. 1 No color change occurred at the detection limit
表7 單標(biāo)抗生素檢出限量Table 7 Detection limits for single antibiotics
從表7可知,本試劑盒各類(lèi)抗生素的檢出限均小于我國(guó)農(nóng)業(yè)部規(guī)定的動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量[25],其中對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)和四環(huán)素類(lèi)抗生素較為敏感,檢出限分別為20~40、40~60 μg/kg,這與謝莉等[26]研究的用嗜熱脂肪芽孢桿菌檢測(cè)牛奶中抗生素殘留結(jié)果相似。相較于色譜法,該試劑盒檢出限更接近最大殘留限量,因此本試劑盒初篩呈陽(yáng)性的樣品更有可能是不合格樣品,之后將這些陽(yáng)性樣品用色譜法進(jìn)行復(fù)測(cè),可以節(jié)約時(shí)間和成本。并且有時(shí)企業(yè)并不需要太精準(zhǔn)的數(shù)值,只需檢測(cè)購(gòu)入的原料肉中抗生素殘留是否合格,對(duì)靈敏度無(wú)過(guò)高要求,以免成本提高造成浪費(fèi)。
表8 配伍抗生素檢出限Table 8 Detection limits for antibiotic combinations
從表8可知,該試劑盒對(duì)常配伍使用的抗生素也能進(jìn)行檢測(cè),且檢出限均較單標(biāo)低,說(shuō)明四環(huán)素類(lèi)和氨基糖苷類(lèi)抗生素、β-內(nèi)酰胺類(lèi)和氨基糖苷類(lèi)抗生素聯(lián)合使用對(duì)指示菌抑制效果增強(qiáng),具有協(xié)同作用,這與李娟[27]對(duì)氨基糖苷類(lèi)抗生素配伍禁忌研究結(jié)果一致。
將試劑盒于4 ℃保存,每間隔一定時(shí)間用慶大霉素、四環(huán)素進(jìn)行反應(yīng)時(shí)間和檢出限驗(yàn)證,結(jié)果見(jiàn)表9。隨著保存時(shí)間延長(zhǎng),反應(yīng)時(shí)間和檢出限均受到影響,這是由于菌體自身處于一個(gè)衰減的過(guò)程,隨保存時(shí)間延長(zhǎng)菌體數(shù)量和活性都會(huì)隨之降低造成的,而15 d內(nèi)試劑盒的反應(yīng)時(shí)間和檢出限均可保持穩(wěn)定狀態(tài),因此,該試劑盒的最佳使用期限為15 d。
表9 試劑盒穩(wěn)定性Table 9 Stability of the kit
表10 微生物法與色譜法樣品檢測(cè)結(jié)果Table 10 Results obtained on samples using the kit and chromatography
將70 個(gè)樣品進(jìn)行試劑盒檢驗(yàn),之后用色譜法進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果見(jiàn)表10。試劑盒檢測(cè)共有24 個(gè)樣品呈陽(yáng)性,經(jīng)色譜法驗(yàn)證,其中18 個(gè)陽(yáng)性樣品含有以上添加的抗生素殘留,其余6 個(gè)為假陽(yáng)性樣品,據(jù)研究[28-29]嗜熱脂肪芽孢桿菌除對(duì)抗生素敏感外,對(duì)磺胺類(lèi)、糖肽類(lèi)等藥物也有較高的敏感性,因此6 個(gè)假陽(yáng)性樣品存在含有其他抗生素的可能。而試劑盒檢測(cè)呈陰性的46 個(gè)樣品,經(jīng)色譜法驗(yàn)證,沒(méi)有測(cè)出本實(shí)驗(yàn)規(guī)定的藥物殘留,說(shuō)明該試劑盒結(jié)果可靠,雖存在一定的假陽(yáng)性結(jié)果,但只要抗生素殘留量超過(guò)其方法檢出限,無(wú)假陰性結(jié)果存在。
本研究以樣品中抗生素殘留影響菌種生長(zhǎng)產(chǎn)酸,從而使檢測(cè)液中指示劑顏色發(fā)生變化為原理,選用具有廣譜敏感性的嗜熱脂肪芽孢桿菌作為指示菌,并將其微膠囊包埋固定于96 微孔板中,克服了因菌種活化傳代耗時(shí)較長(zhǎng)及液體菌種無(wú)法運(yùn)輸?shù)葐?wèn)題,研制了檢測(cè)動(dòng)物源性食品中抗生素殘留的高通量初篩試劑盒。為了提高試劑盒的靈敏度和穩(wěn)定性,本實(shí)驗(yàn)分析對(duì)比不同包埋方法,并對(duì)菌種包埋濃度、包埋劑添加量及交聯(lián)劑pH值進(jìn)行了優(yōu)化。該試劑盒對(duì)禽畜肉中常見(jiàn)的β-內(nèi)酰氨類(lèi)、四環(huán)素、氨基糖苷類(lèi)、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素藥物無(wú)論是單獨(dú)使用還是配伍使用都具有較好的檢測(cè)靈敏度,在15 d的保存期內(nèi),具有較好的檢測(cè)穩(wěn)定性。該試劑盒操作簡(jiǎn)便、快捷,包括前處理在內(nèi)4~5 h即可完成檢測(cè),結(jié)果肉眼可辨別,無(wú)需借助大型儀器。采用可獨(dú)立拆分的微孔板,可根據(jù)樣品數(shù)隨意調(diào)節(jié),做到用同一前處理方法、同一檢測(cè)體系對(duì)不同樣品、不同抗生素的高通量檢測(cè)。用色譜法對(duì)試劑盒篩檢出的46 個(gè)陰性樣品進(jìn)行驗(yàn)證,均無(wú)抗生素藥物殘留,說(shuō)明該試劑盒結(jié)果可靠,無(wú)假陰性存在。因此可以采用該試劑盒進(jìn)行篩檢,再以色譜法對(duì)呈陽(yáng)性的樣品進(jìn)行復(fù)測(cè),以便減少成本和提高效率,這將在食品企業(yè)及一般檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室具有良好的推廣前景。