袁宗偉，陳 詔，徐鴻飛，盧飛麟，楊賓蘭，滕 云，溫守歐

(廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)引育種中心，廣西 南寧 530031)

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.2 試驗(yàn)方法

表1 不同處理蘇氏圓腹人工催產(chǎn)催產(chǎn)素的使用劑量Table 1 Different artificial oxytocin doses for P.sutchi

1.2.3 魚苗孵化與出池管理 人工授精后，將粘附受精卵的網(wǎng)片(布卵密度為1萬～5萬粒/m2)均勻攤布于規(guī)格為3.0 m×5.0 m×1.0 m的育苗池中。固定網(wǎng)片通過懸掛與池底成一定角度，孵化期間通過水位管調(diào)控水位，保持池水深度30～40 cm，每個(gè)育苗池中布置氣石6～8只以保證溶氧，整個(gè)孵化過程采用微流水孵化，出苗前加大換水量。

當(dāng)胚胎發(fā)育至原腸中期(受精6～8 h)時(shí)，從附著受精卵的網(wǎng)片上隨機(jī)剪取 3 cm×3 cm的網(wǎng)布放入白瓷盆中檢查，將壞卵和空心卵剔除計(jì)數(shù)后統(tǒng)計(jì)已受精卵數(shù)，并計(jì)算受精率(已受精卵數(shù)占總卵數(shù)的百分比)。魚苗孵出后計(jì)算孵化率(為孵出魚苗數(shù)占受精卵的百分比)，出膜完畢后立即下塘，孵化魚苗按親本配對分開培育(不區(qū)分人工授精方法)，培育40～45 d后出池銷售，統(tǒng)計(jì)苗種成活率(為培育40～45 d出池苗數(shù)占下塘魚苗數(shù)的百分比)。

1.2.4 胚胎發(fā)育及胚后發(fā)育觀察 黑色♂×粉色♀雜交子代受精卵受精后，每次均用羽毛隨機(jī)從網(wǎng)片上刮取100粒受精卵，采用Miotic168KL解剖鏡及Miotic200攝像系統(tǒng)進(jìn)行連續(xù)觀察和拍攝，受精后至原腸胚期每隔10～15 min觀察1次，原腸胚期至出膜期間隔1～2 h觀察1次，詳細(xì)記錄各發(fā)育時(shí)期的重要形態(tài)特征，并用Photoshop 7.0處理圖片。

2 結(jié)果與分析

2.1 催產(chǎn)素不同劑量的催產(chǎn)與孵化效果

人工催產(chǎn)后按照親魚產(chǎn)卵情況分為全產(chǎn)、半產(chǎn)和未產(chǎn)。全產(chǎn)指人工授精后魚體腹部已干癟，擠壓腹部無卵子流出；半產(chǎn)指人工授精后魚體腹部半癟，但擠壓腹部仍有部分卵子流出；未產(chǎn)指人工授精后魚體腹部仍膨大，但擠壓腹部不能擠出卵子。從表2可知道，僅使用DOM+LHRH-A2催產(chǎn)的親魚沒有產(chǎn)卵，使用DOM+LHRH-A2+HCG混合后注射可以獲得較好的催產(chǎn)效果；第2次注射后8～12 h內(nèi)進(jìn)行人工授精均能受精和孵化。其中，以(DOM 8 mg+LHRH-A210 μg+HCG 800 IU)/kg的催產(chǎn)效果最佳，最佳人工授精時(shí)間(效應(yīng)時(shí)間)為第2次注射后8～10 h，受精率、孵化率分別達(dá)95.3%和83.5%。

2.2 不同人工授精方法的孵化效果

2.3 不同體色親魚所產(chǎn)苗種的成活率

2.4 胚胎發(fā)育及胚后發(fā)育特征

表2 蘇氏圓腹的催產(chǎn)與孵化效果Table 2 Oxytocin and hatching effects of P.sutchi

表3 不同人工授精方法蘇氏圓腹的孵化效果Table 3 Hatching effects of different artificial insemination methods on P.sutchi

表4 不同體色蘇氏圓腹所產(chǎn)苗種的出池成活率Table 4 Out-pond survival rate of fries produced by P.sutchi with different body color

表5 28℃條件下蘇氏圓腹胚胎發(fā)育時(shí)序及主要特征Table 5 Embryonic development time and major characters of P.sutchi at 28℃

注：1，受精卵；2，受精15 min；3，分裂前；4，2細(xì)胞；5，4細(xì)胞；6，8細(xì)胞；7，16細(xì)胞；8，32細(xì)胞；9，64細(xì)胞；10，128細(xì)胞；11，多細(xì)胞；12，囊胚早期；13，囊胚晚期；14，原腸早期；15，原腸中期；16，原腸晚期；17，神經(jīng)胚期；18，胚孔封閉；19，體節(jié)出現(xiàn)；20，眼基出現(xiàn)；21，眼囊期；22，尾芽期；23，耳囊期；24，晶體出現(xiàn)；25，心臟搏動(dòng)；26，孵出前期；27，破膜；28，剛出膜；29，孵出1 d；30，孵出3 d。

圖1黑色♂×粉色♀雜交子代的胚胎發(fā)育過程
Fig.1 Embryonic development process of black ♂×pink ♀ hybrid progenies

2.4.2 仔魚期 剛出膜的仔魚苗身體無色透明，腹部卵黃囊較大，占其身體的1/2以上(圖1-28)，此時(shí)魚苗的游泳能力弱，貼附在網(wǎng)片或其他物體上，偶作間歇上下運(yùn)動(dòng)，大多數(shù)棲于池底，部分隨氣石充氣形成的水流翻滾，體長3.0 mm左右；10～12 h后活力增加，尾鰭由圓弧形逐漸向上尾形發(fā)育，心臟搏動(dòng)加強(qiáng)，上下頜形成并可活動(dòng)，體長4.0 mm以上，偶作平游運(yùn)動(dòng)；24 h后，在頜部左右長出長短各一的須2對，并不斷生長，長須可至消化道末端，卵黃囊縮小，此時(shí)體長5.1 mm(圖1-29)；2 d后，身體伸長，達(dá)6.0 mm，可長時(shí)間作平游運(yùn)動(dòng)，胃囊、腸道、鰓等器官基本發(fā)育成形，上下頜各長出一排尖齒，尾鰭在中部出現(xiàn)分叉，卵黃幾近吸收完。

2.4.3 稚魚期 2.5～3 d后消化道貫通，仔魚開口攝食，口裂達(dá)230 μm，上下頜不斷咬合，色素逐漸出現(xiàn)，在消化道后端和肛門之間出現(xiàn)紅色斑塊(圖1-30)；4 d后，尾鰭由上尾向正尾轉(zhuǎn)變，背鰭和腹鰭開始生成；9～10 d稚魚達(dá)15 mm，此時(shí)可見鰾點(diǎn)，尾鰭轉(zhuǎn)變成正尾，體色素明顯可辨；各器官逐漸發(fā)育完全。

3 結(jié)論與討論

3.1 催產(chǎn)素不同劑量及效應(yīng)時(shí)間對蘇氏圓腹催產(chǎn)效果的影響

3.2 不同人工授精方法對蘇氏圓腹受精率的影響

3.3 不同體色雜交蘇氏圓腹的受精卵、胚胎發(fā)育及仔稚魚發(fā)育特性