藺曉月 馬慧玲 陳 靜 王苗利 張 月 孫圣福

（山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心 山東 濟(jì)南 250022）

為了解牛傳染性鼻氣管炎在山東省的規(guī)?；?chǎng)的流行情況，本研究采用ELISA方法對(duì)山東省的24個(gè)牛場(chǎng)的707份牛血清進(jìn)行牛傳染性鼻氣管炎血清學(xué)調(diào)查。結(jié)果顯示，24個(gè)牛場(chǎng)中17個(gè)牛場(chǎng)存在牛傳染性鼻氣管炎抗體陽(yáng)性，場(chǎng)群陽(yáng)性率為70.83%，205份樣品為陽(yáng)性，個(gè)體陽(yáng)性率為29%。表明牛傳染性鼻氣管炎在山東省被調(diào)查場(chǎng)中內(nèi)普遍流行。此調(diào)查結(jié)果為山東省牛傳染性鼻氣管炎的流行病學(xué)研究提供了數(shù)據(jù)基礎(chǔ)，為防控牛傳染性鼻氣管炎提供科學(xué)依據(jù)。

牛傳染性鼻氣管炎是由牛傳染性鼻氣管炎病毒(Infectious Bovine rhinotracheitis virus，IBRV)引起的一種牛的急性接觸性傳染病，主要以呼吸困難、發(fā)熱、鼻炎、鼻竇炎、喉炎以及氣管炎為主要臨床癥狀，母牛還表現(xiàn)為膿皰性外陰道炎[1]。犢牛感染IBRV常因并發(fā)細(xì)菌性肺炎或腸炎而死亡，死亡率為85%～100%[2]。IBRV對(duì)成年牛的致死率較低，但該病毒可以潛伏于動(dòng)物機(jī)體的三叉神經(jīng)，可使病畜長(zhǎng)期攜帶病毒，并在動(dòng)物免疫力下降或受到應(yīng)激時(shí)通過(guò)呼吸道排毒，感染牛群中的其他易感牛，給該病的防控造成極大困難。另外，公牛的精液也可攜帶IBRV，使得該病可以垂直傳播[3]。牛傳染性鼻氣管炎(IBR)1955年在美國(guó)首先被發(fā)現(xiàn)，次年首次分離到IBRV，除意大利、奧地利、挪威等少數(shù)國(guó)家已經(jīng)消滅該病外，其他國(guó)家均有該病的報(bào)道，IBR被OIE列為須通報(bào)的疫病之一，在我國(guó)被列為二類動(dòng)物疫病。1980年，我國(guó)首次在進(jìn)口的奶牛中分離到IBRV[4]，并且在奶牛、黃牛、水牛及耗牛體內(nèi)均檢測(cè)到IBRV的存在[5]。顏邦芬等[6]的調(diào)研報(bào)告顯示，全國(guó)29個(gè)省(市、自治區(qū))的IBR的陽(yáng)性率為12.1～77.8%，表明IBR在我國(guó)牛群中廣泛流行。

為初步了解IBR在山東省規(guī)模化牛場(chǎng)的流行情況，為了下一步對(duì)省內(nèi)規(guī)模牛場(chǎng)該病的流行病學(xué)調(diào)查提供數(shù)據(jù)，本研究抽查了全省的24個(gè)規(guī)?；?chǎng)的血清樣品，采用ELISA方法進(jìn)行該病的抗體檢測(cè)，以發(fā)現(xiàn)該病在這些牛場(chǎng)的感染狀況。

1 材料和方法

1.1 被檢血清 采集的血樣來(lái)自山東省6個(gè)地市的15個(gè)規(guī)模化奶牛場(chǎng)、9個(gè)規(guī)模化肉牛場(chǎng)，共計(jì)707份(奶牛血清442份，肉牛血清265份)。所采血樣經(jīng)無(wú)菌分離血清后于-20℃保存待檢，檢測(cè)前置于室溫條件下自然解凍。

1.2 主要試劑 傳染性牛鼻氣管炎病毒gE抗體檢測(cè)試劑盒，由IDEXX公司提供。

1.3 主要儀器 酶標(biāo)儀，Thermo MK3。

1.4 操作方法 按試劑盒說(shuō)明書(shū)的方法進(jìn)行。

2 結(jié)果

通過(guò)對(duì)山東省的24個(gè)規(guī)?；?chǎng)血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示：存在205頭IBRV抗體陽(yáng)性牛，個(gè)體陽(yáng)性率為29%，而場(chǎng)群陽(yáng)性率達(dá)到70.83%，并且不同的場(chǎng)陽(yáng)性率差別較大，除有7個(gè)場(chǎng)點(diǎn)未檢測(cè)到抗體外，17個(gè)陽(yáng)性場(chǎng)群陽(yáng)性率從3.33%到93.1%不等(表1)。相對(duì)于肉牛場(chǎng)，奶牛場(chǎng)IBRV抗體場(chǎng)陽(yáng)性率較高，達(dá)到80%，但兩種場(chǎng)個(gè)體陽(yáng)性率差異不大(表2)。對(duì)樣品的陽(yáng)性區(qū)域進(jìn)行分析顯示，6個(gè)地市樣品中均能檢出IBRV抗體，其中泰安和東營(yíng)的檢出率較高，均在50%以上；而濟(jì)南的檢出率最低，僅為0.83%(附圖)。

表1 規(guī)模化牛場(chǎng)牛傳染性鼻氣管炎檢測(cè)結(jié)果

表2 IBRV抗體群陰性率和個(gè)體陽(yáng)性率 （%）

附圖 山東省不同地市IBRV抗體檢測(cè)結(jié)果

3 討論

3.1 關(guān)于ELISA方法和結(jié)果分析 ELISA診斷方法是近年來(lái)血清學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中常用的方法，具有敏感性高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，在疾病監(jiān)測(cè)中而被廣泛應(yīng)用[7，8]。目前，市場(chǎng)上已有多種商品化ELISA試劑盒用于檢測(cè)IBRV gE或gB抗體。IBRV感染牛以后，可潛伏于神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)，使感染變的呈持續(xù)性、間歇性，因免疫不能有效阻止野毒感染，也不能阻止?jié)摲诓《镜某掷m(xù)性感染，因此防治該病最主要的措施就是對(duì)牛群進(jìn)行定期檢疫，控制傳染源。朱海明[9]等對(duì)我國(guó)北京、天津、山東、河南、河北、四川、云南等7個(gè)省市牛群IBRV的感染情況調(diào)查結(jié)果顯示，IBRV的平均感染率為29.45%，其中天津、山東、河南、云南等4個(gè)省市IBRV的感染率超過(guò)30%；希尼尼根[10]等報(bào)道，內(nèi)蒙古自治區(qū)IBRV的平均感染率為29.5%；石冬梅[11]等報(bào)道，河南省奶牛場(chǎng)場(chǎng)陽(yáng)性率為100%，個(gè)體陽(yáng)性率為59.29%；皮泉[12]等報(bào)道，貴州省奶牛IBRV抗體總體陽(yáng)性率為82.50%。根據(jù)此次血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，山東省被檢的24個(gè)規(guī)?；?chǎng)中，17個(gè)牛場(chǎng)存在IBRV抗體陽(yáng)性牛，群陽(yáng)性率達(dá)到70.83%，表明IBV在山東仍廣泛存在。而陽(yáng)性場(chǎng)內(nèi)個(gè)體陽(yáng)性率從3.33%～93.10%，表明該病在牛場(chǎng)內(nèi)的流行率差別較大。

3.2 從IBR得到的啟示 IBR對(duì)肉牛的肥育率，對(duì)奶牛的產(chǎn)奶量影響極大。本研究發(fā)現(xiàn)15個(gè)奶牛場(chǎng)和9個(gè)肉牛場(chǎng)，群陽(yáng)性率分別為80%和55.56%，說(shuō)明奶牛場(chǎng)IBRV的感染率較高，應(yīng)著重加強(qiáng)日常生物安全工作。鑒于本病嚴(yán)重的危害性，難以根除性，各個(gè)牛場(chǎng)在引種時(shí)應(yīng)嚴(yán)格檢疫，防止引進(jìn)陽(yáng)性牛和陰性感染牛，并及時(shí)淘汰本場(chǎng)陽(yáng)性感染牛。

3.3 IBRV差異的原因分析 本研究發(fā)現(xiàn)泰安和東營(yíng)IBRV感染率較高，應(yīng)加強(qiáng)本地區(qū)牛場(chǎng)的生物安全控制及監(jiān)測(cè)。雖然其他地市IBRV抗體檢出率較低，但由于IBRV感染具有一定的潛伏期，有些?？贵w檢測(cè)為陰性，但此時(shí)仍可能為潛伏期感染，而這種牛一旦受到應(yīng)急刺激，體內(nèi)病毒量會(huì)上升隨之抗體滴度也上升。因此，即使通過(guò)ELISA檢測(cè)IBRV抗體呈陰性，也難以斷定牛群的感染狀態(tài)。由此可見(jiàn)，在本病的監(jiān)測(cè)中，應(yīng)將病原學(xué)診斷和血清學(xué)診斷結(jié)合起來(lái)，嚴(yán)格檢疫，及時(shí)淘汰隱性感染牛，最終達(dá)到跟除IBR的目的。