文/yunzuo

采用配備DB-FastFAME Intuvo 氣相色譜柱的氣相色譜系統(tǒng)快速分離脂肪酸甲酯 // 脂肪酸甲酯 (FAME) 的分析可用于鑒定食品中的脂類組分，是食品分析中最重要的應(yīng)用之一。采用本方法實現(xiàn)快速、良好的分離效果。

對油類、脂肪和含脂食品的分析是政府實驗室、質(zhì)量控制 (QC) 實驗室或合同研究組織 (CRO) 實驗室的常見任務(wù)。測定食品中的總脂肪與反式脂肪含量時，對脂肪酸及其 FAME 衍生物的氣相色譜分析是脂肪表征的重要工具。在許多用于食品（如食用油）檢測的法規(guī)方法中，測定脂肪酸組成時都要求使用涂覆氰丙基固定相的毛細管柱對特定的順反脂肪酸異構(gòu)體進行分離。

此外，實現(xiàn)良好的 FAME 分離還需較長的氣相色譜柱（100 米）和較長的分析時間（超過 70 分鐘）。然而，這種方法分析效率較低且分析成本較高。而采用氰丙基固定相的 DB-FastFAME Intuvo 氣相色譜柱，可實現(xiàn) FAME 混合物的快速分離（包括分離一些關(guān)鍵順反異構(gòu)體），且能滿足法規(guī)方法的要求。本文簡述了采用 DB-FastFAME Intuvo 氣相色譜柱和氣相色譜系統(tǒng)快速分析FAME 混標。

表1 方法 1 的條件。

表2 方法 2 的條件。

表3 方法 3 的條件。

表4 方法 4 的條件。

表5 流路備件。

圖1 采用方法 1得到的 FAME 36 組分混合物的 GC/FID 色譜圖。

圖 2采用方法 1得到的菜籽油 FAME 混合物的典型GC/FID 色譜圖。

實驗部分

試劑與標準品

FAME 36 組分混合物（部件號 5191-4276）、C4-C24 偶數(shù)碳飽和 FAME 混合物（部件號 5191-4278）和菜籽油 FAME混合物（部件號 5191-4277）均來自安捷倫科技公司。

37 組分 FAME 混標（部件號CDAA-252795-MIX-1 mL）購自上海安譜科學(xué)儀器有限公司。

將 C4-C24偶數(shù)碳飽和 FAME混合物用己烷稀釋至 500 μg/mL。菜籽油 FAME混合物為 100 mg 凈混合物，用二氯甲烷稀釋 20 倍。

儀器

使用配備火焰離子化檢測器(FID) 的Intuvo 9000 氣相色譜儀進行分析。使用配備 5 μL 進樣針（部件號 G4513-80213）和分流/不分流進樣口的 Agilent 7693A 自動液體進樣器進樣。

實驗步驟

將標準樣品用與之相對應(yīng)的方法進行進樣分析，檢測方法如表1-表5所示。

結(jié)果與討論

FAME 36 組分混標專門為模擬多種食品樣品的脂肪酸組成而設(shè)計，可用于鑒定多種食品中的關(guān)鍵FAME。該混標中包含 C4:0至 C24:1范圍的 FAME，包括多數(shù)重要的飽和、單不飽和及多不飽和 FAME。該混標不包含以前用作內(nèi)標的一種FAME，即二十三烷酸甲酯 (C23:0)，。圖 1所示為 FAME 36 組分混合物在 20 m ×0.18 mm、0.20 μm DBFastFAME Intuvo氣相色譜柱上的分離結(jié)果，圖2所示為菜籽油按方法1進行分析的結(jié)果。該方法采用氦氣作為載氣，可在 5 分鐘內(nèi)實現(xiàn)所有化合物的分離，包括關(guān)鍵AOAC 對，R s ＞ 1.5。

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圖 4采用方法 2得到的 FAME 36 組分混合物的 GC/FID 色譜圖。

圖 5采用方法 3得到的 37 組分 FAME 混標的 GC/FID 色譜圖。

圖 6采用方法 4得到的 37 組分 FAME 混標的 GC/FID 色譜圖。

采用這種方法獲得了良好的峰形和分離度，且分析時間為 5 分鐘。采用氫氣作為載氣，可在 4 分鐘內(nèi)完全分離 C4-C24偶數(shù)碳飽和 FAME混合物和 FAME 36 組分混合物（圖3 和圖 4）。這表明使用該色譜柱可實現(xiàn)快速樣品通量，且分離度不受影響。

對于使用傳統(tǒng) 37 組分 FAME混標驗證其FAME 方法的實驗室，圖 5 展示了在 Intuvo9000 氣相色譜儀上使用 20 m × 0.18 mm、0.20μm DB-FastFAME 色譜柱得到的色譜圖。該方法采用氦氣作為載氣，在 8 分鐘內(nèi)實現(xiàn)了所有化合物的完全分離。

與預(yù)期結(jié)果一樣，采用氫氣作為載氣可加快分析速度，而分離度幾乎相同。圖 6所示的結(jié)果表明，采用氫氣作為載氣可在6.5分鐘的分析時間內(nèi)實現(xiàn) 37 組分FAME混標中所有化合物的完全分離。

結(jié)論

DB-FastFAME Intuvo 氣相色譜柱可快速、出色地分離 FAME混合物。實驗表明，采用氦氣作為載氣時，DB-FastFAME Intuvo氣相色譜柱可在 5 分鐘內(nèi)完全分離 FAME 36 組分混合物中的所有組分，包括關(guān)鍵 AOAC 對和關(guān)鍵順反脂肪酸異構(gòu)體。本實驗也表明，此方法還能實現(xiàn)菜籽油的快速分析。采用氫氣作為載氣時，這種高效的 DB-FastFAME Intuvo氣相色譜柱將運行時間縮短至 4 分鐘以內(nèi)，同時實現(xiàn)了所有化合物的基線分離。 ■