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莫沙必利用于小鼠試驗(yàn)最佳劑量篩選

2019-06-17 04:02:14陳匯鑫侯權(quán)書梁文斌呂元龍唐建華
中國獸醫(yī)雜志 2019年12期
關(guān)鍵詞:莫沙蒸餾水懸液

陳匯鑫 ,侯權(quán)書 ,梁文斌 ,呂元龍 ,唐建華

(1.重慶市梁平區(qū)畜牧漁業(yè)發(fā)展中心,重慶榮昌405200 ;2.西南大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,重慶榮昌 402460)

莫沙必利是一種高效選擇性5-HT4受體激動(dòng)劑,目前研究顯示,該藥物促胃腸動(dòng)力作用明顯且安全性較高[1],在小鼠胃腸道動(dòng)力比較試驗(yàn)中常作為陽性對照組使用,然而目前在各個(gè)試驗(yàn)中的使用劑量不盡相同,而常見的使用劑量有20 mg/kg·bw、10 mg/kg·bw、5 mg/kg·bw、1.875 mg/kg·bw,本次試驗(yàn)旨在通過常用促胃腸道動(dòng)力藥物試驗(yàn)方法來篩選莫沙必利的最佳使用劑量,為對比研究其他促胃腸動(dòng)力藥物作用大小及今后研發(fā)新型促胃腸動(dòng)力藥物后探究其作用大小提供一個(gè)可參考的莫沙必利使用劑量。

1 試驗(yàn)材料

1.1 藥品 枸櫞酸莫沙必利(新絡(luò)納,成都康弘藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司,國藥準(zhǔn)字H20031110,規(guī)格:5 mg×20 片);復(fù)方地芬諾酯片(常州康普藥業(yè)有限公司,國藥準(zhǔn)字H32022716,規(guī)格:2.5 mg 鹽酸地芬諾酯/片);阿拉伯樹脂粉(成都市科龍化工試劑廠);活性炭粉末(成都市科龍化工試劑廠)。

1.2 動(dòng)物 清潔級昆明系小鼠(由西南大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供),體重18~25 g,雌雄各半。

1.3 試劑配制 所有試劑現(xiàn)配現(xiàn)用。枸櫞酸莫沙必利混懸液:枸櫞酸莫沙必利片碾碎后精密稱量,置于容量瓶中,用水稀釋后超聲10 min,待溶液冷卻后用檸檬酸調(diào)pH 值至3.0~4.5,配制為相當(dāng)于2 mg/kg·bw、5 mg/kg·bw、10 mg/kg·bw、20 mg/kg·bw 對小鼠進(jìn)行灌胃,灌胃體積為20 mL/kg·bw;復(fù)方地芬諾酯混懸液:復(fù)方地芬諾酯片置于容量瓶中,用水稀釋后超聲10 min,配制為相當(dāng)于20 mg/kg·bw 對小鼠進(jìn)行灌胃,灌胃體積為20 mL/kg·bw;活性炭混懸液:將100 g 阿拉伯樹脂粉溶于400 mL 蒸餾水,配制25%的透明溶液,添加活性炭25 g 后邊攪拌邊煮沸3 次,室溫后定容到500 mL,4 ℃冷藏,臨用前混勻,相當(dāng)于30 mg/kg·bw 對小鼠進(jìn)行灌胃。

2 試驗(yàn)分組及方法

2.1 分組

2.1.1 小鼠糞便試驗(yàn) 60 只小鼠隨機(jī)分為6 組,模型空白組(I),藥物空白組(II),試驗(yàn)組分為2 mg/kg·bw 莫沙必利組(III),5 mg/kg·bw 莫沙必利組(IV),10 mg/kg·bw 莫沙必利組(V),20 mg/kg·bw 莫沙必利組(VI)。

2.1.2 小腸推進(jìn)試驗(yàn) 60 只小鼠隨機(jī)分為6 組,空白組(A),陽性對照組(B),試驗(yàn)組分為2 mg/kg·bw莫沙必利組(C),5 mg/kg·bw 莫沙必利組(D),10 mg/kg·bw莫沙必利組(E),20 mg/kg·bw 莫沙必利組(F)。

2.2 方法

2.2.1 小鼠糞便試驗(yàn) 60 只小鼠試驗(yàn)前16 h 禁食不禁水,均單籠飼喂,每天定時(shí)稱量小鼠體重,試驗(yàn)組及藥物空白組用復(fù)方地芬諾酯混懸液灌胃,空白組給予20 mL/kg·bw 的蒸餾水灌胃,30 min 后各組用活性炭混懸液灌胃,活性炭混懸液灌胃后正常飼喂。記錄首粒黑便時(shí)間、6 h 排便數(shù)及重量。6 h糞便情況記錄后用復(fù)方地芬諾酯混懸液及蒸餾水進(jìn)行第2 次灌胃,灌胃后禁食不禁水,并于24 h 后記錄排便量及重量。重復(fù)以上試驗(yàn)步驟,連續(xù)3 d。第4 天試驗(yàn)組灌服不同濃度的莫沙必利混懸液,藥物空白組及模型空白組灌服蒸餾水,灌胃30 min 后試驗(yàn)組及藥物空白組灌服地芬諾酯混懸液,模型空白組灌服蒸餾水,再間隔30 min 全組灌服活性炭混懸液,此后正常飼喂6 h,并記錄首粒黑便時(shí)間,6 h排便量及重量,6 h糞便情況記錄后進(jìn)行第2 次灌胃,試驗(yàn)組灌服不同濃度莫沙必利,藥物空白組及模型空白組灌服蒸餾水,灌胃30 min 后試驗(yàn)組及藥物空白組用復(fù)方地芬諾酯混懸液灌胃,模型空白組灌服蒸餾水,灌胃后禁食不禁水,并于24 h 后記錄排便量及重量。以上步驟重復(fù)2 d。

2.2.2 小腸推進(jìn)試驗(yàn) 60 只小鼠試驗(yàn)前24 h 禁食不禁水,試驗(yàn)時(shí)空白組灌服蒸餾水,陽性對照組灌服20 mg/kg·bw 地芬諾酯混懸液,試驗(yàn)組灌服不同濃度的莫沙必利混懸液。灌胃30 min 后各組灌服活性炭混懸液,灌胃20 min 后剖檢。記錄小腸全長及墨汁推進(jìn)長度,計(jì)算出墨汁推進(jìn)率(墨汁推進(jìn)率=推進(jìn)長度/小腸全長×100%)。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本文所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 公司開發(fā)的SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析處理,計(jì)量資料以()表示,采用單因素方差分析,顯著水平F=0.05。

4 結(jié)果

4.1 糞便試驗(yàn)

4.1.1 建造便秘模型 結(jié)果見表1。

4.1.2 不同濃度莫沙必利灌胃 結(jié)果見表2。

表1 建造便秘模型小鼠糞便情況

表2 莫沙必利灌胃后小鼠糞便情況

3.3 小腸推進(jìn)試驗(yàn) 結(jié)果見表3。

表3 小腸推進(jìn)率

4 分析

從以上數(shù)據(jù)可以看出,2 mg/kg·bw、5 mg/kg·bw、10 mg/kg·bw 莫沙必利對小鼠腸道動(dòng)力作用明顯,均表現(xiàn)為促進(jìn)作用,而地芬諾酯對腸道動(dòng)力也有著明顯的抑制作用。試驗(yàn)中,20 mg/kg·bw 莫沙必利組無論是糞便試驗(yàn)還是小腸推進(jìn)試驗(yàn)都表現(xiàn)為對腸道作用不明顯,其具體機(jī)制暫不明確。2 mg/kg·bw 及5 mg/kg·bw 莫沙必利在糞便試驗(yàn)中與模型空白組相比較,小鼠首粒黑便時(shí)間以及排便量均有影響,但其作用效果與10 mg/kg·bw 莫沙必利組相比卻不明顯,而且在小腸推進(jìn)試驗(yàn)中與空白組差異均表現(xiàn)為不顯著,故這兩個(gè)劑量不適用于胃腸道動(dòng)力比較試驗(yàn)。

小腸推進(jìn)率試驗(yàn)中10 mg/kg·bw 莫沙必利組與空白組比較有顯著差異(P<0.05);糞便試驗(yàn)中,10 mg/kg·bw 莫沙必利組與藥物空白組相比各項(xiàng)指標(biāo)差異均為極顯著(P<0.01),而且與模型空白組相比較除首粒黑便時(shí)間表現(xiàn)出極顯著外(P<0.01),其余指標(biāo)均表現(xiàn)為不顯著,說明莫沙必利對腸道動(dòng)力功能作用良好,同時(shí),此結(jié)果與其余劑量組相比都較有著明顯優(yōu)勢。

綜上所述,小鼠試驗(yàn)用莫沙必利劑量宜選用10 mg/kg·bw。

5 討論

莫沙必利是日本Dainippon 公司開發(fā)的第4 代胃動(dòng)力藥,1998 年12 月在日本上市,該藥物是一種高效選擇性5-HT4 受體激動(dòng)劑,通過對腸肌層5-HT4 受體的激活,加速神經(jīng)末梢對乙酰膽堿的釋放,從而促進(jìn)胃腸道生理機(jī)能[2]。在療效方面,莫沙必利的治療作用明顯優(yōu)于其他幾種促胃腸動(dòng)力藥物[3],且患者出現(xiàn)不良反應(yīng)以及復(fù)發(fā)的概率也顯著較低[4],其安全性得到廣泛認(rèn)可。

由于大眾生活方式的轉(zhuǎn)變,胃腸動(dòng)力不足已經(jīng)成為一類常見的消化道功能性疾病,然而由于機(jī)體調(diào)控方式的多樣性,目前對于引起胃腸動(dòng)力不足的機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。而此次試驗(yàn)也為今后機(jī)制的進(jìn)一步研究打下基礎(chǔ)。

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