唐彩琰

摘 要：主要介紹塞內(nèi)卡病毒的致病性證據(jù)、免疫應(yīng)答和診斷等。

關(guān)鍵詞：豬；塞內(nèi)卡病毒；水皰性疾病

3 塞內(nèi)卡病毒的致病性證據(jù)

9周齡和4月齡豬試驗(yàn)性感染當(dāng)代塞內(nèi)卡病毒毒株的結(jié)果顯示了該病毒與豬水皰病之間的關(guān)聯(lián)。在這兩項(xiàng)研究中，塞內(nèi)卡病毒的潛伏期均為4 d～5 d。在感染急性期，扁桃體是該病毒復(fù)制的主要部位之一。病毒血癥期短，持續(xù)7 d，接種后第3天血清中的塞內(nèi)卡病毒基因組拷貝可達(dá)到峰值（約1×106.5/mL），隨后病毒滴度不斷減小，直至30 d后檢測不到病毒。

塞內(nèi)卡病毒可引起豬的急性自限性水皰性疾病。接種豬在其鼻吻部、唇部和/或蹄部（尤其是在冠狀帶和/或趾間間隙）出現(xiàn)病變。試驗(yàn)性感染塞內(nèi)卡病毒的豬的其他臨床表現(xiàn)包括嗜睡、跛行和厭食。感染期間可觀察到多病灶深部潰瘍和皮膚糜爛/擦傷，最終形成陳年病變。

試驗(yàn)感染的豬僅在扁桃體、脾、淋巴結(jié)和肺上可見組織顯微鏡改變，淋巴組織有輕度到中度增生，多病灶輕度肺不張，淋巴細(xì)胞、血漿細(xì)胞和肺部巨噬細(xì)胞偶發(fā)彌漫性充血并伴有多病灶輕度血管周積聚。研究顯示塞內(nèi)卡病毒在組織中分布廣泛，在疾病感染的急性期，病毒RNA和感染性顆粒在肺、縱隔和腸系膜淋巴結(jié)、肝臟、脾臟、小腸和大腸以及扁桃體中均可檢測到?；謴?fù)期豬的不同器官（除肺、心臟和肝臟外）的塞內(nèi)卡RNA呈陽性，但在以后的感染中不能從這些組織中分離到活的病毒顆粒。

根據(jù)試驗(yàn)研究，塞內(nèi)卡病毒可持續(xù)排毒28 d。該病毒可經(jīng)口腔、鼻腔分泌物和糞便排出。排毒高峰期出現(xiàn)在豬感染后1 d～5 d，相對于鼻腔分泌物和糞便而言，口腔分泌物中的病毒量更高。此外，口腔分泌物、糞便和鼻腔分泌物分別在21 DPI（感染后天數(shù)Days Postinfection，DPI）、10 DPI和7 DPI成功分離到塞內(nèi)卡病毒的感染性顆粒。自然和試驗(yàn)性感染塞內(nèi)卡病毒的結(jié)果表明，感染了塞內(nèi)卡病毒的豬的口腔/鼻腔分泌物、糞便以及尿液都可能會通過使用相同設(shè)施的豬之間的接觸直接傳播病毒，或通過病毒污染環(huán)境間接傳播。然而，我們還需要進(jìn)一步研究來證實(shí)這些分泌物/排泄物在田間條件下對塞內(nèi)卡病毒傳播的作用。

4 對塞內(nèi)卡病毒的免疫應(yīng)答

目前，只有少數(shù)研究評價(jià)了宿主對塞內(nèi)卡病毒感染的免疫應(yīng)答。這些研究表明，田間條件下受感染和未受感染的母豬以及長期接受試驗(yàn)挑戰(zhàn)的育肥豬，塞內(nèi)卡病毒感染可誘導(dǎo)早期免疫反應(yīng)。無論疾病的臨床表現(xiàn)如何，塞內(nèi)卡病毒感染后約5 d就可發(fā)生血清轉(zhuǎn)化。隨著中和抗體滴度增加，疾病的嚴(yán)重程度、組織病毒載量、病毒血癥和病毒脫落降低，這表明抗體反應(yīng)可從體循環(huán)和大多數(shù)器官、排泄物和分泌物中逐漸清除塞內(nèi)卡病毒。

塞內(nèi)卡病毒特異性免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）抗體的最大濃度持續(xù)約10 d（從5 DPI到15 DPI），隨后血清IgM濃度從21 DPI下降到無法檢測的滴度。相比之下，塞內(nèi)卡病毒特異性IgG應(yīng)答出現(xiàn)較晚，21 DPI后有強(qiáng)積極應(yīng)答。

自然感染塞內(nèi)卡病毒的豬其病毒抗體滴度不同，間接熒光抗體（Indirect Flurescent Antibody，IFA）試驗(yàn)或病毒中和（Virus Neutralization，VN）試驗(yàn)檢測到的滴度在160～2 880之間，但巴西臨床感染動物的VN試驗(yàn)可檢測到更高的滴度（≥4 096）。

5 塞內(nèi)卡病毒診斷

目前許多診斷測試可用于檢測塞內(nèi)卡病毒感染和/或其與病變和疾病的關(guān)聯(lián)。除新一代測序技術(shù)（Next-generation Sequencing，NGS）外，傳統(tǒng)PCR和定量RT-PCR（qRT-PCR）分子檢測是最常用的技術(shù)。分子檢測，尤其是qRT-PCR，是任何水皰性疾病的金標(biāo)準(zhǔn)，因?yàn)檫@種方法快速、敏感且特異，能夠快速并準(zhǔn)確地診斷水皰性疾病，包括從不同生物樣本中檢測塞內(nèi)卡病毒基因組。分子學(xué)檢測診斷塞內(nèi)卡病毒的一個(gè)缺點(diǎn)是，由于塞內(nèi)卡病毒感染的進(jìn)程不同，不同生物樣本中病毒脫落和/或載量不同導(dǎo)致檢測結(jié)果不一致。因此，應(yīng)收集多種樣本，包括血清、扁桃體、糞便、口腔和水皰液，通過分子檢測對塞內(nèi)卡病毒進(jìn)行篩選。

目前可用的其他診斷工具包括免疫組化和原位雜交，這兩種方法分別用來鑒定組織樣本中的特定病毒抗原和核酸。不同研究組已成功使用這兩種技術(shù)診斷塞內(nèi)卡病毒相關(guān)疾病。雖然僅有組織病理學(xué)評價(jià)不能直接判定為塞內(nèi)卡病毒感染，但這項(xiàng)技術(shù)的結(jié)果可指導(dǎo)選擇適合的組織/器官樣本進(jìn)行免疫組化和原位雜交分析。

間接和競爭性酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）、IFA和VN試驗(yàn)均可用于豬塞內(nèi)卡病毒的抗體檢測篩選?？贵w檢測分析的主要優(yōu)點(diǎn)是具有在流行病學(xué)研究、大規(guī)模診斷程序和/或流行病學(xué)監(jiān)測中處理大量樣本的能力，表明豬群過去有病毒暴露和/或存在史。

無論選擇何種檢測方法，在臨床上都難以區(qū)分豬塞內(nèi)卡相關(guān)疾病和經(jīng)典病毒性囊泡感染，尤其是口蹄疫。對于主要的生豬生產(chǎn)國，出現(xiàn)臨床病史和/或表明可能存在水皰性疾病的病變時(shí)，都需要進(jìn)行完整的水皰性外來動物疾病調(diào)查，因?yàn)槿麅?nèi)卡病毒感染可能會對快速報(bào)告豬口蹄疫產(chǎn)生不利影響?！酢?/p>

（待續(xù)）

原題名：Update on senecavirus infection in pigs（英文）

原作者：Raquel A. Leme、Alice F. Alfieri和Amauri A. Alfieri（巴西）