周 鍵

（山東省安丘市畜牧局，安丘 262100）

為了更好地控制奶牛子宮內(nèi)膜炎，按照配方熬制出一種既能治療子宮內(nèi)膜炎又能治療卵巢靜止、持久黃體的純中藥制劑——雙連益母液。該制劑具有標(biāo)本兼顧的特點(diǎn)，在辯證施治上既考慮增補(bǔ)氣血、助陽(yáng)扶正、活血散瘀，又考慮到清熱解毒。此外，雖然病在子宮而兼施外治之法，所以是一個(gè)內(nèi)外兼治的方劑。在此藥方中，黨參、黃芪、白術(shù)、炙甘草以補(bǔ)中氣之不足；當(dāng)歸、炙白藥、熟地增補(bǔ)新血；香附理血?dú)?；木香行氣、醒脾開胃；赤芍、紅花活血化瘀，疏通開路，調(diào)理經(jīng)脈；韭籽補(bǔ)腎助陽(yáng)止帶；益母草去瘀生新、活血調(diào)經(jīng)；雞冠花止赤白帶；雙花、連翅清利濕熱而解毒；乳香、沒藥活血止痛；木通清熱利濕；甘草調(diào)解諸藥[1]。在前期臨床初試中，療效明顯。本試驗(yàn)旨在進(jìn)一步觀察該藥方對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜炎的療效，并驗(yàn)證其對(duì)奶牛卵巢靜止、持久黃體的效果，為完善和推廣應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)藥物

雙連益母液，自制，每瓶100mL，含生藥200g；生理鹽水，自制；長(zhǎng)效土霉素注射液，主要成分為土霉素、緩釋溶媒，10mL/支，由北京中農(nóng)華威制藥有限公司生產(chǎn)；氯前列烯醇，每支0.2mg，上海市計(jì)劃生育科學(xué)研究所產(chǎn)品。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

2016～2017年，在某奶牛場(chǎng)選擇47頭分娩后85～110d且確診患有子宮內(nèi)膜炎的未妊母牛，年齡在4～7歲。依據(jù)治療順序?qū)⑵潆S機(jī)分為4個(gè)批次，每批次10～13頭不等，批次內(nèi)再分為試驗(yàn)組和對(duì)照組。分組情況見表1。

表1 試驗(yàn)動(dòng)物分組情況

1.3 雙連益母液治療子宮內(nèi)膜炎試驗(yàn)

按家畜產(chǎn)科學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)，選擇子宮分泌物呈黏液膿性或膿性，直腸檢查子宮膨大或敏感性差，卵巢硬小或有黃體，發(fā)情遲緩或雖發(fā)情但屢配不孕，綜合診斷為急、慢性子宮內(nèi)膜炎者[2]列入試驗(yàn)。試驗(yàn)組按直腸把握法每次向子宮內(nèi)灌注雙連益母液30～50mL，隔天用藥1次，連用3次為1療程。對(duì)照組，依照1～4先后批次，依次為空白對(duì)照(不用任何藥物)；灌注等體積生理鹽水；深部肌肉注射長(zhǎng)效土霉素（0.1～0.2mL/kg）；深部肌肉注射氯前列烯醇（0.4mg），灌注與用藥時(shí)間次數(shù)均與試驗(yàn)組同步。

1.3.1 臨床療效

在每次灌藥前先抽取少量子宮分泌物進(jìn)行肉眼觀察，同時(shí)直腸檢查卵巢、子宮的狀態(tài)。以后連續(xù)觀察3個(gè)情期，記錄發(fā)情配種受孕情況。按以下標(biāo)準(zhǔn)綜合判定其臨床療效。

最終有效率(痊愈并受孕)：用藥后病牛子宮黏液變清，子宮位置、大小和敏感性恢復(fù)正常，卵巢活動(dòng)、黃體消退，見明顯發(fā)情，經(jīng)配種后在3個(gè)情期內(nèi)受胎。

臨床痊愈：臨床癥狀顯著改善，發(fā)情明顯并配種，但因其他疾病或因素的影響在3個(gè)情期內(nèi)未能受胎。

總有效率=最終有效率+臨床痊愈率。

無(wú)效：臨床癥狀無(wú)明顯改善，或休情時(shí)間超過(guò)3個(gè)情期。

1.3.2 子宮黏液細(xì)菌數(shù)的動(dòng)態(tài)變化

取第2批試驗(yàn)對(duì)照組(生理鹽水對(duì)照)和試驗(yàn)組各次用藥前抽取的子宮分泌物，按平板法進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)，比較用藥前后子宮黏液細(xì)菌總數(shù)的動(dòng)態(tài)變化。

1.3.3 血清孕酮和雌二醇的動(dòng)態(tài)變化

分別于首次用藥當(dāng)天(0d)，首次用藥后第7天(7d)、14天(14d)、21天(21d)尾靜脈采血10mL，3 000r/min離心分離血清，epondorf管分裝，-25℃保存。由濰坊市婦幼保健院經(jīng)γ-放射免疫計(jì)數(shù)儀測(cè)定血清孕酮和雌二醇的含量，分析其動(dòng)態(tài)變化。

1.4 雙連益母液治療卵巢靜止、持久黃體的效果驗(yàn)證

選擇卵巢靜止和持久黃體的患牛，按原促孕液的治療方案給予雙連益母液，即1次向子宮內(nèi)灌注雙連益母液30～50mL，觀察10d，如未見發(fā)情，則再灌注1～2次，記錄配種受孕情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 雙連益母液治療子宮內(nèi)膜炎的效果

2.1.1 臨床療效

由表2可以看出，試驗(yàn)組4批次37頭牛，痊愈并受胎26頭，最終有效率為70.3%；臨床痊愈10頭，占27.0%；總有效率97.3%?？瞻讓?duì)照組2頭均無(wú)效。生理鹽水對(duì)照組3頭(用藥前癥狀稍輕)，用藥后2頭無(wú)效、1頭臨床痊愈?？股貙?duì)照組3頭，用藥后2頭痊愈并受胎、1頭臨床痊愈。氯前列烯醇對(duì)照組2頭，用藥后痊愈并受胎、臨床痊愈各1頭。由此表明雙連益母液對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜炎有較好的療效，與抗生素和氯前列烯醇接近。對(duì)照組的結(jié)果也顯示，生理鹽水對(duì)輕癥亦有輕微的作用，而不用任何藥物的患牛顯然難以康復(fù)。

表2 臨床療效統(tǒng)計(jì)

2.1.2 子宮黏液細(xì)菌數(shù)的變化

用藥前各患牛的子宮分泌物多呈黏液膿性或膿性，混濁，含有白色絮狀沉淀物或黃色膿塊，每毫升細(xì)菌數(shù)在640～32 000個(gè)。用藥后，試驗(yàn)組黏液外觀逐步改善，每毫升細(xì)菌數(shù)呈顯著下降趨勢(shì)。第1次用藥后，有2頭牛下降到0，幅度最大的1頭從32 000下降到200；第3次用藥后多數(shù)牛下降到0。生理鹽水對(duì)照患牛灌注后，子宮黏液外觀變化不大，平均每毫升細(xì)菌數(shù)呈上升趨勢(shì)。

2.1.3 血清孕酮變化

試驗(yàn)組用藥前(0 d)的血清孕酮含量為0.075～3.60nmol/L，卵巢有黃體的牛較多。用藥后大多發(fā)生較大幅度的變化；在0d時(shí)血清孕酮含量較高的患牛，到7d時(shí)迅速降低，最大降幅達(dá)2.89nmol/L；0d時(shí)較低的，先升高，然后迅速降低，最大降幅達(dá)4.80nmol/L。共測(cè)定23頭患牛，21d內(nèi)共20頭先后發(fā)生較大幅度的降低；另3頭患牛持續(xù)升高，但其中2頭0d時(shí)極低(0.08nmol/L、0.16nmol/L)，到21d時(shí)仍很低(0.36nmol/L，0.86nmol/L)。此結(jié)果表明大多數(shù)患牛的子宮炎癥好轉(zhuǎn)或卵巢黃體消退。其中6頭患牛用藥前卵巢有黃體，經(jīng)治療在第1情期發(fā)情配種受胎的患牛，用藥前在1.29～3.60nmol/L之間，用藥后迅速降低到0.12～0.71nmol/L，配種后又很快升高，最高者達(dá)7.57nmol/L。

2個(gè)藥物對(duì)照組用藥前后變化較大，與試驗(yàn)組接近；空白對(duì)照組、生理鹽水對(duì)照組用藥前后變化幅度在0.02～0.04nmol/L之間。上述結(jié)果與臨床結(jié)果相符。

2.1.4 血清雌二醇變化

試驗(yàn)組用藥前(d 0)的血清雌二醇含量為5～278pmol/L。用藥后變化幅度較大；0d時(shí)較低的，到7d時(shí)迅速升高，最大升幅137pmol/L；0d時(shí)較高的，先降低，后升高，最大升幅823pmol/L。在21d內(nèi)23頭牛有21頭牛比0d先后發(fā)生較大幅度的升高，表明子宮炎癥消退或卵巢活動(dòng)；僅2頭患牛在0d時(shí)較高，以后先降低后升高，但未恢復(fù)到0d水平，也可能由于0d正好處于發(fā)情期。

2個(gè)藥物對(duì)照組用藥前后變化較大，最大升降幅度100pmol/L，與試驗(yàn)組接近；空白對(duì)照組、生理鹽水對(duì)照組用藥前后變化最小，最大升降幅度達(dá)70pmol/L。上述結(jié)果與孕酮變化和臨床結(jié)果基本吻合。

2.2 卵巢靜止、持久黃體的治療效果

4頭卵巢靜止患牛用藥前空懷、乏情8～9個(gè)月，用藥后均發(fā)情配種受孕。其中2頭僅用藥1次，分別在用藥后第4、6天發(fā)情；1頭用藥2次，在第2次用藥后第5天發(fā)情，這3頭患牛經(jīng)配種后在第1情期受胎；另1頭用藥4次，在第4次用藥后第40天發(fā)情，第1情期配種后出現(xiàn)返情，再次配種后在第2情期受胎。3頭持久黃體患牛用藥前空懷8～10個(gè)月，分別乏情4、8、10個(gè)月，均用藥2次，分別在用藥后第6、10、18天發(fā)情，經(jīng)配種后均在第1情期受胎。此結(jié)果表明，雙連益母液對(duì)卵巢靜止、持久黃體具有較為確實(shí)的療效。

3 討論

3.1 雙連益母液對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜炎有較好的療效

本試驗(yàn)結(jié)果表明，雙連益母液治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的最終有效率與抗生素對(duì)照組類似，總有效率與抗生素、氯前列烯醇的總有效率接近，兩者均明顯高于生理鹽水對(duì)照組和空白對(duì)照組。子宮黏液細(xì)菌計(jì)數(shù)和血清生殖激素測(cè)定的結(jié)果也同時(shí)佐證，雙連益母液對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜炎有較好的療效。本方由補(bǔ)腎壯陽(yáng)、活血化瘀、清熱利濕、消腫止痛類中藥制成。前兩類是雙連益母液的主藥，具有微量的雌激素樣作用，并能促進(jìn)子宮運(yùn)動(dòng)和改善微循環(huán)[3]。后兩類多數(shù)具有抑菌消炎作用，能夠殺滅子宮內(nèi)病原微生物，消除炎癥。而且，其興奮子宮和改善微循環(huán)的作用也有利于子宮的復(fù)原、凈化，加快炎癥的康復(fù)[4]。各藥相補(bǔ)，相輔相成，標(biāo)本兼治，從而達(dá)到消炎促孕之目的。對(duì)照組的結(jié)果顯示，生理鹽水有輕微的臨床療效，這可能主要與子宮灌注的機(jī)械剌激有關(guān)[5]。有研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)子宮的機(jī)械剌激可促進(jìn)子宮運(yùn)動(dòng)，甚至影響激素的分泌[6]，后者將有利于子宮的復(fù)原凈化。此外，生理鹽水本身也有輕微的消炎作用，臨床上常作為創(chuàng)傷清洗劑，同時(shí)，也不能排除病牛本身的體況較好、病情較輕等因素。

3.2 雙連益母液對(duì)奶牛卵巢靜止、持久黃體的療效

驗(yàn)證治療結(jié)果表明，雙連益母液對(duì)奶牛卵巢靜止和持久黃體的療效是確實(shí)的。原促孕液已經(jīng)過(guò)10余年的臨床檢驗(yàn)，其中不少用戶發(fā)現(xiàn)，配用適量的抗生素時(shí)，可明顯提高療效。這可能與奶牛同時(shí)患有子宮內(nèi)膜炎有關(guān)。臨床上，奶牛子宮內(nèi)膜炎的發(fā)生率較高，尤其是隱性子宮內(nèi)膜炎往往不易察覺，它是引起卵巢靜止、持久黃體的一個(gè)重要原因，三者常常相互關(guān)聯(lián)。雙連益母液的組方正是基于這些考慮，以達(dá)標(biāo)本兼治，使其適應(yīng)癥更加廣泛。需要說(shuō)明的是，奶牛的子宮內(nèi)膜炎、卵巢靜止和持久黃體均是多因子性不孕癥，治療結(jié)果必須達(dá)到受孕才算最終有效。然而即使是健康母畜，受孕也要受到多種因素的影響。因此，使用本藥時(shí)，需同時(shí)注意病畜體況、病情輕重、飼養(yǎng)管理、發(fā)情鑒定、配種質(zhì)量、受孕季節(jié)等多種因素，因?yàn)槿魏我环N因素處理不當(dāng)都可能會(huì)影響治療效果。