范東海 劉磊 唐瑞

摘要：蛋白質(zhì)在人們身體健康方面發(fā)揮著重要作用，并在各個(gè)領(lǐng)域中不斷被廣泛涉獵，其中較為突出的為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域和食品安全領(lǐng)域。蛋白質(zhì)在功能方面極具特異性，換而言之，每一功能的特異性都將帶來差別頗大的功效。蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)在蛋白質(zhì)研究發(fā)展領(lǐng)域中發(fā)揮著堅(jiān)不可摧的作用，而又因蛋白質(zhì)自身不穩(wěn)定因素頗多，因此，對(duì)蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)的相關(guān)研究進(jìn)行分析探討，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。因此，本文將對(duì)這一技術(shù)展開論述，并為其日后工作順利開展提供借鑒和經(jīng)驗(yàn)。

關(guān)鍵詞：蛋白質(zhì)；分離純化技術(shù)；研究進(jìn)展

1蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)的現(xiàn)狀

1.1蛋白質(zhì)易受外界因素影響而導(dǎo)致其變性失活

從蛋白質(zhì)存在介質(zhì)來看，基本上處在混合體系之中，具有極大的不穩(wěn)定性。再加之對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行純化分離時(shí)，易受溶液中PH值和有機(jī)溶劑等因素的影響，從而加劇蛋白質(zhì)的不穩(wěn)定性，最終使蛋白質(zhì)在不同程度上出現(xiàn)變性失活等問題。

1.2物料中蛋白質(zhì)含量相對(duì)較少

由于蛋白質(zhì)在人們社會(huì)生產(chǎn)生活實(shí)踐中發(fā)揮著重要作用并且被應(yīng)用廣泛，且屬于不可或缺因素，因此，對(duì)蛋白質(zhì)的提取日益引起民眾的關(guān)注。但是從實(shí)際發(fā)展情況來看，蛋白質(zhì)在一些物料產(chǎn)品中的含量較少，同時(shí)物料本身也極具復(fù)雜性，加大蛋白質(zhì)提取難度?？梢砸曰蚬こ叹鸀槔M(jìn)行解釋說明?；蚬こ叹粌H包含蛋白質(zhì)，而且也包括工程發(fā)展所需的培養(yǎng)基以及菌體在生長(zhǎng)發(fā)展中所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物等，綜合因素的影響導(dǎo)致蛋白質(zhì)含量相對(duì)較少，難以達(dá)到目標(biāo)對(duì)其需求量。除此之外，蛋白質(zhì)在基因工程菌中的存在方式具有多樣性，其中包括細(xì)胞內(nèi)等，因而，在這一特殊情況下，為獲取相應(yīng)的蛋白質(zhì)，需對(duì)其載體細(xì)胞進(jìn)行擊碎。這種獲取蛋白質(zhì)的方式雖然具有可行性并在實(shí)際中被推廣應(yīng)用，但是所獲取的蛋白質(zhì)中含有一定的雜質(zhì)，導(dǎo)致其純度降低。

2.蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)中的注意事項(xiàng)

2.1步驟少易操作

在對(duì)蛋白質(zhì)純化分離時(shí)需要對(duì)相關(guān)事項(xiàng)予以重視，從而提取出質(zhì)量高、純度高的蛋白質(zhì)，為社會(huì)生產(chǎn)生活深化發(fā)展服務(wù)。因此，在對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行純化分離時(shí)應(yīng)盡量減少操作步驟，降低其雜質(zhì)產(chǎn)生的概率，在分離純化時(shí)應(yīng)堅(jiān)持步驟少、易操作、可實(shí)行的原則，同時(shí)，這種分離方式也有利于減少人力、物力和時(shí)間的損耗，提高蛋白質(zhì)提取效率，促使其經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益有機(jī)統(tǒng)一起來。

2.2下游檢測(cè)工作落實(shí)到位

蛋白質(zhì)純化分離工作的開展，不僅僅要做好最初技術(shù)選擇與步驟篩選等工作，同時(shí)，也需要兼顧下游的檢測(cè)工作，唯有將兩者融為一體，環(huán)環(huán)相扣，協(xié)調(diào)配合，高純度、高數(shù)量的蛋白質(zhì)方可提取出來。因此，在對(duì)蛋白質(zhì)純化分離時(shí)也需對(duì)其下游工作進(jìn)行側(cè)重，其中包括對(duì)所提取的蛋白質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確快速的定位和檢測(cè)，并對(duì)其檢測(cè)工作的開展順序和所需技能在較短時(shí)間內(nèi)盡快了解并透徹掌握，當(dāng)然，檢測(cè)人員也要樹立嚴(yán)謹(jǐn)負(fù)責(zé)的做態(tài)度，為確保蛋白質(zhì)高純度的提取提供強(qiáng)有力的人力支撐。

2.3優(yōu)化升級(jí)上中游蛋白質(zhì)提取技術(shù)

從實(shí)際操作情況來看，在對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行純化分離時(shí)，其上中游的工作進(jìn)程與下游工作的開展具有直接相關(guān)性，上中游工作程序多且復(fù)雜，將會(huì)增加下游工作的負(fù)荷量，加大其檢測(cè)難度。因此，為使蛋白質(zhì)純化分離工作系統(tǒng)性、科學(xué)性、高效率的開展，需要將科學(xué)發(fā)展觀落到實(shí)處，不斷對(duì)上中游提取技術(shù)進(jìn)行優(yōu)化升級(jí)，從而使其提取工序減少，提取精度提高。

3蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)的具體方法

3.1膜分離純化

由于蛋白質(zhì)在人體健康中具有重要作用，再加之人們生活水平日漸提高，思想觀念更為開明，對(duì)養(yǎng)生的關(guān)注度也進(jìn)一步提高，因而，對(duì)蛋白質(zhì)的品質(zhì)也提出更高層次的要求。為滿足民眾對(duì)高品質(zhì)蛋白質(zhì)的要求，蛋白質(zhì)膜分離純化技術(shù)也應(yīng)運(yùn)而生，漸漸走入民眾視野。蛋白質(zhì)膜分離純化技術(shù)的應(yīng)用原理為超濾，也就是說，將附著在膜片上的水分子依托壓力或離心力等外力作用使其通過膜片達(dá)到過濾的效果。從實(shí)際操作來看，膜片的質(zhì)量與過濾效果兩者具有正相關(guān)性，膜片質(zhì)量好，粘附性物體少，不易于堵塞；膜片質(zhì)量差，粘附性物體增多，容易導(dǎo)致膜片堵塞。因此，在對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分離純化時(shí)，選擇合適的膜片尤為必要。

3.2高效液相色譜法

食品行業(yè)和醫(yī)療領(lǐng)域中對(duì)蛋白質(zhì)分離純化時(shí)被廣泛應(yīng)用的另一種方法為高效液相色譜法。高效液相色譜法包括反向高效液相色譜法、離子交換色譜、凝膠過濾色譜等方法。反相高效液相色譜法需要對(duì)固定相做出選擇，該分離純化技術(shù)利用非極性的反向介質(zhì)對(duì)這一工作進(jìn)行開展，在對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行選擇時(shí)審慎考慮，最終將有機(jī)溶劑作為其介質(zhì)。通過極性的強(qiáng)弱對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行純化分離，從而滿足民眾的根本需求。離子交換色譜是依據(jù)蛋白質(zhì)電荷差異性原理開展的。凝膠過濾色譜法顧名思義，是根據(jù)分子的差異性原理展開的，具體表現(xiàn)為形狀和大小上的差異性，憑借凝膠網(wǎng)對(duì)其實(shí)現(xiàn)分離純化的目的。

4蛋白質(zhì)純化分離技術(shù)未來發(fā)展趨勢(shì)

蛋白質(zhì)純化分離工作的開展，采用一種技術(shù)方法往往顯得捉襟見肘，難以提取出預(yù)期所需的高純度蛋白質(zhì)，在數(shù)量和質(zhì)量上往往表現(xiàn)出不達(dá)標(biāo)。因此，采用多種方式統(tǒng)籌推進(jìn)是未來蛋白質(zhì)分離純化工作開展的主要趨勢(shì)。當(dāng)然，蛋白質(zhì)純化分離技術(shù)的推廣應(yīng)用，其結(jié)果終歸要用之于民，而民眾生活質(zhì)量的改善和經(jīng)濟(jì)生活水平的提高，也在一定程度上促使蛋白質(zhì)純化分離技術(shù)進(jìn)一步改革創(chuàng)新。因此，兩者之間相輔相成，相互促進(jìn)。

結(jié)語：

蛋白質(zhì)在人們社會(huì)生產(chǎn)生活中具有堅(jiān)不可摧的地位，是各行各業(yè)發(fā)展必不可少的因素。因此，創(chuàng)新蛋白質(zhì)純化分離技術(shù)方法，減少工序，提高其純度，是社會(huì)主義市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的必然趨勢(shì)，也是蛋白質(zhì)相關(guān)領(lǐng)域發(fā)展的必經(jīng)之路，提取高質(zhì)量、高純度的蛋白質(zhì)，有利于為社會(huì)生產(chǎn)深化發(fā)展做貢獻(xiàn)。

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