梁知銳，楊開洪，徐耀祥，林銘鍵

廣東陽江市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科 （廣東陽江 529500）

糖化血紅蛋白（HbA1c）是血糖控制的重要監(jiān)控指標(biāo)，其檢測(cè)方法有高效液相色譜法、電泳法、免疫法、親和層析法和酶法等。我院目前使用的糖化血紅蛋白分析儀HLC-723G8，是基于高效液相色譜法原理的專門檢測(cè)儀器，具有標(biāo)本用量少、速度快、重復(fù)性好、準(zhǔn)確度高、故障少等優(yōu)點(diǎn)[1]。在使用過程中，試驗(yàn)人員按照儀器的操作規(guī)程使用儀器，儀器有專人負(fù)責(zé)保養(yǎng)，工程師會(huì)定期對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)；隨著儀器的長(zhǎng)時(shí)間使用，儀器配件磨損導(dǎo)致儀器故障，影響儀器狀態(tài)，直接影響檢驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性和準(zhǔn)確性[2]。為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和真實(shí)性，需要更換配件，排除故障。層析柱和過濾器都是原廠生產(chǎn)的消耗性配件，檢驗(yàn)成本較高，經(jīng)濟(jì)效益較差，給科室的成本核算帶來一定的壓力。為了解決上述問題，我們?cè)诠ぷ鲗?shí)踐中通過反方向安裝層析柱的方法，對(duì)達(dá)到或接近使用壽命的層析柱再生使用，解決了一些實(shí)際問題?，F(xiàn)分析反方向安裝糖化血紅蛋白分析儀層析柱的基本情況，探討其應(yīng)用價(jià)值。

1 達(dá)到或接近預(yù)期壽命層析柱的故障現(xiàn)象

當(dāng)層析柱檢測(cè)次數(shù)接近或大于8 000檢測(cè)次數(shù)時(shí)，儀器通常出現(xiàn)壓力高警報(bào)，表現(xiàn)為柱壓力升高及色譜圖的峰異常，更換過濾器后，儀器工作狀態(tài)未改善?；虮憩F(xiàn)為多個(gè)樣本色譜圖的峰值特別是涂滿HbA1c峰變寬或變成雙峰。

2 方法

2.1 反向安裝層析柱的步驟

關(guān)閉儀器，拔出電源線，戴手套，小心取出層析柱配件，見圖1。檢查見配件外觀完好，清洗干凈，然后將層析柱配件按拆卸前相反方向安裝到儀器上，見圖2，輸送試劑，灌注層析柱并且進(jìn)行計(jì)數(shù)器的復(fù)位，層析柱計(jì)數(shù)器回零。

圖1 正常情況下安裝層析柱方向

圖2 反向安裝層析柱

2.2 反向安裝層析柱精密度批內(nèi)測(cè)定試驗(yàn)

選取低值和高值標(biāo)準(zhǔn)品，由同一試驗(yàn)人員使用同一批號(hào)的試劑連續(xù)測(cè)定其HbA1c的水平20次，計(jì)算其變異系數(shù)。

2.3 反向安裝層析柱精密度批間測(cè)定試驗(yàn)

選取低值和高值的標(biāo)準(zhǔn)品，由同一試驗(yàn)人員使用同一批號(hào)的試劑，分別測(cè)定HbA1c的水平，每天1次，連續(xù)測(cè)定20 d，計(jì)算其變異系數(shù)。

2.4 反向安裝層析柱準(zhǔn)確度的測(cè)定試驗(yàn)

選取低值和高值的標(biāo)準(zhǔn)品，由同一試驗(yàn)人員使用同一批號(hào)的試劑，連續(xù)測(cè)定其HbA1c的含量10次，計(jì)算其均值及其相對(duì)偏差，偏倚應(yīng)＜3%[3]，運(yùn)用t檢驗(yàn)，判斷反向安裝層析柱檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的結(jié)果與校準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)值是否存在差異。

3 結(jié)果

3.1 反向安裝層析柱精密度試驗(yàn)結(jié)果

批內(nèi)試驗(yàn)的變異系數(shù)均小于1%，批間試驗(yàn)的變異系數(shù)小于1%，說明反向安裝層析柱測(cè)量的結(jié)果重復(fù)性好。見表1。

3.2 反向安裝層析柱準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

運(yùn)用t檢驗(yàn)對(duì)反向安裝層析柱后檢測(cè)校準(zhǔn)品的結(jié)果與校準(zhǔn)品的校準(zhǔn)值進(jìn)行比較，計(jì)算其偏倚，偏倚絕對(duì)值均小于1%。見表2。

4 討論

血糖檢測(cè)影響因素較多，且只能反映患者短時(shí)間的血糖情況。HbA1c是血紅蛋白與糖類經(jīng)非酶促結(jié)合而成的，其合成過程是緩慢且不可逆的，不受血糖濃度暫時(shí)波動(dòng)的影響，能夠反映患者近2～3個(gè)月的血糖控制情況。HbA1c水平變化和糖代謝控制狀況以及糖尿病的相關(guān)并發(fā)癥有密不可分的關(guān)聯(lián)，能夠協(xié)助監(jiān)測(cè)血糖控制水平，因此作為糖尿病篩選、診斷、血糖控制、療效評(píng)價(jià)的有效指標(biāo)，在臨床上已廣泛使用，是監(jiān)測(cè)糖尿病的金標(biāo)準(zhǔn)[4]。

表1 反向安裝層析柱精密度試驗(yàn)結(jié)果

表2 反向安裝層析柱準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

通常，反向安裝層析柱后，儀器壓力顯示及色譜圖的峰值恢復(fù)正常，報(bào)警消除，儀器能再正常工作一段時(shí)間。其原理是層析柱長(zhǎng)期累積的殘留碎片顆粒，吸附能力下降，透過性減低，通過反向沖洗，部分微粒脫落，減小了阻力。

反向安裝層析柱后，儀器的壓力正常，色譜圖的峰正常，精密度試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，高值與低值批內(nèi)試驗(yàn)和批間試驗(yàn)的變異系數(shù)均小于1%，1/4允許誤差范圍為批內(nèi)不精密度判斷限（≤3.0%），1/3允許誤差范圍為批間不精密度判斷限（≤4.0%），說明結(jié)果重復(fù)性良好，結(jié)果穩(wěn)定，符合CLIA′88對(duì)室間評(píng)估的允許誤差要求[3]。準(zhǔn)確度試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，測(cè)定值與標(biāo)準(zhǔn)值不存在差異，其偏倚＜1%，說明反方向安裝層析柱后的結(jié)果準(zhǔn)確性能滿足要求。

由于配件價(jià)格高，更換周期長(zhǎng)，層析柱配件是不作為常規(guī)備用耗材庫存的，于是常造成儀器報(bào)警后才發(fā)現(xiàn)層析柱耗盡，訂購后較長(zhǎng)一段時(shí)間機(jī)器不能正常工作等困擾。反向安裝超期使用的層析柱，可能對(duì)于以下幾種情況有實(shí)際意義：（1）臨時(shí)解決層析柱因故不能及時(shí)更新時(shí)的問題，如訂購后至到貨前這段時(shí)間；（2）對(duì)于基層醫(yī)療單位，可通過本法延長(zhǎng)層析柱的使用壽命，降低檢驗(yàn)成本，提高科室效益。因?yàn)榇朔▽儆趹?yīng)用經(jīng)驗(yàn)，未見于文獻(xiàn)，不建議作為常規(guī)方法使用。