吳艷清
摘要:針對牦牛和藏羊的養(yǎng)殖技術和疾病防控等方面,目前已經有了彳艮多的研究,但是對于牦牛和藏羊的免疫特性,研究甚少。因此,本文對牦牛和藏羊的免疫特性進行研究,并對牦牛和藏羊血液中紅細胞C3b受體、紅細胞免疫復合物(lC)、B淋巴細胞C3b受體以及T淋巴細胞E一玫瑰花環(huán)等免疫指標進行了測定,以求初步探索牦牛和藏羊的免疫特性。
關鍵詞:牦牛;藏羊;免疫特性
1材料和方法
1.1 材料
牦牛和藏羊研究:所使用的牦牛和藏羊各100頭,其中牦牛的年齡在5~10歲之間,藏羊的年齡在3~5年之間。所有牦牛和藏羊均來自青海。實驗所選用的牛羊不需要雌雄限制,通過臨床觀測其身體健康狀況,從靜脈采集血液、肝素抗凝。
試劑:研究采用補體致敏酵母菌以及酵母菌多糖等試劑。
1.2 研究方法
1.2.1 紅細胞C3b受體、紅細胞免疫復合物(IC)的測定 本次研究采用的紅細胞不需要使用Ficoll分離液進行分離,可以直接使用生理鹽水對其進行離心洗滌,丟棄血液中的大部分紅細胞。血液剩余的成分按照1.25 x107個/毫升進行配置,其中添加酵母菌的量與紅細胞的比例為10:1。
1.2.2 B淋巴細胞C3b受體的測定 將淋巴細胞懸濁液鍵入到一支小試管中,然后添加補體致敏酵母菌懸液,兩者的量均為0.075毫升。將試管置于37 0C的恒溫水浴中進行孵育,時間為30分鐘,然后向其中加入0.25%戊二醛生理鹽水2滴,進行涂片,鏡檢200個淋巴細胞,對其中聯(lián)結3個以上酵母菌的淋巴細胞數目進行記錄,從而計算花環(huán)百分率。
1.2.3 T淋巴細胞E玫瑰花環(huán)的測定
2 結果
根據檢測結果顯示,100頭牦牛的紅細胞C3b受體花環(huán)率平均數為2.65±1.91,變異系數為72;紅細胞IC花環(huán)率為4.51±2.75,變異系數為61;B細胞C3b受體花環(huán)率為23.24±5.81,變異系數為25;T細胞E玫瑰花環(huán)率平均數為7.15±3.62,變異系數為42。藏羊的指標檢測結果為紅細胞C3b受體花環(huán)率平均數為2.10 ±1.09,變異系數為52;紅細胞IC花環(huán)率為4.51±2.75,變異系數為64;B細胞C3b受體花環(huán)率為23.24±5.81,變異系數為21; T-細胞E玫瑰花環(huán)率平均數為7.15±3.62,變異系數為31。
3 結果討論
近年來隨著對動物紅細胞的研究發(fā)現,動物體內存在紅細胞免疫系統(tǒng),血液中的紅細胞能夠清除循環(huán)免疫復合物,起到促進吞噬的作用,紅細胞還具有識別和儲存抗原、提呈抗原、增強T細胞功能的作用,參與激活動物體內補體系統(tǒng)。C3b受體是血液紅細胞免疫功能的前提基礎,其位于紅細胞膜表面,對于紅細胞C3b受體的研究在人類醫(yī)學領域中較為常見,針對牦牛和藏羊紅細胞是否具有C3b受體及免疫黏附功能的研究報告非常少。通過本文對牦牛和藏羊紅細胞的研究結果分析,可以開出牦牛和藏羊體內的紅細胞與人體紅細胞相同,都具有C3b受體,同時也都擁有黏附免疫復合物的能力。因此說明了牦牛和藏羊的紅細胞也包含免疫功能。根據國外的研究結果證明,血液的紅細胞能夠對T淋巴細胞產生Y下干擾素等淋巴因子,對B淋巴細胞產生Smlg,另外紅細胞對于NK、LAK的活性以及在T淋巴細胞免疫黏附時,具有調控腫瘤細胞能力作用。對于牦牛和藏羊紅細胞是否對機體免疫調節(jié)具有重要作用,還需要進一步研究。
通過對牦牛和藏羊血液紅細胞進行研究,發(fā)現其紅細胞具有與C3b受體補體致敏酵母菌相結合的能力,結合后形成花環(huán)。牦牛和藏羊紅細胞相對于與人類血液紅細胞而言,其形成花環(huán)的百分率較低。形成這種問題的主要因素可能為牦牛和藏羊血清中存在抑制因子,抑制因子具有阻礙C3b受體活性的作用,而人類的血清中含有這種物質,所以人類血液紅細胞C3b受體不會受到抑制。比如在奶牛血清中,含有免疫膠固素,這種物質具有引發(fā)紅細胞產生凝集的作用,從而影響C3b受體的活性,阻礙了紅細胞C3b受體花環(huán)的形成。但是影響牦牛和藏羊紅細胞C3b受體花環(huán)形成的因素目前還不能確定,是否血清中存在抑制因子或者抑制因子是否為免疫膠固素,還需要進一步驗證。另外,從牦牛和藏羊的生長環(huán)境來考慮,由于牦牛和藏羊長期生長在高原環(huán)境中,具有比較特殊的種群屬性,所以牦牛和藏羊紅細胞C3b受體數量可能會減少,同時其活性也相對降低,因此而導致了牦牛和藏羊紅細胞C3b受體花環(huán)百分率較低。
4 研究結論
本文研究了牦牛和藏羊免疫特性,對血液T淋巴細胞E-玫瑰花環(huán)進行了測定,根據結果顯示,牦牛和藏羊的花環(huán)百分率均低于其他平原地區(qū)的牛羊品種。造成這種問題的主要原因可能是牦牛和藏羊生活在高原地區(qū),由于氣候環(huán)境的差異,導致紅細胞C3b受體花環(huán)的形成率低。血液B淋巴細胞的補體受體具有激發(fā)B淋巴細胞合成RNA的作用,同時能夠加快B淋巴細胞的代謝作用,增強釋放接枝,從而參與產生抗體,形成免疫記憶。對于B淋巴細胞補體受體的檢測意義非常重要,因為其直接影響了動物的免疫功能。本文的采用了酵母菌進行研究,對傳統(tǒng)的研究方法進行了改進,酵母菌相對于特異性抗體致敏的紅細胞補體(EAC)而言,不需要制備抗RBC IgM型抗體的過程,縮短了步驟,同時酵母素的使用也取得了較為理想的研究。因此該方法的研究穩(wěn)定性較好,同時具有簡便、經濟的特點。