李想

高致病性豬藍(lán)耳病是最近幾年嚴(yán)重危害生豬養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)安全的主要病毒性傳染性疫病，它是由豬繁殖與呼吸道綜合癥變異毒株引起的一種高度接觸性傳染性疾病。在曾經(jīng)發(fā)生過高致病性藍(lán)耳病的養(yǎng)殖區(qū)域，通過集中免疫藍(lán)耳病活疫苗能夠顯著提高防疫效果，控制疾病流行，降低死亡率。本次研究在進(jìn)行大量流行病學(xué)調(diào)查，臨床癥狀病理學(xué)，解剖觀察以及實(shí)驗(yàn)室診斷的基礎(chǔ)上，選擇使用藍(lán)耳病經(jīng)典毒株型（CH-1R）和變異毒株（JXA1-R株）活疫苗開展免疫試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果顯示（JXA1-R株）活疫苗免疫接種之后，雖然會(huì)不出現(xiàn)不良反應(yīng)，但會(huì)出現(xiàn)一定的臨床癥狀，一般在五天之內(nèi)即可恢復(fù)正常。通過兩種疫苗的免疫抗體監(jiān)測試驗(yàn)，可以發(fā)現(xiàn)，兩種疫苗的免疫抗體均能夠達(dá)到考核標(biāo)準(zhǔn)，其中（CH-1R）型活疫苗的抗體合格率最高，現(xiàn)將具體研究內(nèi)容介紹如下：

1、實(shí)驗(yàn)材料和方法

1.1高致病性豬藍(lán)耳病活疫苗安全試驗(yàn)

選擇2014年6月凌源市烏蘭白的一個(gè)規(guī)模化養(yǎng)豬場的4周齡以內(nèi)未免疫接種藍(lán)耳病疫苗的豬30頭進(jìn)行安全試驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)之前，采集實(shí)驗(yàn)豬的新鮮血液，進(jìn)行血清檢查，豬繁殖與呼吸道綜合征病毒檢測呈陰性。疫苗選擇使用經(jīng)典毒株型（CH-1R）和變異毒株（JXA1-R株）活疫苗。實(shí)驗(yàn)過程中，將30頭豬隨機(jī)分為兩個(gè)組別，每組豬15頭，一個(gè)未經(jīng)典毒株組、一個(gè)為變異毒株組。然后將兩個(gè)組別劃分為3個(gè)小組，每個(gè)小組養(yǎng)殖在一個(gè)豬舍內(nèi)。第一組和第二組的三個(gè)小組分別肌肉注射經(jīng)典毒株型（CH-1R）活疫苗和變異毒株（JXA1-R株）活疫苗射1頭份、5頭份、10頭份，免疫接種之后觀察兩組豬的不良反應(yīng)。

1.2免疫效果試驗(yàn)

免疫效果實(shí)驗(yàn)選擇使用經(jīng)典毒株型（CH-1R）活疫苗和變異毒株（JXA1-R株）活疫苗。整個(gè)實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)階段，第一個(gè)階段于2014年8月，在該鄉(xiāng)鎮(zhèn)的兩個(gè)曾經(jīng)發(fā)生過豬高致病性藍(lán)耳病的養(yǎng)殖場內(nèi)進(jìn)行，第二階段于2015年8月繼續(xù)在上述鄉(xiāng)鎮(zhèn)曾經(jīng)發(fā)生過藍(lán)耳病的兩個(gè)養(yǎng)豬場內(nèi)進(jìn)行免疫接種之后，并對這兩個(gè)養(yǎng)殖場進(jìn)行持續(xù)三年的跟蹤觀察。整個(gè)免疫過程中，每個(gè)養(yǎng)殖場劃分為兩個(gè)組別，第一個(gè)組別免疫接種經(jīng)典毒株（CH-1R）活疫苗，第二個(gè)組別免疫接種變異毒株（JXA1-R株）活疫苗。仔豬在四周齡以內(nèi)免疫接種1頭份，后備母豬在配種前一個(gè)月免疫接種1頭份，繁殖母豬在產(chǎn)仔后的十天內(nèi)先免疫接種豬瘟疫苗，接種七天之后免疫接種，豬藍(lán)耳病疫苗1頭份。免疫抗體檢測選擇使用北京天之塔生物科技有限公司生產(chǎn)的豬高致病性藍(lán)耳病ELISA試劑盒，操作方法嚴(yán)格按照試劑盒的使用說明書進(jìn)行。免疫接種4～5周之后，采集不同組別豬新鮮血液，進(jìn)行血清抗體監(jiān)測，觀察各個(gè)養(yǎng)殖場豬免疫接種六個(gè)月之后，養(yǎng)殖場豬藍(lán)耳病的發(fā)病情況和死亡情況。

2、結(jié)果

2.1疫苗安全試驗(yàn)

兩組豬分別接種經(jīng)典毒株型（CH-1R）活疫苗和變異毒株（JXA1-R株）活疫苗，兩個(gè)組別的三個(gè)小組的豬接種兩種不同劑量的疫苗，均沒有出現(xiàn)過敏反應(yīng)癥狀。豬免疫接種之后出現(xiàn)的反應(yīng)主要表現(xiàn)為體溫升高，采食欲望下降，精神萎靡不振，上述癥狀在疫苗免疫接種1～2天后逐漸增多，接種3天之后發(fā)病癥狀達(dá)到高峰期，疫苗接種第五天之后臨床癥狀逐漸消失，恢復(fù)正常，沒有出現(xiàn)其他不良反應(yīng)，由此可以看出經(jīng)典毒株型（CH-1R）活疫苗和變異毒株（JXA1-R株）活疫苗的安全性菌比較好，推廣變異毒株（JXA1-R株）活疫苗具有一定的安全性。

2.2抗體監(jiān)測

通過對兩種毒株的活疫苗進(jìn)行抗體監(jiān)測，監(jiān)測結(jié)果顯示經(jīng)典毒株（CH-1R）活疫苗抗體監(jiān)測合格率最高，合格率達(dá)到95%以上，變異毒株（JXA1-R株）活疫苗抗體監(jiān)測合格率在83%左右，和經(jīng)典毒株活疫苗相比，稍為遜色，但仍然達(dá)到了70%以上的考核標(biāo)準(zhǔn)。

2.3第一階段免疫觀察

2014年8月，對經(jīng)發(fā)生過高致病性藍(lán)耳病的兩個(gè)規(guī)?；B(yǎng)殖場分別免疫接種了經(jīng)典毒株型（CH-1R）和變異毒株（JXA1-R株）活疫苗，經(jīng)過六個(gè)月的持續(xù)跟蹤觀察，經(jīng)典毒株型（CH-1R）活疫苗，免疫六個(gè)月之后，豬發(fā)病率高達(dá)10%以上，死亡率在7.2%。免疫接種了變異毒株（JXA1-R株）活疫苗發(fā)病率在7.0%，死亡率在2.1%，是發(fā)病率和死亡率最低的一種。由此可以證明，養(yǎng)殖場發(fā)病和死亡，與疫苗毒株的類別有著很大關(guān)系。

2.4第二階段免疫效果觀察

2015年8月選擇兩種活疫苗，繼續(xù)在上述鄉(xiāng)鎮(zhèn)曾經(jīng)發(fā)生過藍(lán)耳病的兩個(gè)養(yǎng)豬場內(nèi)進(jìn)行免疫接種效果觀察，觀察結(jié)果和上述觀察結(jié)果基本一致變異毒株（JXA1-R株）活疫苗免疫之后，發(fā)病率和死亡率均低于經(jīng)典毒株型（CH-1R）活疫苗。由此可以進(jìn)一步證明，養(yǎng)殖場疫病防控效果和疫苗毒株有很大關(guān)系。通過上述曾經(jīng)發(fā)生過藍(lán)耳病兩個(gè)養(yǎng)殖場進(jìn)行連續(xù)三年的跟蹤調(diào)查，發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)養(yǎng)殖場在應(yīng)用變異毒株（JXA1-R株）活疫苗免疫之后，繁殖母豬發(fā)病率、流產(chǎn)率、死亡率均比免疫滅活疫苗前大幅度下降，而且呈現(xiàn)每年大幅度下降的趨勢。

3、體會(huì)

高致病性豬藍(lán)耳病在免疫接種過程中，常規(guī)滅活疫苗，免疫抗原性較差，進(jìn)入機(jī)體之后產(chǎn)生免疫應(yīng)答時(shí)間較為緩慢，免疫空白期長達(dá)四周以上，在這四周之內(nèi)，如果豬感染了高致病性藍(lán)耳病病毒，勢必會(huì)導(dǎo)致養(yǎng)殖場病情進(jìn)一步流行傳播。即便是四周之后，能夠產(chǎn)生相應(yīng)的免疫應(yīng)答，豬群的抗體水平也處于較低狀態(tài)，因此必須進(jìn)行強(qiáng)化免疫，只有確?？贵w水平達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)之后，才能提高豬群的防疫能力，所以使用滅活疫苗存在著較大的免疫風(fēng)險(xiǎn)。而活疫苗進(jìn)入機(jī)體之后能夠快速增殖，具有較好的免疫應(yīng)答性能，機(jī)體能夠快速產(chǎn)生免疫抗體，具有持續(xù)時(shí)間長，免疫空白期短的特點(diǎn)，適合發(fā)病養(yǎng)殖場緊急免疫使用。而在本次免疫抗體監(jiān)測過程中，兩種滅活疫苗的抗體水平存在較大的差異性，其中經(jīng)典毒株（CH-1R）活疫苗的免疫抗體水平要高于變異毒株，出現(xiàn)該種情況可能是現(xiàn)有的檢測試劑比較適合于檢測經(jīng)典毒株（CH-1R）所產(chǎn)生的抗體，所以導(dǎo)致兩種活疫苗的抗體水平存在一定的檢測差異。

經(jīng)過2014年8月到2015年8月的免疫效果觀察和持續(xù)三年的跟蹤調(diào)查，總結(jié)了高致病性豬藍(lán)耳病活疫苗免疫的經(jīng)驗(yàn)。首先，為了有效預(yù)防高致病性豬藍(lán)耳病的傳播流行，選擇免疫疫苗時(shí)一定要選擇一個(gè)縣域內(nèi)使用一種與流行毒株基因序列同源性最高的活疫苗進(jìn)行集中免疫。目前，發(fā)病地區(qū)最好選擇變異毒株（JXA1-R株）活疫苗，未發(fā)病的地區(qū)豬群、種公豬、懷孕母豬禁止使用活疫苗。已經(jīng)發(fā)生過該種疾病的養(yǎng)殖場或養(yǎng)殖區(qū)域，經(jīng)產(chǎn)母豬每年至少要跟胎免疫兩次，分別在產(chǎn)前和產(chǎn)后兩周免疫接種一頭份，仔豬14日齡，免疫接種0.5頭份，35日齡，強(qiáng)化免疫接種一次。對于曾發(fā)生過高致病性豬藍(lán)耳病的疫區(qū)，應(yīng)該對受威脅區(qū)域的假定健康豬緊急免疫接種活疫苗。各種活疫苗的接種量和接種方法，應(yīng)該嚴(yán)格按照使用說明書進(jìn)行操作，免疫接種28天之后，監(jiān)測豬群的免疫效果。

（作者單位：122500遼寧省凌源市烏蘭白動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所）