劉力娟 王厚芳 孫芾

[摘要]目的 了解泌尿生殖道感染患者泌尿生殖道解脲脲原體（Uu）和人型支原體（Mh）感染和藥敏分析情況，向臨床推薦治療泌尿生殖道支原體感染的經(jīng)驗(yàn)性治療藥物。方法? 收集我院2011年1月～2017年12月共計(jì)1639例泌尿生殖道感染患者的送檢標(biāo)本，采用Biomerieux Mycoplasma IST 2支原體培養(yǎng)、鑒定、計(jì)數(shù)及藥敏試驗(yàn)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 所有患者泌尿生殖道支原體陽(yáng)性率為39.5%（648/1639），其中Uu感染608例（37.0%），單純Mh感染11例（0.7%），Uu和Mh（Uu+Mh）混合感染29例（1.8%）。藥敏結(jié)果顯示，Uu對(duì)原始霉素的敏感率（99.2%）最高，其次為多西環(huán)素（98.8%）;耐藥性最強(qiáng)的是環(huán)丙沙星（耐藥率為77.8%）。Mh對(duì)多西環(huán)素、原始霉素、交沙霉素的敏感率最高，為100.0%;耐藥性最強(qiáng)的是紅霉素（耐藥率為90.9%）。Uu+Mh對(duì)多西環(huán)素和四環(huán)素的敏感率最高，為100.0%;耐藥性最強(qiáng)的是紅霉素和環(huán)丙沙星（耐藥率為82.8%）。結(jié)論 泌尿生殖道支原體感染以Uu為主，多西環(huán)素宜可以作為泌尿生殖道支原體感染的首選抗生素。

[關(guān)鍵詞]泌尿生殖道支原體;解脲脲原體;人型支原體;藥敏分析

[中圖分類號(hào)] R691.9? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-4721（2019）1（c）-0146-04

支原體是一類缺乏細(xì)胞壁、能通過(guò)細(xì)菌濾器，在人工培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)繁殖的最小的原核細(xì)胞微生物。其中解脲脲原體（Ureaplasma urealyticum，Uu）和人型支原體（Mycoplasma hominis，Mh）在人體泌尿生殖道中較常見，可能誘發(fā)非淋球菌性尿道炎、輸卵管炎、前列腺炎、腎盂腎炎等疾病。Uu是導(dǎo)致女性生殖道疾病的主要病原體之一，可引起非淋球菌性尿道炎、宮頸炎、盆腔炎，也可誘發(fā)早產(chǎn)、自然流產(chǎn)、死胎及不孕不育等[1-2]。有統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)表明，近年來(lái)支原體感染呈上升趨勢(shì)，抗菌藥物的不合理使用導(dǎo)致支原體耐藥率不斷上升，選擇敏感藥物成為臨床治療的關(guān)鍵。本研究對(duì)來(lái)我院就診的1639例泌尿生殖道感染患者的支原體培養(yǎng)、鑒定和藥敏結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，以期了解泌尿生殖道支原體感染情況及耐藥性，指導(dǎo)臨床合理使用抗生素。

1資料與方法

1.1一般資料

通過(guò)我院實(shí)驗(yàn)室管理系統(tǒng)（Labtrak）回顧2011年1月～2017年12月在我院婦產(chǎn)科、泌尿外科、皮膚科就診的非重復(fù)泌尿生殖道感染患者共1639例， 分析泌尿生殖道支原體培養(yǎng)的結(jié)果。1639份病例標(biāo)本包括尿道拭子446例、精液7例、宮頸口拭子1186例。其中男453例，女1186例，外籍患者樣本614例，中國(guó)國(guó)籍樣本1025例，年齡（34.2±8.2）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均系初診，樣本采集前1周內(nèi)未全身及局部使用抗菌藥物。排除標(biāo)準(zhǔn)：復(fù)診患者，樣本采集前1周內(nèi)全身及局部使用抗菌藥物。該研究參與研究者已簽署知情同意書。本研究已經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 標(biāo)本采集

由于支原體對(duì)黏膜細(xì)胞有高親和力，因此有必要全面徹底地刮取黏膜，以采集細(xì)胞。女性患者常規(guī)進(jìn)行外陰清潔，拭去宮頸表面黏液，使用無(wú)菌棉拭子插入宮頸1～2 cm深處旋轉(zhuǎn)1周，停留15 s，取出生殖道拭子后立即密封保存送檢。男性患者常規(guī)尿道口清潔，使用男性無(wú)菌棉拭子在尿道1～2 cm處，取尿道分泌物立即送檢。男性患者精液采用手淫法采集置于無(wú)菌瓶立即送檢。

1.3試劑

所有標(biāo)本采用Biomerieux? Mycoplasma IST 2支原體培養(yǎng)、鑒定、計(jì)數(shù)及藥敏試驗(yàn)試劑盒（比色法）進(jìn)行檢測(cè)。藥敏試驗(yàn)選用試劑盒提供的9種抗生素分別為四環(huán)素（Tetracycline）、紅霉素（Erythromycine）、環(huán)丙沙星（Ciprofloxacine）、氧氟沙星（Ofloxacine）、多西環(huán)素（Doxycycline）、交沙霉素（Josamycine）、原始霉素（Pristinamycine）、阿奇霉素（Azithromycine）、克拉霉素（Clarythromycine）。每種抗菌藥物設(shè)高、低兩個(gè)藥物濃度。

1.4 方法

從冰箱取出試劑放置至室溫，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書執(zhí)行操作，接種后放入（36±2） ℃培養(yǎng)箱孵育，于24、48 h觀察并記錄結(jié)果。

1.5觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

指示空培養(yǎng)基顏色由黃色變?yōu)榧t色判斷為有解Uu或Mh生長(zhǎng)。藥敏結(jié)果判斷：當(dāng)指示孔判定有Uu或Mh生長(zhǎng)時(shí)，高、低兩個(gè)藥物濃度孔均未變紅，判斷為敏感（S）;當(dāng)?shù)蜐舛瓤鬃兗t，高濃度孔不變紅，判斷為中介（I）;當(dāng)高低兩個(gè)藥物濃度孔均變紅，判斷為耐藥（R）。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用描述性統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用Excel軟件計(jì)算相應(yīng)百分率。

2結(jié)果

2.1支原體陽(yáng)性檢出率及性別構(gòu)成

從1639例泌尿生殖道感染患者送檢樣本中檢出支原體648例，陽(yáng)性率為39.5%。Uu陽(yáng)性率為37.0%，Mh陽(yáng)性率為0.7%，Uu和Mh（Uu+Mh）混合感染陽(yáng)性率為1.8%。453例男性樣本中有82例陽(yáng)性，陽(yáng)性率為18.1%，且均為Uu。1186例女性樣本中566例陽(yáng)性，陽(yáng)性率為47.7%，其中Uu陽(yáng)性率為44.4%，Mh陽(yáng)性率為0.9%，Uu+Mh混合感染陽(yáng)性率為2.4%（表1）。

2.2支原體在不同國(guó)籍間的分布情況

1639例樣本中有外籍患者樣本614例，中國(guó)籍樣本1025例。外籍患者支原體陽(yáng)性率為27.0%，其中Uu陽(yáng)性率為25.7%、Mh陽(yáng)性率為0.3%、Uu+Mh混合感染陽(yáng)性率為1.0%。中國(guó)籍患者支原體陽(yáng)性率為47.0%，其中Uu陽(yáng)性率為43.9%，Mh陽(yáng)性率為0.9%，Uu+Mh混合感染陽(yáng)性率為2.2%（表2）。

2.3抗菌藥物的敏感性

藥敏結(jié)果顯示，Uu對(duì)原始霉素、多西環(huán)素、交沙霉素的敏感性較高，敏感率>90%，而對(duì)環(huán)丙沙星、氧氟沙星敏感性較差，敏感率<10%。Mh對(duì)原始霉素、多西環(huán)素、交沙霉素、四環(huán)素的敏感性較高，敏感率為100%，而對(duì)克拉霉素、阿奇霉素、紅霉素的敏感性較差，敏感率<10%。Uu+Mh對(duì)多西環(huán)素、四環(huán)素、原始霉素敏感性較高，敏感率>90%，而對(duì)紅霉素、氧氟沙星、環(huán)丙沙星敏感性較差，敏感率<10%（表3）。

3討論

支原體是1898年由Nocard等發(fā)現(xiàn)的一種類似細(xì)菌但不具有細(xì)胞壁的原核微生物，能在無(wú)生命的人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，直徑50～300 nm，能通過(guò)細(xì)菌濾器。生殖道支原體的首次報(bào)道是在1981年，從兩例診斷為非淋球菌性尿道炎的男性患者尿道樣本中分離出[3]。泌尿生殖道支原體是引起男性非淋球菌尿道炎的常見病原菌[4]，也可引起女性宮頸炎和盆腔炎等，Uu的特殊頂端結(jié)構(gòu)能牢固地黏附于靶細(xì)胞表面，女性特殊的生理結(jié)構(gòu)和生理周期使其容易被感染[5]。與泌尿生殖道感染有關(guān)的主要是Uu和Mh兩種。De Francesco等[6]報(bào)道的9956例泌尿生殖道培養(yǎng)結(jié)果，有1856例支原體陽(yáng)性，陽(yáng)性率為18.6%;王莉等[7]報(bào)道1438例泌尿生殖道培養(yǎng)結(jié)果，有713例支原體陽(yáng)性，陽(yáng)性率為49.6%。

我院1639例樣本中檢出支原體648例，陽(yáng)性率為39.5%，主要病原體為Uu，其次為Uu+Mh混合感染，Mh感染陽(yáng)性率最低，這與國(guó)內(nèi)外大部分資料的研究結(jié)果一致[8]。男性樣本陽(yáng)性率為18.1%，病原體均為Uu。女性樣本陽(yáng)性率高于男性，陽(yáng)性率為47.7%，主要病原體為Uu，可見女性Uu感染率高于男性，與國(guó)內(nèi)報(bào)道[9-11]一致。614例外籍患者支原體陽(yáng)性樣本中Uu感染158例，陽(yáng)性率25.7%。1025例中國(guó)籍患者支原體陽(yáng)性樣本中Uu感染450例，陽(yáng)性率為43.9%，可見不同國(guó)籍的泌尿生殖道支原體均以Uu為主。本研究中，中國(guó)籍患者樣本中泌尿道支原體陽(yáng)性率為47.0%，而外籍患者樣本中泌尿道支原體陽(yáng)性率為27%，造成不同國(guó)籍患者感染泌尿生殖道支原體陽(yáng)性率的差異原因目前不清。

支原體屬不具有細(xì)胞壁，因此針對(duì)細(xì)胞壁合成的抗生素對(duì)其無(wú)效，如青霉素和其他β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物。Uu及Mh通常對(duì)四環(huán)素類（如多西環(huán)素）藥物敏感[12]。我院608株Uu的藥敏結(jié)果顯示，原始霉素、多西環(huán)素的敏感性較高，敏感率>90%，與文獻(xiàn)報(bào)道[13-14]一致。而氧氟沙星、環(huán)丙沙星敏感性較低，敏感率<10%，藥敏結(jié)果提示多西環(huán)素可作為泌尿道支原體感染首選藥。Uu感染的成人建議臨床選用多西環(huán)素[15]。11株Mh的藥敏結(jié)果顯示，多西環(huán)素、交沙霉素、原始霉素的敏感性比較高均為100%，與文獻(xiàn)報(bào)道[16]一致，而阿奇霉素、克拉霉素、紅霉素、氧氟沙星、環(huán)丙沙星敏感率較低，敏感率均<20%。29株Uu+Mh對(duì)多西環(huán)素、四環(huán)素、原始霉素敏感性較高，敏感率>90%，而對(duì)克拉霉素、阿奇霉素、紅霉素、氧氟沙星、環(huán)丙沙星敏感性較差，敏感率<20%，因此對(duì)于Mh及Mh+Uu混合感染，抗生素治療更易出現(xiàn)耐藥情況，與文獻(xiàn)報(bào)道[17]一致。Mh通常對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類藥物（紅霉素、阿奇霉素、克拉霉素）耐藥[18]， Mh耐藥菌株的分子基礎(chǔ)還不是很清楚，有研究表明耐藥性與特定的核糖體突變有關(guān)[19]。由于臨床盲目用藥，出現(xiàn)了支原體的多重耐藥現(xiàn)象。張冉等[20]的研究發(fā)現(xiàn)，氧氟沙星可誘導(dǎo)Mh多重耐藥性的產(chǎn)生，gyrA、parE基因中的點(diǎn)突變可能導(dǎo)致耐藥。

本研究發(fā)現(xiàn)泌尿生殖道支原體感染以Uu為主，女性Uu感染率高于男性。外籍患者泌尿生殖道支原體感染也是以Uu為主。通過(guò)藥物敏感試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Uu、Mh、Mh+Uu均多西環(huán)素敏感。鑒于泌尿生殖道支原體感染難以獲得診斷，臨床醫(yī)生通常對(duì)患者經(jīng)驗(yàn)用藥，用藥選擇基于病原菌的體外藥敏結(jié)果。因此及時(shí)進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，選擇高效藥物，實(shí)施足劑量、足療程用藥，以降低耐藥株的產(chǎn)生。

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（收稿日期：2018-05-28? 本文編輯：張晨暉）