陸國壽 譚 曉 黃建猷 黃周鋒 胡筱希

(1 廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院化學(xué)所，南寧市 530022，電子郵箱：luguoshou@foxmail.com; 2 廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點實驗室，南寧市 530022)

【提要】 雞矢藤為廣西壯族和瑤族常用的特色藥材，該藥材中環(huán)烯醚萜類成分的活性成為近年來的研究熱點之一。本文就雞矢藤中環(huán)烯醚萜類成分的種類、提取工藝、質(zhì)量控制、藥理作用等方面的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

雞矢藤為茜草科植物雞矢藤的地上干燥部分[1]，為廣西特色壯瑤藥材，壯藥名為“勾鄧罵”[2]，瑤藥名為“缺解美”[3]，被《廣西藥用植物名錄》《廣西壯族自治區(qū)壯藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》《中國瑤藥學(xué)》收錄。壯醫(yī)認(rèn)為其通谷道，除濕度，祛風(fēng)毒，活血止痛，可用于肝脾腫大、食滯、胃痛、水腫、泄瀉、痢疾、風(fēng)濕骨痛、跌打損傷、瘰疬、癰瘡、耳鳴等的治療?，庒t(yī)認(rèn)為其具有祛風(fēng)利濕、清熱解毒、消腫、化痰止咳、消食化積之功效。雞矢藤中含有豐富的環(huán)烯醚萜苷類成分，其為含硫的化學(xué)結(jié)構(gòu)，因具有含硫化學(xué)結(jié)構(gòu)成分的中草藥較少見，故具有較大的開發(fā)和研究價值。本文對雞矢藤中環(huán)烯醚萜的化學(xué)成分、提取工藝、質(zhì)量控制、藥理作用等方面的研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述，以期為該藥材的深入研究和開發(fā)利用提供參考。

1 環(huán)烯醚萜類成分種類

目前已從雞矢藤中提取分離得到近30種環(huán)烯醚萜類成分[4-8]，包括雞矢藤苷、雞矢藤次苷、10-乙酰雞矢藤次苷、3,4-二氫-3-甲氧基雞屎藤苷、京尼平苷、車葉草苷、去乙酰車葉草苷、交讓木苷、6-O-E-阿魏酰水晶蘭苷、雞矢藤酸、雞矢藤B、6-β-羥基雞矢藤酸、6β-O-β-D-葡糖基雞矢藤苷酸、車葉草苷酸、7-脫氧馬錢子酸、去乙酰車葉草酸、雞矢藤苷甲酯、雞矢藤次苷甲酯、去乙酰車葉草酸甲酯、6-O-sinapoyl scandoside methyl ester、雞矢藤酸乙酯、7-脫氧諾加醇、10-O-E-阿魏酰水晶蘭、雞矢藤苷酸甲酯與雞矢藤苷酸二聚物、雞矢藤苷酸二聚物、Saprosmoside K、Saprosmoside E、Paederia scandoside。這些環(huán)烯醚萜類成分主要包括有苷類、酸類、酯類及二聚物。

2 提取工藝

2.1 環(huán)烯醚萜總苷類的提取 吳彤等[9-10]分別采用醇提再大孔吸附樹脂分離的方法提取雞矢藤中的環(huán)烯醚萜類化合物，提取物中環(huán)烯醚萜類含量可達(dá)60%～99%，其具有治療積食、腹瀉、消化不良等胃腸道疾病的作用。楊雪等[11]還采用水提醇沉再大孔樹脂分離的方法提取雞矢藤中的環(huán)烯醚萜類化合物，發(fā)現(xiàn)該提取物具有治療痛風(fēng)的作用。

2.2 環(huán)烯醚萜類單體化合物的提取 劉東鋒等[12]采用醇提，超濾膜濾過，再正丁醇萃取、活性炭脫色，最后用乙醚重結(jié)晶的方法，從雞矢藤藥材中分離得到雞矢藤苷單體化合物。林麗美等[13]采用了醇提，正丁醇萃取，再正相硅膠柱層析法、制備液相分離純化的方法，從雞矢藤藥材中分離得到了雞矢藤苷甲酯。王曙光等[14]采用了醇提，正丁醇萃取，再正相硅膠柱層析法和反相硅膠柱層析純化的方法，從雞矢藤藥材中分離得到了雞矢藤苷酸。劉武占等[15]采用醇提，大孔樹脂洗脫及硅膠柱層析洗脫，再采用中低壓制備液相進(jìn)行分離純化的方法，一次性從雞矢藤藥材中分離得到較高純度的乙酰車葉草苷酸甲酯和雞矢藤次苷甲酯兩種單體成分。

3 質(zhì)量控制

3.1 高效液相色譜法 王永兵等[16]采用了高效液相色譜和二極管陣列檢測器法，對雞矢藤中雞矢藤苷酸、雞矢藤苷、雞矢藤苷酸甲酯3種環(huán)烯醚萜類成分進(jìn)行了測定，其所建立的含量測定方法具有較好的精密度、靈敏度、重復(fù)性和準(zhǔn)確度。王文蘭等[17]采用高效液相色譜和紫外檢測器法對雞矢藤中的雞矢藤苷成分進(jìn)行了含量測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該法簡單、快速、可靠，適用于雞矢藤藥材及其制劑的質(zhì)量控制。

3.2 分光光度法 王永昌等[18]采用分光光度法對雞矢藤中總環(huán)烯醚萜苷的含量進(jìn)行測定，其以雞矢藤苷為對照品，采用香草醛-乙酸顯色，在620 nm紫外下檢測出甘肅產(chǎn)雞矢藤藥材中總環(huán)烯醚萜苷的含量為1.50%，該法簡單、快速、準(zhǔn)確、易行，適用于雞矢藤中總環(huán)烯醚萜的含量進(jìn)行測定。

3.3 高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜法 鄒旭[19]對雞矢藤中環(huán)烯醚萜類化合物進(jìn)行高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜分析，共分析鑒定了6個成分，所鑒定出的成分均含環(huán)烯醚萜苷類成分，且化合物能得到有效分離。陸陳層[20]采用電噴霧-四級桿-飛行時間-質(zhì)譜分析鑒定出雞矢藤中17個環(huán)烯醚萜苷類化合物，其中包括7個新的二聚體化合物、6個化合物、2個新的環(huán)烯醚萜苷類化合物。 Lu等[21]采用高效液相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對雞矢藤中環(huán)烯醚萜苷二聚體的色譜條件進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果顯示，選擇以三相體系甲醇-乙腈-0.1%乙酸銨水溶液作為流動相時，可清楚地分離二聚體，其保留時間適當(dāng)。

4 藥理作用

4.1 降血糖作用 張曉峰等[22]研究了雞矢藤環(huán)烯醚萜類提取物對糖尿病ICR小鼠血糖、血脂的影響，結(jié)果顯示長期服用雞矢藤環(huán)烯醚萜類提取物可改善糖尿病小鼠體重下降和多食的癥狀，其中高劑量組小鼠空腹血糖比實驗初期降低37.6%，提示雞矢藤環(huán)烯醚萜類提取物具有一定的降血糖能力。

王紹軍等[23]研究了雞矢藤提取物對鏈脲佐菌素所致糖尿病腎病小鼠的療效，發(fā)現(xiàn)雞矢藤提取物能顯著降低小鼠的空腹血糖水平，以及腎臟組織中的丙二醛和皮膚糖基化終產(chǎn)物含量，并增強(qiáng)超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性，改善腎小管空泡變性和腎小球萎縮狀態(tài)。因此，雞矢藤提取物能有效降低糖尿病腎病小鼠的血糖，改善腎功能狀態(tài)，并可能通過降低皮膚糖基化終產(chǎn)物的積聚、改善組織的氧化應(yīng)激狀態(tài)，發(fā)揮腎臟保護(hù)作用。

4.2 鎮(zhèn)痛作用 劉梅等[24]研究發(fā)現(xiàn)，雞矢藤環(huán)烯醚萜總苷具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其作用機(jī)制可能與內(nèi)源性阿片肽系統(tǒng)無關(guān)，而與抑制一氧化氮的生成有關(guān)。居颺[25]發(fā)現(xiàn)雞矢藤苷酸甲酯對腹腔注射醋酸引發(fā)的小鼠扭體有抑制作用，可明顯延長小鼠對熱刺激的耐受時間，具有良好的外周和中樞神經(jīng)鎮(zhèn)痛效果。雞矢藤環(huán)烯醚萜苷對硝普鈉所致?lián)p傷背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與其抑制鈣離子-一氧化氮/環(huán)鳥苷酸/蛋白激酶G信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有關(guān)[26]。

4.3 降低高尿酸血癥小鼠的血清尿酸水平 顏海燕等[27-28]研究了雞矢藤提取物對酵母膏和氧嗪酸鉀致小鼠高尿酸血癥的影響，發(fā)現(xiàn)雞矢藤提取物能顯著降低小鼠的血清尿酸水平，抑制肝臟黃嘌呤氧化酶的活性，同時對小鼠血清腺苷脫氨酶的活性具有一定的抑制作用，因此認(rèn)為雞矢藤提取物降低高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平的機(jī)制可能與其抑制黃嘌呤氧化酶和腺苷脫氨酶活性有關(guān)。

4.4 對尿酸鈉晶體誘導(dǎo)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的影響 馬穎等[29]發(fā)現(xiàn)雞矢藤提取物能顯著降低痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型大鼠的踝關(guān)節(jié)腫脹度，改善其異常步態(tài)；進(jìn)一步行病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，雞矢藤提取物能減少關(guān)節(jié)組織炎性細(xì)胞浸潤，并改善滑膜增生等病理改變；放射免疫分析檢測表明，雞矢藤提取物可降低痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜組織中腫瘤壞死因子α和白細(xì)胞介素1β的水平。此外，雞矢藤提取物還可顯著降低痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎家兔滑膜組織前列腺素E2的含量及環(huán)氧化酶-2含量，并抑制環(huán)氧化酶-2 mRNA的表達(dá)[30]。這提示雞矢藤提取物可有效保護(hù)環(huán)氧化酶-2介導(dǎo)的滑膜組織的炎性損傷。胡寒等[31]研究了雞矢藤提取物對尿酸鈉誘導(dǎo)的大鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的影響，結(jié)果顯示雞矢藤提取物能降低腫瘤壞死因子α和白細(xì)胞介素1β的表達(dá)水平，對關(guān)節(jié)病理損傷也有一定的改善作用，認(rèn)為雞矢藤提取物對尿酸鈉晶體誘導(dǎo)的大鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎具有一定的防治作用。

呂心蕊等[32]發(fā)現(xiàn)雞矢藤提取物能有效減輕急性尿酸性關(guān)節(jié)炎家兔關(guān)節(jié)的腫脹程度，降低組織炎性細(xì)胞浸潤，改善滑膜增生樣改變，減少關(guān)節(jié)灌洗液中前列腺素E2的生成，下調(diào)滑膜組織環(huán)氧化酶-2 mRNA的表達(dá)，認(rèn)為雞矢藤提取物對家兔急性尿酸性關(guān)節(jié)炎的干預(yù)作用良好。

4.5 免疫調(diào)節(jié)作用 Zhu等[33]研究了雞矢藤中環(huán)烯醚萜苷對高尿酸大鼠的抗炎免疫調(diào)節(jié)作用及機(jī)制，結(jié)果顯示環(huán)烯醚萜苷可以抑制人核轉(zhuǎn)錄因子肽、人單核細(xì)胞趨化蛋白-1、人α平滑肌肌動蛋白的生物活性，以及人單核細(xì)胞趨化蛋白-1和人α平滑肌肌動蛋白的mRNA表達(dá)。

4.6 保肝作用 Peng等[34]發(fā)現(xiàn)雞矢藤環(huán)烯醚萜苷能顯著降低大鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶水平，用環(huán)烯醚萜預(yù)處理的大鼠，肝組織損傷明顯減輕，谷胱甘肽、過氧化氫酶、超氧化物歧化酶水平升高，丙二醛水平降低，提示環(huán)烯醚萜苷可通過降低氧化應(yīng)激水平而發(fā)揮保肝作用。

4.7 抗腫瘤作用 李紅霞等[35]探討了雞矢藤環(huán)烯醚萜苷的體外抗腫瘤活性，結(jié)果顯示雞矢藤環(huán)烯醚萜苷濃度≤500 μg/mL及以下時對正常小鼠成纖維細(xì)胞-3T3無毒副作用，對人胃腺癌細(xì)胞SGC7901、HeLa細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116、人源結(jié)腸癌細(xì)胞COLO205、人乳腺管癌細(xì)胞BT-549和人乳腺癌細(xì)胞MCF-7的增殖均有抑制作用，此外還能夠有效誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞SGC7901、HeLa細(xì)胞和人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116凋亡。

4.8 抗驚厥鎮(zhèn)靜作用 Yang等[36]對從雞矢藤中提取的雞矢藤苷酸的抗驚厥和鎮(zhèn)靜作用進(jìn)行研究，結(jié)果顯示雞矢藤苷酸不同劑量組(5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg)具有抗驚厥和鎮(zhèn)靜作用，劑量越大，抗驚厥和鎮(zhèn)靜作用越強(qiáng)，且不同劑量組均能增加小鼠大腦中的γ-氨基丁酸含量，降低空腹血糖水平，上調(diào)谷氨酸脫羧酶-65抗體的表達(dá)。

5 毒 性

龐明群等[37]對大鼠予高、中、低劑量的雞矢藤環(huán)烯醚萜提取物連續(xù)灌胃12周，停藥2周后觀察大鼠的一般狀況、體重、血液學(xué)指標(biāo)、血液生化學(xué)指標(biāo)、臟器系數(shù)和組織病理學(xué)等方面的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)給藥組與對照組的上述指標(biāo)均無明顯差異，提示長期服用雞矢藤環(huán)烯醚萜提取物對大鼠無明顯損害和毒副作用。

6 結(jié)語和展望

雞矢藤中成分復(fù)雜，其藥效通常被認(rèn)為由其環(huán)烯醚萜類成分來發(fā)揮，但是中藥發(fā)揮治療作用通常是依靠多途徑、多成分、多靶點來產(chǎn)生，僅對某一有效部位或有效成分進(jìn)行研究具有一定的片面性和局限性。譜-效關(guān)系是中藥的質(zhì)量控制與療效評價手段，其建立在中藥指紋圖譜研究的基礎(chǔ)上，但并不等同于中藥指紋圖譜，而研究方向比指紋圖譜更深入[38-39]。鑒于雞矢藤的研究現(xiàn)狀，可以對雞矢藤開展譜-效關(guān)系研究：首先，在目前研究的基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代中藥化學(xué)提取手段獲得不同的藥效部位，以雞矢藤中的藥效成分為基礎(chǔ)，選擇合適的成分作為指標(biāo)，建立相應(yīng)的藥效部位指紋圖譜，選定特征峰；其次，綜合雞矢藤的藥效研究成果，建立雞矢藤譜-效關(guān)系藥效評價模型，獲得相關(guān)藥效學(xué)數(shù)據(jù)；最后，采用普通多元回歸分析和偏最小二乘法等方法對指紋圖譜及藥效進(jìn)行譜效關(guān)系的數(shù)據(jù)處理，建立雞矢藤的譜-效關(guān)系，從而獲得比較完善的雞矢藤藥效物質(zhì)基礎(chǔ)綜合質(zhì)量評價方法。

總之，雞矢藤中含有豐富的環(huán)烯醚萜類成分，具有降血糖、鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、保肝、抗腫瘤、抗驚厥、降低高尿酸血癥小鼠的血清尿酸水平、減少尿酸鈉晶體誘導(dǎo)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的病理改變等作用，無明顯毒副作用。