史融冰 丁文艷

【摘要】目的：探討血細(xì)胞分析儀檢測血小板結(jié)果假性降低的主要原因以及其糾正方法。方法：選擇2017年9月至2018年3月在我院進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)檢測2008例樣本為觀察對(duì)象，均采用Sysmex XS-800i五分類血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測，對(duì)檢測結(jié)果PLT<100×109/L且無血小板減少癥狀的樣本進(jìn)行涂片瑞氏染色和手工顯微鏡計(jì)數(shù)復(fù)檢，并根據(jù)實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)分析血小板計(jì)數(shù)假性減少的原因和糾正方法。結(jié)果：2008例樣本中有66例出現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)假性降低，其中，24例因EDTA依賴而出現(xiàn)假性降低，4例為血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，8例冷凝集，21例巨大血小板現(xiàn)象，9例為標(biāo)本采集不當(dāng)。結(jié)論：血細(xì)胞分析儀檢測血小板計(jì)數(shù)具有一定的局限性，極易受抗凝劑、血小板形態(tài)缺陷、標(biāo)本采集等因素影響，因此，臨床應(yīng)規(guī)范實(shí)驗(yàn)室檢測操作流程，并對(duì)PLT計(jì)數(shù)<100×109/L樣本嚴(yán)格按照復(fù)檢規(guī)則進(jìn)行復(fù)查，最大限度避免血小板假性降低發(fā)生，提高檢測的準(zhǔn)確性，以為臨床相關(guān)疾病診斷提供準(zhǔn)確可靠的依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】血細(xì)胞分析儀;血小板計(jì)數(shù);假性降低;原因;糾正方法

【中圖分類號(hào)】R181.3+2【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】2095-6851（2019）01-238-01

血常規(guī)檢查是臨床疾病診斷及療效評(píng)估的常用輔助手段，可讓醫(yī)師了解到患者血清中血細(xì)胞狀態(tài)、血細(xì)胞數(shù)量以及血小板計(jì)數(shù)等情況。其中，血小板計(jì)數(shù)檢測結(jié)果是臨床診斷止血性、血栓性疾病的主要依據(jù)。因此，準(zhǔn)確檢測血小板計(jì)數(shù)對(duì)臨床準(zhǔn)確診治疾病具有重要的意義。近年，隨著檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，血細(xì)胞分析儀因具有操作簡單、檢測快速、重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)而廣泛應(yīng)用于血小板計(jì)數(shù)檢測中，但是在實(shí)際臨床中受檢測原理、儀器局限性、操作誤差等不穩(wěn)定因素影響，極易出現(xiàn)假性血小板減少，引起疾病誤診誤治[1]?，F(xiàn)為進(jìn)一步提高血小板計(jì)數(shù)檢測的準(zhǔn)確性，本文將重點(diǎn)分析血細(xì)胞分析儀檢測血小板結(jié)果假性降低的主要原因，并針對(duì)性提出糾正方法。

1?資料和方法

1.1?研究對(duì)象

選擇2017年9月至2018年3月在我院進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)檢測2008例樣本為觀察對(duì)象，其年齡在1d～48歲，平均年齡26歲，均采用Sysmex XS-800i五分類血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測，對(duì)檢測結(jié)果PLT<100×109/L且無血小板減少癥狀體征的66例樣本進(jìn)行涂片瑞氏染色和手工顯微鏡計(jì)數(shù)復(fù)檢。

1.2?方法

（1）血細(xì)胞分析儀檢測：2008例血樣本均置于含有乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）的抗凝試管中并搖勻，在采集的2h內(nèi)用Sysmex XS-800i五分類血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)水平檢測。（2）復(fù)檢：對(duì)血細(xì)胞分析儀檢測PLT<100×109/L的樣本進(jìn)行復(fù)檢，具體參考《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的要求進(jìn)行以下操作，①瑞氏染色鏡檢主要觀察血小板的形態(tài)結(jié)構(gòu)和分布情況;②血小板稀釋液手工顯微鏡計(jì)數(shù)。若復(fù)檢結(jié)果與血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果一致的，可打印結(jié)果報(bào)告，但如果復(fù)檢結(jié)果與細(xì)胞分析儀的檢測結(jié)果不一致，則尋找其原因以及對(duì)應(yīng)的糾正方法。

1.3?統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

選用SPSS24.0軟件，計(jì)量數(shù)據(jù)以（x±s）表示，采取t檢驗(yàn)。P<0.05，表示差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)果

2008例樣本中有66例出現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)假性降低，占3.29%（66/2008）其中，24例因EDTA依賴而出現(xiàn)假性降低，4例因出現(xiàn)血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，8例因樣本冷凝集，21例出現(xiàn)巨大血小板現(xiàn)象，9例為標(biāo)本采集不當(dāng)。尋找出影響血小板結(jié)果假性降低的原因后予以相應(yīng)的糾正措施，糾正后的血小板計(jì)數(shù)結(jié)果較糾正前有顯著性的差異（p<0.05），具體見表1。

3?討論

血常規(guī)檢查是臨床檢驗(yàn)的基本項(xiàng)目，在疾病診斷、鑒別診斷以及治療中發(fā)揮著重要的作用。其中血小板計(jì)數(shù)變化與機(jī)體的凝血、止血功能、狀態(tài)有密切的相關(guān)性，是機(jī)體檢測是否存在凝血、止血障礙的主要指標(biāo)[2]。目前在臨床檢驗(yàn)中，主要應(yīng)用血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)檢測，具有高效、方便快捷等優(yōu)勢(shì)，能夠有效提高檢驗(yàn)人員的工作效率。但是近年隨著檢測量的逐年增加，血小板計(jì)數(shù)出現(xiàn)假性降低的現(xiàn)象越來越多，引起了國內(nèi)外檢測工作者的高度關(guān)注。血小板結(jié)果假性降低現(xiàn)象不僅會(huì)增加不必要的輔助檢查，加重患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，還會(huì)導(dǎo)致誤診誤治，給病患的生理、心理帶來極大痛苦，造成醫(yī)療資源浪費(fèi)。本研究結(jié)果顯示2008例樣本中有66例出現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)假性降低，占3.29%，且發(fā)現(xiàn)其結(jié)果假性降低的原因既有人為操作不當(dāng)，又有儀器、血樣本客觀原因。

3.1?抗凝劑的影響

國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)將乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）推薦作為血細(xì)胞分析儀檢測血小板計(jì)數(shù)的首選抗凝劑，這是因?yàn)镋DTA-K2能夠與血液中的Ca2+相結(jié)合形成螯合物，使Ca2+不能發(fā)揮凝血作用，防止血樣本凝固，避免血小板凝集[3]。但是，近年越來越多的研究報(bào)道，在血常規(guī)檢測中應(yīng)用EDTA抗凝劑可導(dǎo)致EDTA依賴性假性血小板減少現(xiàn)象，引起疾病誤診誤治。相關(guān)數(shù)據(jù)也顯示，在我國EDTA依賴性假性血小板減少癥的發(fā)生率約占0.08%～0.25%，而且隨著EDTA-K2抗凝劑的應(yīng)用越來越廣泛，其發(fā)生率呈逐年上升的趨勢(shì)。此現(xiàn)象的具體發(fā)生機(jī)制仍不十分明確，但大部分學(xué)者認(rèn)為與血小板膜的表面存有一些隱匿性的抗原密切相關(guān)，這些抗原可與血樣本中的自身抗體結(jié)合，造成血小板與纖維蛋白原聚集成團(tuán)。因此，在臨床實(shí)際檢驗(yàn)中，對(duì)于疑似EDTA依賴性假性血小板減少癥的樣本可通過使用枸椽酸鈉抗凝劑來糾正。此外，本研究還有4例血樣本因出現(xiàn)“血小板衛(wèi)星現(xiàn)象”而發(fā)生血小板計(jì)數(shù)假性減少。這主要是由于EDTA-K2能夠使血小板膜表面的糖蛋白Ⅱb/Ⅲa與中性粒細(xì)胞發(fā)生黏附性結(jié)合，故在顯微鏡下可見白細(xì)胞周圍有血小板黏附，俗稱為“衛(wèi)星現(xiàn)象”，易將其誤當(dāng)成白細(xì)胞計(jì)數(shù)，造成血小板計(jì)數(shù)檢查結(jié)果減少。因此，對(duì)于血小板計(jì)數(shù)少于100×109/L的樣本需對(duì)其進(jìn)行血涂片復(fù)檢。

3.2?血樣本采集不當(dāng)

本研究66例血小板計(jì)數(shù)假性降低樣本中有9例是由于標(biāo)本采集不當(dāng)所導(dǎo)致的。采集樣本時(shí)若操作不當(dāng)易造成血管壁破損，使凝血因子進(jìn)入到血液樣本中產(chǎn)生血凝塊導(dǎo)致血小板檢測結(jié)果偏低;與此同時(shí)，當(dāng)血樣本量采集不足（≤1.5ml）時(shí)，血細(xì)胞分析儀只能吸取一部分的樣本，導(dǎo)致全血象計(jì)數(shù)成比例減少，此外樣本被稀釋也會(huì)使血小板假性降低現(xiàn)象出現(xiàn)。因此，在臨床中應(yīng)加強(qiáng)對(duì)護(hù)理人員、檢驗(yàn)人員進(jìn)行培訓(xùn)，并做好檢驗(yàn)前質(zhì)量控制，盡量避免因樣本凝集、樣本被稀釋、樣本量不足而引起血小板假性降低，以保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確。

3.3?血標(biāo)本病理因素

本研究結(jié)果還顯示，有21例樣本因血小板形態(tài)巨大，8例因樣本冷凝集現(xiàn)象而出現(xiàn)血小板假性降低。當(dāng)受檢者伴有高血壓、糖尿病、血液系統(tǒng)疾病時(shí)可加快血小板的凝集速度或易使血小板的體積偏大。而當(dāng)血小板的體積超過24fl時(shí)，血細(xì)胞分析儀無法將其納入到血小板的計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，使檢測的血小板計(jì)數(shù)顯著減少。故當(dāng)臨床遇到此種情況時(shí)，可通過采用手工血小板計(jì)數(shù)法復(fù)檢來糾正。此外，若受檢者血液中存在過高效價(jià)的冷凝集素可使血紅細(xì)胞、血小板發(fā)生凝集，造成血細(xì)胞分析儀檢測到血小板計(jì)數(shù)明顯偏低。因此，對(duì)于冷凝集血樣本，臨床可通過采集前預(yù)處理或者采集后溫水水浴進(jìn)行糾正。本研究最后也證實(shí)，針對(duì)血小板假性降低的原因進(jìn)行相應(yīng)的糾正后，受檢者的血小板計(jì)數(shù)結(jié)果均較糾正前有顯著的改善。

綜上，血細(xì)胞分析儀檢測血小板計(jì)數(shù)歲具有快捷方便、價(jià)格低等優(yōu)點(diǎn)，但該檢查方法無法很好地識(shí)別血小板形態(tài)以及其凝集情況，極易造成血小板結(jié)果假性降低現(xiàn)象出現(xiàn)，進(jìn)而影響臨床疾病診治。因此，臨床應(yīng)規(guī)范實(shí)驗(yàn)室檢測操作流程，并對(duì)PLT計(jì)數(shù)<100×109/L樣本嚴(yán)格按照復(fù)檢規(guī)則進(jìn)行復(fù)查，最大限度避免血小板假性降低發(fā)生，提高檢測的準(zhǔn)確性，以為臨床相關(guān)疾病診斷提供準(zhǔn)確可靠的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]?錢兵，尹丹丹.不同血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板的差異性分析[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2014，21（9）：986-987.

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