丁銳，劉超祥 (亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)院,安徽 亳州 236800)

范蘭蘭 (安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽 合肥 230000)

陳娜 (亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)院,安徽 亳州 236800)

羅勒(Ocimumbasilicum)為唇形科(Lamiaceae)羅勒屬一年生草本植物，主要分布中國(guó)南部省份及西部新疆等省份；國(guó)外主要分布于東南亞、南美洲及非洲部分地區(qū)。羅勒全草和種子藥用價(jià)值較高，其性溫味辛，有疏風(fēng)行氣、化濕消食、活血、解毒等功能；可用于感冒、咳嗽、中暑、月經(jīng)不調(diào)、跌打損傷等疾病的治療[1]。藥理研究證實(shí)，羅勒提取物有抗菌、抗炎鎮(zhèn)痛、抑制腫瘤轉(zhuǎn)移、降血糖和降血脂等活性作用[2,3]。筆者對(duì)羅勒多糖提取工藝、含量測(cè)定方法及其生物活性研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。

1 羅勒多糖的提取及含量測(cè)定

孫林芳等[4]用苯酚-硫酸法測(cè)得羅勒多糖含量為8.04%，蒽酮-硫酸法測(cè)得羅勒多糖含量為7.99%。羅軒等[5]測(cè)定丁香羅勒多糖含量為9.1%，是抗前列腺癌的主要成分之一。楊建等[6]用超聲提取進(jìn)行研究，考察羅勒多糖含量，發(fā)現(xiàn)乙醇濃度對(duì)提取效果影響顯著。楊京霞等[7]探討羅勒多糖的最佳提取工藝，發(fā)現(xiàn)其含量為26.87%。于華靜等[8]對(duì)羅勒多糖進(jìn)行分離純化，發(fā)現(xiàn)水提醇沉法提取效率高，離子交換柱對(duì)羅勒多糖分離效果較好。呂雯等[9]測(cè)定羅勒多糖的相對(duì)分子量分布在80000～100000之間。

2 羅勒多糖的藥理學(xué)活性

2.1 抑菌作用

羅勒精油含有多種活性成分，其中甲基丁香酚、茴香腦類(lèi)等成分有較強(qiáng)的抑菌活性，對(duì)金黃色葡萄球菌屬、腸球菌屬和假單胞菌均有較好抑制效果，并能通過(guò)抑制大腸埃希菌治療出血性腸炎及溶血性尿毒綜合征[10～13]。

張穎穎等[14]發(fā)現(xiàn)羅勒多糖對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽胞桿菌、普通變形桿菌、大腸埃希菌、糞腸球菌及肺炎克雷伯菌等都有較好的抑制效果，對(duì)銅綠假單胞菌的抑制效果較差。方茹等[15]研究羅勒粗多糖溶液對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)均有抑制作用，但濃度低于18mg/mL時(shí)對(duì)大腸桿菌沒(méi)有抑菌作用，低于20mg/mL時(shí)對(duì)金黃色葡萄球菌沒(méi)有抑菌作用。

2.2 抗淋巴管腫瘤作用

羅勒多糖抑制淋巴管新生，抗腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制可能是通過(guò)降低HLECs體外成管能力并顯著下調(diào)VEGFR-3的表達(dá)[16]。連松剛等[17]探討羅勒多糖對(duì)培養(yǎng)體系中HLECs體外成管能力及相應(yīng)信號(hào)通路的影響，分析在羅勒多糖干預(yù)下VEGF-C/D及VEGFR-2/3mRNA及蛋白的表達(dá)水平，初步揭示了羅勒多糖對(duì)該信號(hào)通路的作用；通過(guò)檢測(cè)凋亡調(diào)節(jié)基因Bax和Bcl-2的表達(dá)水平，研究了羅勒多糖對(duì)HLECs活性的干預(yù)機(jī)制。

2.3 抗肝癌作用

郭小顏等[18]發(fā)現(xiàn)羅勒多糖對(duì)H22肝癌淋巴道轉(zhuǎn)移模型小鼠原位腫瘤有抑制作用，其減少瘤周淋巴管數(shù)的抗轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)控VEGF-C/VEGFR-3信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)的。馮兵等[19]通過(guò)發(fā)現(xiàn)羅勒多糖對(duì)缺氧條件下不同轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞MHCC97H和MHCC97L組蛋白H3K9me2甲基化水平均有調(diào)節(jié)作用，其中對(duì)高轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞MHCC97H組蛋白H3K9me2甲基化的調(diào)節(jié)與組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶G9a和去甲基化酶JMJD1A有關(guān)，而對(duì)低轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞MHCC97L組蛋白H3K9me2甲基化的調(diào)節(jié)可能是通過(guò)其他通路發(fā)揮作用。

朱慶均等[20]發(fā)現(xiàn)羅勒多糖能明顯延長(zhǎng)肝癌H22淋巴道轉(zhuǎn)移模型小鼠的生存期，并可改善受試動(dòng)物的生存質(zhì)量。羅勒膠囊對(duì)大鼠移植性肝癌具有明顯改善TACE術(shù)后缺氧的作用，并通過(guò)降低術(shù)后腫瘤乏氧微環(huán)境中HIF-1α和VEGF及血清sICAM-1的表達(dá)，起到對(duì)TACE術(shù)后肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的抑制作用。

2.4 抗肺癌作用

羅勒多糖具有明顯的抑制黑色素瘤B16-F10人工肺自發(fā)性轉(zhuǎn)移行為的作用，羅勒多糖通過(guò)多個(gè)藥效靶點(diǎn)綜合作用，能使具有細(xì)胞通訊功能缺陷的PG細(xì)胞產(chǎn)生一定程度的恢復(fù)作用[22]。曲迅等[23]研究發(fā)現(xiàn)羅勒多糖處理組細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移能力明顯低于對(duì)照組，細(xì)胞通訊功能有一定程度的恢復(fù),熒光染料傳遞毗鄰3-4列細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的基因c-myc、Tiam-1表達(dá)程度低于對(duì)照組,而抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的基因nm23表達(dá)程度高于對(duì)照組；它是一種通過(guò)多個(gè)藥效靶點(diǎn)綜合作用的具有抗人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞侵襲以及轉(zhuǎn)移作用的新藥。

羅勒多糖與紫杉醇藥物合用可提高線粒體膜通透性,使胞漿內(nèi)鈣離子濃度明顯升高，同時(shí)線粒體膜電位下降,通過(guò)影響細(xì)胞周期促進(jìn)細(xì)胞凋亡,增強(qiáng)化療效果[24]。羅勒多糖能增強(qiáng)紫杉醇對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞株增殖的抑制作用,增強(qiáng)化療效果,這種增效作用使胞漿內(nèi)鈣離子濃度升高、線粒體膜電位下降、影響細(xì)胞周期，從而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡增加[25]。石煥等[26]發(fā)現(xiàn)羅勒多糖可通過(guò)下調(diào)MT1-MMP的表達(dá)抑制MDA-MB-231細(xì)胞的侵襲。

2.5 抗卵巢癌作用

羅勒多糖通過(guò)上調(diào)VEGFR2在SKOV3細(xì)胞的表達(dá)介導(dǎo)，從而抑制卵巢癌細(xì)胞SKOV3細(xì)胞的侵襲能力[27]。羅勒多糖抗卵巢癌轉(zhuǎn)移的作用機(jī)理與降低骨橋蛋白表達(dá)、抑制基質(zhì)金屬蛋白酶-2的分泌、降低卵巢癌細(xì)胞侵襲運(yùn)動(dòng)能力等因素有關(guān)[28]。

張丹等[29]觀察分析羅勒多糖對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因SEMA4C表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)其下調(diào)腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因SEMA4C的表達(dá)，機(jī)制可能是抗卵巢癌淋巴道轉(zhuǎn)移。王婷等[30]發(fā)現(xiàn)羅勒多糖能夠促進(jìn)人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3的凋亡，抑制SKOV3細(xì)胞增殖，常氧環(huán)境下羅勒多糖作用相反。張妲等[31]通過(guò)觀察分析羅勒多糖對(duì)人卵巢癌SKOV3細(xì)胞骨架及SEMA4C表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)可以改變卵巢癌SKOV3細(xì)胞微絲和微管系統(tǒng)，也可抑制卵巢癌細(xì)胞中SEMA4CmRNA和蛋白的表達(dá)，且隨著藥物濃度的增大，抑制作用越明顯。

呂靜等[32]研究羅勒多糖及姜黃素對(duì)卵巢癌細(xì)胞系SKOV3遷移活性的影響和機(jī)制，發(fā)現(xiàn)羅勒多糖雖可通過(guò)影響OPN及MMP9通路抑制SKOV3細(xì)胞的遷移，但其與姜黃素可能利用不同的OPN配體。羅勒多糖與姜黃素對(duì)人外周血來(lái)源DCs遷移活性的影響存在差異，體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)羅勒多糖在抑制腫瘤細(xì)胞遷移活性的同時(shí)，不影響DCs的遷移活性，羅勒多糖可能成為有效的抗腫瘤轉(zhuǎn)移制劑的候選藥物。

2.6 抗乳腺癌作用

郭文菁等[33]探討羅勒多糖對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株對(duì)金屬蛋白酶組織抑制劑表達(dá)的影響及對(duì)TIMPs的作用，發(fā)現(xiàn)羅勒多糖在不同含氧環(huán)境對(duì)MDA-231細(xì)胞及TIMPs基因表達(dá)的影響效應(yīng)存在差異，提示設(shè)計(jì)抗腫瘤藥物及生物療法機(jī)制應(yīng)考慮氧環(huán)境的影響。

2.7 降血糖血脂作用

陳峰等[34]研究海南羅勒水提取物和羅勒多糖的降糖作用，發(fā)現(xiàn)兩者降糖作用無(wú)明顯差異，羅勒多糖具有較弱的降血脂作用，其水提取物低劑量組、中劑量組具有顯著的降血脂作用。

2.8 其他作用

于華靜等[35]通過(guò)羅勒多糖作用荷瘤小鼠化療的實(shí)驗(yàn)觀察，發(fā)現(xiàn)羅勒多糖能增強(qiáng)紫杉醇的抑瘤作用和提高小鼠生存率，且對(duì)肝腎無(wú)損傷。

3 展望

羅勒植物資源豐富，作為藥食兩用的植物應(yīng)用歷史悠久，具有獨(dú)特的藥理作用。羅勒對(duì)蚊蟲(chóng)叮咬部位有特殊的消炎、止癢和鎮(zhèn)痛效果，通過(guò)動(dòng)物模型及對(duì)腫瘤細(xì)胞系作用效果的研究，發(fā)現(xiàn)羅勒多糖具有抗肝癌、抗肺癌、抗卵巢癌等多種生物活性，對(duì)進(jìn)一步綜合開(kāi)發(fā)和臨床推廣應(yīng)用有著重要的現(xiàn)實(shí)意義。