非正常食用油鑒別新方法（一）：三種辣椒堿殘留量的液相色譜-質(zhì)譜分析

王龍星，金靜，王淑秋，等

摘要：目的：近年來，把非正常食用油（俗稱地溝油）摻入合格食用油中以獲取利益的行為屢禁不止，成為當(dāng)前我國食品安全領(lǐng)域亟須解決的問題。目前地溝油精制工藝也在不斷發(fā)展：通過白土吸附、脫色、水洗、真空高溫除臭等步驟地溝油中存在的大部分常規(guī)雜質(zhì)被去除，另外地溝油往往被摻入正常的食用油中進行出售，進一步降低指標(biāo)物質(zhì)的含量，增加了檢測難度。這種情況導(dǎo)致剛提出的多種鑒別指標(biāo)又失效了，新的地溝油檢測方法仍是國內(nèi)當(dāng)前的研究熱點。首次提出通過檢測食用油中的特異痕量外源成分：辣椒堿來完成地溝油的檢測鑒別，并發(fā)展了相應(yīng)的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。方法：0.5 g油樣加500 μL二氯甲烷，利用20 g/L氫氧化鈉兩次液液萃取將辣椒堿由油相萃取到水相，調(diào)節(jié)其pH在2～3后，上C18固相萃取小柱進行富集凈化：純水除去無機酸堿，乙腈洗脫辣椒堿。凈化后的樣品以二苯胺為進樣內(nèi)標(biāo)，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（HPLCMS/MS）定量檢測3種不同的辣椒堿目標(biāo)物：天然辣椒素、二氫辣椒素、壬酸香草酰胺。以這3種辣椒堿的含量和＞0.2 ng/g作為地溝油的判別指標(biāo)。結(jié)果：辣椒堿是引起辣味的主要化學(xué)成分，具有脂溶性強、穩(wěn)定性好、沸點高等特點。目前的地溝油精制工藝很難完全去除具有這樣特點的物質(zhì)。正常食用油基本不含辣椒堿，而接觸過辣椒的餐廚廢棄油脂難以避免地含有這類成分。因此辣椒堿類成分可作為鑒別餐廚廢棄油脂的特征指標(biāo)。目前餐飲業(yè)辣味調(diào)料基于兩種原料：天然辣椒及由人工合成的壬酸香草酰胺，而天然辣椒中以天然辣椒素及二氫辣椒素的含量最大?；谏鲜銮闆r將這3種辣椒堿確定為檢測目標(biāo)。辣椒堿在中性條件下的脂溶性強，而在強堿性條件下其結(jié)構(gòu)中的酚羥基解離，水溶性強，借助這個特點可實現(xiàn)辣椒堿與主體油脂的分離。首先通過堿性水溶液進行液液萃??；調(diào)節(jié)水相pH值后再通過固相萃取技術(shù)，實現(xiàn)辣椒堿的富集，并除去無機酸、無機堿及殘留的油脂。經(jīng)過這樣的分離富集步驟，不僅提高了靈敏度，減小了基體干擾，同時也避免了殘留油脂對色譜柱及質(zhì)譜儀器的污染和損傷。本方法的回收率在85%～93%，精密度＜10%，檢出限為 0.05 ng/g。實際測定結(jié)果表明本方法陽性樣品識別率達(dá)75%，陰性樣品識別率100%，假陽性率為零。68個盲樣的總體識別正確率達(dá)到82%以上。結(jié)論：通過對食用油中痕量辣椒堿的檢測，提出了一種新的地溝油識別方法。該方法識別率高，假陽性率為零，對 68個實際油樣的分析取得了良好的效果。目前，本方法已經(jīng)成為國家衛(wèi)生部推薦的4種地溝油儀器檢測方法之一。

來源出版物：色譜, 2012, 30(11)： 1094-1099

入選年份：2016

超聲輔助分散液液微萃取-高效液相色譜測定水樣中的4種鄰苯二甲酸酯類增塑劑

馬燕玲，陳令新，丁養(yǎng)軍，等

摘要：目的：鄰苯二甲酸酯類化合物（PAEs），又稱鈦酸酯，是目前最廣泛使用的增塑劑。此類化合物在環(huán)境中難以降解，已成為全球最普遍的環(huán)境污染物之一。同時，它們也是一類內(nèi)分泌破壞性物質(zhì)，表現(xiàn)出生物累積性，可以改變?nèi)梭w中的雌激素水平，從而導(dǎo)致嚴(yán)重的健康問題。鑒于 PAEs對人類生命安全存在極大的潛在危害性，因而對于 PAEs的安全衛(wèi)生性檢測顯得十分必要和迫切。分散液液微萃取（DLLME）因其具有所需萃取溶劑量小、萃取速度快、萃取效率和富集倍數(shù)高、操作簡便、消耗樣品量低和環(huán)境友好等優(yōu)點，已發(fā)展成為一種極具潛力的分離富集技術(shù)。以4種典型的PAEs類物質(zhì)（鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二正辛酯（DnOP））為研究對象，采用DLLME并加以超聲輔助（UA）對樣品進行富集濃縮前處理，加速不互溶的兩相之間的質(zhì)量傳遞，使得萃取效率可在最小的溶劑使用量和最短的時間內(nèi)得到快速的提高；隨后，采用高效液相色譜（HPLC）進行分離測定；從而，建立一種簡便、快捷、實用的測定水體中 PAEs類增塑劑的分析方法。方法：采用超聲輔助分散液液微萃取技術(shù)結(jié)合高效液相色譜法（UA-DLLME-HPLC）對4種PAEs（DMP、DEP、DBP、DnOP）進行富集、檢測，并進行實際水樣分析。實驗中采用富集因子來評價萃取效率，考察并優(yōu)化影響萃取效率的主要因素，包括萃取劑類型和用量、分散劑類型和用量、超聲時間、離子強度、萃取時間和pH值等。采用公式EF=Csed/C0計算富集因子（enrichment factor，EF），以此評價不同萃取條件下的萃取效率。其中，Csed為萃取沉積相中PAEs的質(zhì)量濃度（g/L）；C0為水樣中 PAEs的質(zhì)量濃度（g/L）。經(jīng)考察優(yōu)化，選定CCl4為樣品前處理的萃取劑、乙腈為分散劑；萃取劑CCl4的用量為40 μL、分散劑乙腈的用量為1.0 mL；超聲時間為5 min；加入NaCl的濃度為30 g/L。另外，實驗發(fā)現(xiàn)萃取效率隨萃取時間的變化和pH值的改變并無明顯改變。因此，僅需在體系中加入適量的分散劑、萃取劑和鹽，超聲5 min后，離心即可（5 min，4000 rpm）。優(yōu)化的色譜分析條件為：色譜分離柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；進樣量：10 μL；檢測波長：225 nm；流動相：甲醇-超純水；梯度洗脫程序：0～3 min內(nèi)85%甲醇，3～10 min內(nèi)85%甲醇線性變化至100%甲醇，10～20 min內(nèi)100%甲醇；流速：1.0 mL/min。結(jié)果：在優(yōu)化的萃取和色譜條件下，4種PAEs在18.5 min內(nèi)完成基線分離，得到4種PAEs的工作曲線的線性相關(guān)系數(shù)為0.9935～0.9998，線性關(guān)系良好。獲得DMP、DEP、DBP和 DnOP的富集因子分別為 71、144、169和159，說明此法對此4種PAEs有較大程度的富集。檢出限分別為3.78、1.77、3.07和3.30 μg/L，遠(yuǎn)低于《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定限值，因此有望發(fā)展該法實現(xiàn)實際水樣中 PAEs的有效分析和監(jiān)控。日內(nèi)與日間保留時間和峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSDs）值較低，且均低于或者接近文獻報道值，表明該法對 4種 PAEs的檢測具有良好的精密度。利用該法對實驗室自來水、某品牌礦泉水及湖水進行實際富集分析，3個加標(biāo)濃度所獲得的加標(biāo)回收率在 82.99%～114.47%之間，RSDs在 1.93%～8.31%之間，結(jié)果滿意。結(jié)論：建立的 UADLLME-HPLC方法具有操作簡便、萃取速度快、萃取效率和富集倍數(shù)高、試劑和樣品消耗量少、重現(xiàn)性好、環(huán)境友好等優(yōu)點，能夠測定實際水樣中的PAEs，有一定的實用參考價值。

來源出版物：色譜, 2013, 31(2)： 155-161

入選年份：2016

高效液相色譜-線性離子阱/靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜法快速篩查和確證紡織品中禁用的偶氮染料

云環(huán)，劉鑫，王靜，等

摘要：目的：偶氮染料幾乎分布于所有顏色，廣泛用于紡織品、皮革制品等染色及印花工藝，用致癌芳香胺合成的偶氮染料在人體內(nèi)易發(fā)生還原裂解釋重新放出致癌芳香胺產(chǎn)生致癌作用，德國、歐盟、日本及我國均規(guī)定紡織品中禁止使用偶氮染料。靜電場軌道阱（orbitrap）高分辨質(zhì)譜具有質(zhì)量分辨率高和精確分子量的功能，在全掃描模式下采集的數(shù)據(jù)可以根據(jù)檢測需求反復(fù)調(diào)用，由此彌補傳統(tǒng)低分辨質(zhì)譜方法無法應(yīng)對法規(guī)更新頻繁的不足；其數(shù)據(jù)依賴性掃描（data-dependent scan）可以在篩查的同時，通過碎片離子進行定性確證。應(yīng)用高效液相色譜-線性離子阱/靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜儀（HPLC-LTQ/Orbitrap）建立了快速篩查確證紡織品中禁用偶氮染料的方法。方法：樣品在檸檬酸緩沖液中由連二亞硫酸鈉還原成芳香胺，經(jīng)硅藻土提取柱凈化后，用Acquity UPLC BEH C18柱（1.7 μm，2.1 mm×50 mm）分離，以甲醇和 0.1%（v/v）甲酸作為流動相進行梯度洗脫，電噴霧正離子（ESI＋）模式電離，高分辨質(zhì)譜一級全掃描用于篩選分析，數(shù)據(jù)依賴掃描模式的二級CID譜圖用于確證。結(jié)果：考察了不同還原時間、萃取試劑對前處理效果的影響，優(yōu)化了色譜條件中所選用的流動相體系，比較了不同碰撞誘導(dǎo)解離（CID）電壓對電離結(jié)果的影響，建立了紡織品中 21種致癌芳香胺分析的方法，并對方法進行了評價。最終確定還原時間為30 min，選用叔丁基甲醚作為萃取劑，流動相中加入甲酸，CID電壓在35%時21種芳香胺分別得到各自特征的碎片，且分子離子峰和特征碎片離子峰的豐度比例相對穩(wěn)定，可以達(dá)到對待測物質(zhì)的定性及定量要求。配制混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進行測定，在0.05～2.00 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r≥0.99）。在空白樣品中進行加標(biāo)實驗，確定該方法的檢測低限可達(dá)到0.08 mg/kg。在棉、滌綸兩種樣品中添加 21種致癌芳香胺的標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加水平分別為0.5、1.0和2.0 mg/kg，每個添加水平平行測定6次，回收率范圍在 65.5%～111.5%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為 0.87%～2.49%。將建立的方法應(yīng)用于 50份實際紡織品樣品，檢出2份樣品含有對氯苯胺，1份含有聯(lián)苯胺和3,3′-二氯聯(lián)苯胺，1份含有2-萘胺，其余樣品未檢出。結(jié)論：建立的紡織品中禁用偶氮染料的快速、高通量的檢測方法，在8 min內(nèi)完成了對21種致癌芳香胺的篩查和確證，將高效液相色譜-線性離子阱/靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜首次應(yīng)用到紡織品檢測領(lǐng)域，獲得了滿意的分離效果和檢測靈敏度。方法的檢測低限滿足國內(nèi)外相關(guān)禁用偶氮染料的檢測要求，可作為一種快速篩查和確證檢測技術(shù)廣泛使用。

來源出版物：色譜, 2013, 31(9)： 845-849

入選年份：2016