張 兵，戴偉鋒，李寶才，張 敉

(昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，云南昆明650500)

橐吾屬(LigulariaCass.)中多種植物的根或根莖常以紫苑和山紫苑之名入藥[1]，主治支氣管炎、咳嗽、肺結(jié)核、出血、肝炎及疼痛等癥[2]。 但尚無(wú)舟葉橐吾〔L.cymbulifera(W. W.Smith) Hand.-Mazz.〕藥用方面的記載。 柳春梅[3]從舟葉橐吾根中分離并鑒定出的部分沒(méi)藥烷型倍半萜對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌等有一定的抑菌活性，對(duì)人肝癌細(xì)胞株BEL-7402 也有一定的抑制作用。 為豐富舟葉橐吾化合物庫(kù)，作者對(duì)舟葉橐吾全草乙醇提取物進(jìn)行化學(xué)成分研究，以期為該植物的活性研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

供試舟葉橐吾全草于2016 年7 月采自云南麗江周圍山脈，經(jīng)昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院向誠(chéng)副教授鑒定。

主要儀器和試劑：Bruker HD 600M 型核磁共振儀(德國(guó)Bruker 公司)；Agilent 1200 Series 液相色譜儀(美國(guó)Agilent 公司)；LC3000 型液相色譜儀(北京創(chuàng)新通恒科技有限公司)；Sephadex LH-20(20～100 μm)和MCI GEL CHP20P(75 ～150 μm)(瑞典Pharmacia 公司)；薄層層析硅膠板(TLC)和柱層析用硅膠(100～200 及200～300 目)(青島海洋化工有限公司)。

1.2 方法

舟葉橐吾全草通風(fēng)干燥后剪碎，稱取7.5 kg 樣品，用體積分?jǐn)?shù)95%乙醇回流提取7 次，每次6 h，乙醇提取液經(jīng)減壓蒸餾濃縮后得到總浸膏590.6 g(得率7.9%)；用1 000 mL 蒸餾水將總浸膏混懸，依次用等體積的石油醚和乙酸乙酯萃??；萃取液經(jīng)減壓蒸餾濃縮后，分別得到石油醚部分189.9 g，乙酸乙酯部分106.5 g。 石油醚部分經(jīng)硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯(體積比10 ∶1至1 ∶5)梯度洗脫得到Fr.1 至Fr.9 共9個(gè)部分，其中，F(xiàn)r.4(4.0 g)經(jīng)MCI 柱，用甲醇-水溶液(體積比1 ∶9至9 ∶1)梯度洗脫、凝膠柱以及半制備型HPLC 分離得到化合物2(5.8 mg)、化合物3(1.4 mg)、化合物5(1.2 mg)、化合物6(1.3 mg)、化合物9(1.0 mg)和化合物11(3.3 mg)；Fr.7(3.6 g)經(jīng)MCI 柱，用甲醇-水溶液(體積比1 ∶9至9 ∶1)梯度洗脫得到Fr.7.1 至Fr.7.8 共8 個(gè)組分；Fr.7.3 經(jīng)半制備型HPLC 分離得到化合物1(1.3 mg)和化合物4(1.2 mg)。 乙酸乙酯部分經(jīng)硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯混合溶液(體積比10 ∶1至1 ∶5)梯度洗脫得到Fr.A 至Fr.I 共9 個(gè)部分，其中，F(xiàn)r.E(1.6 g)經(jīng)MCI 柱，用甲醇-水溶液(體積比1 ∶9至9 ∶1)梯度洗脫和半制備型HPLC 分離得到化合物7(23.6 mg)、化合物8(1.5 mg)和化合物10(1.8 mg)。 經(jīng)1D NMR 核磁數(shù)據(jù)分析及參考文獻(xiàn)比對(duì)確定化合物結(jié)構(gòu)。

2 結(jié) 果

化合物1：白色無(wú)定形粉末；C30H30O8；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黃色斑點(diǎn)；1H-NMR(CDCl3，600 MHz) δ：2.12-2.20(2H，m，H-1，1′)，2.32-2.37(2H，m，H-1，1′)，1.68-1.72(2H，m，H-2)，2.02-2.09(2H，m，H-2′)，6.84(2H，m，H-2′)，6.84(1H，t，J=3.2 Hz，H-3，3′)，5.12(1H，br.s，H-6，6′)，1.27-1.34(2H，m，H-9，9′)，2.37-2.41(2H，m，H-9，9′)，2.57-2.61(1H，m，H-10，10′)，1.97(3H，d，J=2.4 Hz，H-13，13′)，1.48(3H，s，H-15，15′)；13CNMR(CDCl3，150 MHz) δ：21.2(C-1，1′)，21.9(C-2，2′)，136.7(C-3，3′)，129.6(C-4，4′)，44.3(C-5，5′)，82.9(C-6，6′)，157.4(C-7，7′)，87.3(C-8，8′)，35.2(C-9，9′)，32.1(C-10，10′)，128.6(C-11，11′)，171.0(C-12，12′)，10.1(C-13，13′)，168.4(C-14，14′)，26.2(C-15，15′)。 結(jié)合文獻(xiàn)[4]，鑒定其為8β-[eremophila-3′，7′(11′)-diene-12′，8′α；14′，6′αdiolide]eremophila-3，7(11)-diene-12，8α；14，6α-diolide。

化合物2：白色無(wú)定形粉末；C15H16O5；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黃色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz) δ：1.68-1.72(2H，m，H-1)，2.19-2.23(2H，m，H-1)，2.34-2.39(2H，m，H-2)，2.40-2.42(2H，m，H-2)，6.87(1H，dd，J=3.6，3.2 Hz，H-3)，5.24(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，1.35(2H，t，J=13.6 Hz，H-9)，2.24(2H，dd，J=13.6，4.8 Hz，H-9)，2.02-2.07(1H，m，H-10)，1.95(3H，d，J=2.0 Hz，H-13)，1.44(3H，s，H-15)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz) δ：21.0(C-1)，21.4(C-2)，137.6(C-3)，129.4(C-4)，43.8(C-5)，82.5(C-6)，154.9(C-7)，103.2(C-8)，36.1(C-9)，33.5(C-10)，125.5(C-11)，171.6(C-12)，7.5(C-13)，25.6(C-14)，169.4(C-15)。 結(jié)合文獻(xiàn)[5]，鑒定其為8β-hydroxyeremophil-3，7(11)-diene-8α，12(6α，15)-diolide。

化合物3：白色無(wú)定形粉末；C16H18O5；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黃色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz) δ：1.68-1.74(2H，m，H-1)，2.14-2.20(2H，m，H-1)，2.32-2.37(2H，m，H-2)，2.37-2.43(2H，m，H-2)，6.87(1H，dd，J=3.6，3.2 Hz，H-3)，5.06(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，1.30(2H，t，J=13.2 Hz，H-9)，2.23(2H，dd，J=13.2，4.8 Hz，H-9)，2.02-2.07(1H，m，H-10)，2.02(3H，d，J=2.0 Hz，H-13)，1.43(3H，s，H-15)，3.23(3H，s，H-16)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz) δ：20.9(C-1)，21.3(C-2)，137.6(C-3)，129.4(C-4)，43.8(C-5)，82.3(C-6)，153.0(C-7)，105.7(C-8)，35.0(C-9)，32.9(C-10)，127.7(C-11)，170.6(C-12)，7.6(C-13)，25.6(C-14)，169.2(C-15)，49.8(C-16)。 結(jié)合文獻(xiàn)[5]，鑒定其為8β-methoxyeremophil-3，7(11)-diene-8α，12(6α，15)-diolide。

化合物4：白色無(wú)定形粉末；C15H16O4；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黃色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz) δ：1.74(2H，m，H-1)，2.04(2H，m，H-1)，2.23(2H，m，H-2)，2.33(2H，m，H-2)，6.85(1H，dd，J=3.6，3.0 Hz，H-3)，5.14(1H，br.s，H-6)，4.68(1H，dd，J=9.3，4.2 Hz，H-8)，1.08(2H，m，H-9)，2.23(2H，m，H-9)，2.15(1H，m，H-10)，2.00(3H，br.s，H-13)，1.42(3H，s，H-15)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz) δ：21.3(C-1)，21.6(C-2)，137.4(C-3)，129.5(C-4)，43.9(C-5)，77.9(C-6)，158.1(C-7)，82.1(C-8)，32.7(C-9)，33.1(C-10)，123.4(C-11)，174.3(C-12)，7.9(C-13)，169.3(C-14)，25.5(C-15)。 結(jié)合文獻(xiàn)[6]，鑒定其為(8βH)-eremophila-3，7(11)-diene-12，8α；14，6α-diolide。

化合物5：白色無(wú)定形粉末；C14H14O3；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為藍(lán)色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz) δ：6.24(1H，d，J=9.4 Hz，H-3)，5.47(1H，th，J=6.0，1.5 Hz，H-8)，7.88(1H，d，J=9.4 Hz，H-4)，7.52(1H，d，J=8.6 Hz，H-5)，6.90(1H，m，H-6)，4.04(2H，q，J=7.1Hz，H-1′)，1.28(1H，t，J=7.1 Hz，H-2′)，1.79(6H，dd，J=12.4，1.3 Hz，H-4′，5′)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz) δ：162.4(C-2)，113.0(C-3)，144.4(C-4)，128.9(C-5)，112.5(C-6)，162.0(C-7)，101.0(C-8)，155.7(C-9)，111.8(C-10)，65.1(C-1′)，118.8(C-2′)，138.3(C-3′)，16.8(C-4′)，24.4(C-5′)。 結(jié)合文獻(xiàn)[7]，鑒定其為7-(3-methylbut-2-enoxy)umbelliferone。

化合物6：白色無(wú)定形粉末；C9H6O3；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為藍(lán)色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz) δ：6.14(1H，d，J=9.5 Hz，H-3)，7.86(1H，d，J=9.5Hz，H-4)，7.46(1H，d，J=8.5 Hz，H-5)，6.71(1H，dd，J=8.5，2.5 Hz，H-6)，6.65(1H，d，J=2.5 Hz，H-8)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz) δ：162.4(C-2)，111.5(C-3)，144.7(C-4)，129.2(C-5)，113.3(C-6)，161.6(C-7)，102.0(C-8)，155.9(C-9)，110.6(C-10)。 結(jié)合文獻(xiàn)[8]，鑒定其為7-羥基香豆素(umbelliferone)。

化合物7：白色無(wú)定形粉末；C22H26O8；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黃色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz) δ：7.14(2H，s，-OH，4′，4″)，6.66(4H，s，H-2′，6′，2″，6″)，4.66(2H，d，J=6.2 Hz，H-2，6)，4.12-4.29(2H，m，H-4α，8α)，3.81(2H，m，H-4β，8β)，3.80(12H，s，H-3′，5′，3″，5″)，2.99-3.16(2H，m，H-1，5)；13C-NMR(CD3OD，150MHz) δ：55.5(C-1，5)，87.6(C-2，6)，72.7(C-4，8)，133.1(C-1′，1″)，104.4(C-2′，6′，2″，6″)，149.3(C-3′，5′，3″，5″)，136.1(C-4′，4″)。 結(jié)合文獻(xiàn)[9]，鑒定其為丁香脂素〔(+)-syringaresinol〕。

化合物8：黃色油狀物；C18H14O8；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為紫色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600

MHz) δ：4.42(1H，d，J=10.5 Hz，H-4)，4.69(1H，d，J=10.5 Hz，H-4)，7.58(1H，s，H-6)，7.28(1H，d，J=2.1 Hz，H-2′)，6.69(1H，d，J=8.4 Hz，H-5′)，7.22(1H，dd，J=8.4，2.1 Hz，H-6′)，7.08(1H，d，J=2.4 Hz，H-2″)，6.65(1H，d，J=8.4Hz，H-5″)，7.00(1H，dd，J=8.4，2.4 Hz，H-6″)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz) δ：173.5(C-1)，150.2(C-2)，81.7(C-3)，79.0(C-4)，197.2(C-5)，145.8(C-6)，126.3(C-1′)，116.1(C-2′)，146.1(C-3′)，152.6(C-4′)，115.5(C-5′)，124.0(C-6′)，126.3(C-1″)，119.5(C-2″)，146.2(C-3″)，150.3(C-4″)，117.3(C-5″)，126.6(C-6″)。 結(jié)合文獻(xiàn)[10]，鑒定其為actaealactone。

化合物9：黃色油狀物；C15H16O2；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為藍(lán)色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600

MHz) δ：2.86(2H，dd，J=9.3，6.0 Hz，H-8)，3.78(3H，s，H-15)，6.26(1H，t，J=2.1 Hz，H-4)，6.30(1H，br.t，J=1.8 Hz，H-2)，6.32(1H，br.t，J=2.0 Hz，H-6)，7.24(3H，m，H-10，12，14)，7.32(2H，t，J=7.5 Hz，H-11，13)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz) δ：37.5(C-8，-CH2)，37.9(C-7，-CH2)，55.2(C-15)，99.0(C-4)，106.8(C-2)，107.9(C-6)，125.9(C-12)，128.4(C-11，13)，128.3(C-10，14)，141.6(C-9)，144.5(C-1)，156.5(C-5)，160.8(C-3)。 結(jié)合文獻(xiàn)[11]，鑒定其為3-hydroxy-5-methoxybibenzyl。化合物10：黃色油狀物；C14H18O6；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為藍(lán)色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600MHz) δ：6.68(2H，s，H-2′，6′)，5.30(1H，s，H-6)，4.39(2H，m，H-2，8a)，5.30(1H，s，H-6)，4.39(2H，m，H-2，8a)，5.30(1H，s，H-6)，4.39(2H，m，H-2，8a)，4.15(1H，m，H-4a)，3.93(1H，m，H-8b)，3.55(1H，m，H-4b)，3.88(6H，s，-OCH3，3′，5′)，3.03(1H，m，H-5)，2.93(1H，m，H-1)；13CNMR(CD3OD，150 MHz) δ：54.0(C-1)，88.9(C-2)，72.5(C-4)，55.0(C-5)，103.0(C-6)，132.9(C-1′，4′)，149.3(C-3′，5′)，104.5(C-2，6′)，56.7(-OCH3，3′，5′)。 結(jié)合文獻(xiàn)[12]，鑒定其為6-羥基-2-(4′-羥基-3′，5′-二甲氧基苯基)-3，7-二氧雜雙環(huán)-[3.3.0]-辛烷〔6-hydroxy-2-(4′-hydroxy-3′，5′-dimethoxyphenyl)-3，7-dioxa-bicyclo-octane〕?；衔?1：褐色油狀物；C16H20O7；TLC 經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為紫色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600MHz) δ：3.99(1H，dt，J=10.1，5.6 Hz，H-1)，3.73(1H，dt，J=10.1，6.8 Hz，H-1)，1.97(2H，m，H-2)，4.63(1H，t，J=7.1Hz，H-3)，1.97(3H，s，H-10)，4.26(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz) δ：66.7(C-1)，38.9(C-2)，60.0(C-3)，79.2(C-4)，69.6(C-5)，64.6(C-6)，60.0(C-7)，64.9(C-8)，78.0(C-9)，3.7(C-10)，104.4(C-1′)，75.0(C-2′)，78.1(C-3′)，71.6(C-4′)，77.9(C-5′)，62.7(C-6′)。 結(jié)合文獻(xiàn)[13]，鑒定其為bidensyneoside B。

本研究從舟葉橐吾全草乙醇提取物中分離鑒定出1 個(gè)艾里莫芬烷型倍半萜二聚體(化合物1)、3 個(gè)艾里莫芬烷型倍半萜(化合物2、化合物3 和化合物4)、2 個(gè)香豆素(化合物5 和化合物6)、2 個(gè)木脂素(化合物7 和化合物8)、2 個(gè)芳香族類化合物(化合物9 和化合物10)及1 個(gè)五聚乙炔葡糖苷(化合物11)，均首次從舟葉橐吾中分離獲得。