符海郯，張倩睿，吳方建

（長江航運(yùn)總醫(yī)院·武漢腦科醫(yī)院，湖北 武漢 430019）

隨著中藥標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范化的要求逐漸提高，中藥材及其成方制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)由過去的定性鑒別為主，發(fā)展到對其中單個有效成分的定量檢測，再到同時測定多成分、多靶點(diǎn)的整體質(zhì)量評價。各種新型分析儀器、新技術(shù)及方法的應(yīng)用也使得中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)朝著可控制、穩(wěn)定化、全面化的方向發(fā)展[1]?，F(xiàn)對近年來發(fā)展迅速的現(xiàn)代分析技術(shù)在中藥質(zhì)量控制中的應(yīng)用進(jìn)行分析和展望。

1 中藥快速檢測技術(shù)

1.1 離子遷移譜（IMS）

IMS是基于離子化的樣品分子在大氣壓電場作用下進(jìn)行遷移的分離檢測技術(shù)[2]。其僅需幾十毫秒即可完成單次分析，具有靈敏度高、分析速度快、便于攜帶等優(yōu)勢，被廣泛應(yīng)用于排查毒品、爆炸物、污染物等領(lǐng)域。隨著IMS技術(shù)的發(fā)展，IMS逐漸用于藥品、食品、化妝品安全檢測等方面[3-6]。目前，國內(nèi)已有學(xué)者成功建立并應(yīng)用IMS法快速篩查中藥材與中成藥中的非法添加物質(zhì)。李夢嬌等[2]將收集的抗風(fēng)濕中成藥樣品進(jìn)行簡單的前處理后，以IMS法檢測非法添加的5種非甾體抗炎藥（NSAIDs），研究其遷移行為，成功建立相應(yīng)現(xiàn)場快速篩查方法。IMS與質(zhì)譜（MS）、液相色譜 -質(zhì)譜（LC-MS）系統(tǒng)聯(lián)用可分析復(fù)雜樣品中多殘留物，并提高樣品的容納量。李拓等[7]采用固相萃取-電噴霧高效離子遷移譜（SPE-ESI-HPIMS）法快速檢測紅花中的非法添加色素（檸檬黃、日落黃、金橙Ⅱ、誘惑紅），并進(jìn)行定量測定。結(jié)果顯示，IMS檢測時間均不到20 ms，可實(shí)現(xiàn)紅花中多種非法染色物質(zhì)的快速檢測和定量分析。

1.2 免疫檢測

免疫檢測技術(shù)是基于抗原與抗體的特異性反應(yīng)而建立，對抗原或抗體實(shí)現(xiàn)定性定量檢測的方法[8]。免疫檢測技術(shù)具有快速[9]、自助[10]、成本低廉、易于推廣、安全可靠、操作簡單等優(yōu)勢。目前其在中藥質(zhì)量快速評價、中藥安全性評價（如有毒成分及有害成分、真菌毒素類、農(nóng)藥殘留、重金屬）、中藥品質(zhì)優(yōu)劣快速評價等領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用，其中應(yīng)用最多的免疫檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法及免疫膠體金試紙條（GICA）法。梁月秋等[11]、李汶等[12]研究發(fā)現(xiàn)，ELISA法能有效檢出中藥材與中成藥中黃曲霉毒素B1（AFB1）。楊英等[13]也利用GICA法在蓮子樣品中檢出AFB1污染，且經(jīng)超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（UPLC-MS／MS）法驗(yàn)證排除假陽性和假陰性結(jié)果?，F(xiàn)代分析檢測技術(shù)的開放性和互聯(lián)性不斷加強(qiáng)，GICA法具有面向大眾、簡便快捷、人人可操作等特征，使得中藥質(zhì)量評價“自助-即時”將成為重要發(fā)展方向。張?jiān)絒14]以柴胡皂苷D、葛根素、大黃酸等有效成分為研究對象，建立針對中藥指標(biāo)性成分的免疫層析法，實(shí)現(xiàn)了自助、即時、快速檢測中藥的有效成分。

1.3 近紅外光譜（NIRS）

近紅外光譜（NIRS）法是融合近紅外光譜檢測技術(shù)與化學(xué)計(jì)量學(xué)算法，根據(jù)不同物質(zhì)對近紅外光的吸收特性對物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和組成進(jìn)行定性、定量分析的一門快捷、無損的“綠色”分析技術(shù)[15]。由于大部分中藥化學(xué)成分的基團(tuán)基頻振動的合頻與倍頻吸收都在近紅外區(qū)，因此NIRS在中藥植物藥及復(fù)方制劑有效成分、指標(biāo)性成分、水分、浸出物及揮發(fā)油和礦物藥中有效成分含量測定等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛[16]。馬群等[17]采用NIRS法成功檢出天然牛黃粉中人工牛黃的摻入量。牟倩倩等[18]采用近紅外漫反射光譜法結(jié)合偏最小二乘法（PLS）可同時快速測定紅景天所含水分和紅景天苷含量。敬小麗等[19]建立的紫外-可見-短波近紅外漫反射光譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)，可快速檢測白芷中二氧化硫殘留量。

1.4 表面增強(qiáng)拉曼光譜（SERS）

2 仿生技術(shù)

2.1 電子鼻

電子鼻（EN）由氣體傳感器、信號處理系統(tǒng)和模式識別系統(tǒng)等功能器件組成，可模擬人和動物的嗅覺器官對氣味進(jìn)行感知、分析和判斷，能全面、完整地反映中藥材的“整體氣味特征”，同時具有快捷、靈敏、準(zhǔn)確、無損的優(yōu)點(diǎn)，亦稱“人工嗅覺系統(tǒng)”[23]。電子鼻作為現(xiàn)代仿生分析技術(shù)，逐漸被引入中藥研究領(lǐng)域，如不同藥材、同藥材不同品種、同品種不同產(chǎn)地的鑒別，不同貯藏期的中藥材、中藥氣味成分定量檢測等領(lǐng)域。電子鼻技術(shù)在芳香類、含揮發(fā)性成分較多中藥的質(zhì)量控制中應(yīng)用較多。采用電子鼻技術(shù)建立的氣味指紋圖譜具有模糊性、整體性的特點(diǎn)，可鑒別中藥真?zhèn)?，同時也為中藥氣味質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)化提供了新方法[24]。張超等[25]采用電子鼻技術(shù)建立半夏及其不同種類與比例的摻偽樣品氣味指紋圖譜，實(shí)現(xiàn)了對半夏及其偽品的快速鑒別。藥用植物在不同的生長發(fā)育期間，其有效成分含量是不斷變化的。電子鼻能監(jiān)測不同生長期藥用植物中揮發(fā)性成分含量的變化，從而鑒別不同采收期的藥材[26]。楊慶珍等[27]采用電子鼻技術(shù)結(jié)合超高效液相色譜（UPLC）法對不同生長年限黃芪樣品進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)其有效成分含量與生長年限有關(guān)，為黃芪的采收提供了參考。芳香類中藥及含揮發(fā)性成分的中藥隨著儲藏時間的延長，其有效成分逐漸喪失，最終喪失藥效[26]。電子鼻可用于區(qū)分不同貯藏期的中藥材，XIONG等[28]、鄒慧琴等[29]采用電子鼻分別對不同貯藏期的金銀花、西洋參進(jìn)行氣味檢測，建立了相應(yīng)的質(zhì)量評估方法，結(jié)果均表明，電子鼻技術(shù)能對不同貯藏時間的含揮發(fā)性成分中藥進(jìn)行有效鑒別。

2.2 電子舌

電子舌是由味覺傳感器陣列、信號采集器和模式識別系統(tǒng)組成的新型多傳感器檢測系統(tǒng)，能將味覺信息轉(zhuǎn)化為客觀性、可視化的數(shù)字信息，因此也稱人工味覺識別技術(shù)或味覺傳感器技術(shù)[30]?！八臍馕逦丁笔侵兴幩幮缘暮诵睦碚?，電子舌技術(shù)在中藥“味”的質(zhì)控分析中逐漸成為熱點(diǎn)[31]。杜瑞超等[32]研究發(fā)現(xiàn)，電子舌技術(shù)能對不同味覺的中藥或相同味覺的不同中藥進(jìn)行聚類分析。吳飛等[33]研究發(fā)現(xiàn)，電子舌技術(shù)能較好地鑒別不同產(chǎn)地的枳實(shí)?；鸷蚴侵兴幣谥浦械暮诵睦碚?，黎量等[34]研究發(fā)現(xiàn)，電子舌技術(shù)能很好地區(qū)分山楂及其炮制品。

2.3 電子眼

電子眼是由圖像采集、數(shù)字圖像處理和結(jié)果反饋功能組成的新型智能色彩測量及視覺傳感系統(tǒng)，是分析樣品顏色、顏色分布等視覺參數(shù)的儀器，具有測量簡便、精度高、重復(fù)性良好的優(yōu)勢[35]。中藥的性狀鑒別主要包括形狀、質(zhì)地、顏色等的鑒別，而在中藥的炮制過程中，顏色是評估炮制品質(zhì)量的一個重要指標(biāo)，準(zhǔn)確判別中藥的顏色是中藥性狀鑒別和炮制質(zhì)量控制中非常重要而又相對困難的一環(huán)[36]。利用精準(zhǔn)的色彩檢測分析能力及良好的重復(fù)性，電子眼技術(shù)在中藥性狀鑒別和炮制質(zhì)量控制等方面擁有廣闊的應(yīng)用前景。張曉等[37]的研究結(jié)果表明，穿心蓮電子眼采集數(shù)據(jù)的主成分分析（PCA）結(jié)果與含量測定結(jié)果具有高度相關(guān)性，說明電子眼可用于區(qū)分穿心蓮藥材質(zhì)量的優(yōu)劣。段金芳等[38]采用一測多評法結(jié)合電子眼和電子舌技術(shù)對山茱萸藥材及飲片進(jìn)行顏色與滋味的測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，山茱萸最佳蒸制時間為4 h，實(shí)現(xiàn)了多技術(shù)在中藥炮制質(zhì)量控制中的聯(lián)用。

3 指紋圖譜技術(shù)

中藥成方制劑藥味多，藥量大，單一成分測定不能全面、綜合地評價其質(zhì)量，且受到方劑的整體物質(zhì)群難控制等因素的制約，中藥及其制劑的質(zhì)量評價一直是研究的難點(diǎn)[39]。中醫(yī)中藥治療疾病講究整體協(xié)同性，故研究制訂中藥及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)也須具備科學(xué)性、整體性。中藥指紋圖譜具有中藥物質(zhì)群整體性、模糊性的特點(diǎn)，能較全面地反映中藥所含的復(fù)雜化學(xué)信息，符合我國傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論觀念[40]。中藥指紋圖譜目前廣泛用于評價中藥及其成方制劑質(zhì)量，對于提高其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有重要意義[41]。中藥指紋圖譜中常運(yùn)用到光譜法、色譜法及聯(lián)用技術(shù)。陳斌等[42]利用近紅外光譜分析法對六味地黃丸進(jìn)行分析，成功建立了該制劑指紋圖譜的相似度與近紅外光譜的數(shù)學(xué)模型。符繼紅等[43]建立了不同產(chǎn)地麻黃藥材的高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜，為鑒別麻黃藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣提供了有力依據(jù)。劉偉等[44]建立了懷菊花的氣相色譜（GC）指紋圖譜，確定了27個共有峰，10批樣品指紋圖譜與對照圖譜相似度均大于0.9，且方法簡單、重復(fù)性好。指紋圖譜聯(lián)用技術(shù)具有集2種及以上的分析儀器優(yōu)勢的特點(diǎn)，還能用于分析檢測成分復(fù)雜且指紋特征信號較弱的樣品[45]。劉光大等[46]采用高效液相色譜-二極管陣列檢測-四極桿串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜（HPLC-DAD-QTOF-MS）聯(lián)用法建立了大株紅景天膠囊的指紋圖譜，確定了21個共有峰，10批樣品相似度均大于0.940，方法精密度、穩(wěn)定性和重復(fù)性均良好。

4 一測多評法

中藥多指標(biāo)成分同步質(zhì)量評價模式對于中藥現(xiàn)代化的發(fā)展起著重要作用。王智民等[47]提出的一測多評法能解決對照品缺乏的難題并節(jié)約檢測成本，實(shí)現(xiàn)對中藥及其制劑的多成分質(zhì)量控制。目前，該方法在中藥質(zhì)量控制領(lǐng)域中越來越受到重視，并得到了快速發(fā)展，2015年版《中國藥典（一部）》已收錄黃連藥材的一測多評法。朱粉霞等[48]用一測多評法同時測定金銀花復(fù)方制劑中新綠原酸、綠原酸和隱綠原酸的含量。劉永利等[49]選擇咳喘靈片為研究對象，采用HPLC法建立了測定喘寧片5種生物堿類成分的一測多評法，方法可行、準(zhǔn)確。LI等[50]采用HPLC法建立了測定綠茶提取物中茶氨酸的一測多評法。國內(nèi)有些學(xué)者利用一測多評法能節(jié)約對照品的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合指紋圖譜整體性的特點(diǎn)，取長補(bǔ)短，建立了更科學(xué)的中藥質(zhì)量控制模式[51]，林芳等[52]在杜仲多指標(biāo)HPLC指紋圖譜基礎(chǔ)上，結(jié)合一測多評法，以綠原酸為參照成分，同時測定藥材中松脂醇二葡萄糖苷、綠原酸、京尼平苷酸的含量。張婷等[53]以葛根素為參照成分，建立參芎養(yǎng)心顆粒指紋圖譜并結(jié)合一測多評法測定制劑中阿魏酸、橙皮苷、丹酚酸B、甘草酸銨、五味子醇甲、葛根素的含量，結(jié)果表明該方法準(zhǔn)確、靈敏。

5 結(jié)語

綜上所述，隨著現(xiàn)代藥物分析技術(shù)的進(jìn)步與發(fā)展，中藥及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)也進(jìn)一步得到了提高。但目前我國中藥制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)仍與國際藥品標(biāo)準(zhǔn)差距較大。因此，建構(gòu)科學(xué)、全面的中藥及其制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)評估體系，需應(yīng)用現(xiàn)代色譜技術(shù)來提高中醫(yī)藥研究水平，從而保證用藥安全，這也將有助于中藥的現(xiàn)代化與國際化，推動我國中醫(yī)藥事業(yè)實(shí)現(xiàn)可持續(xù)、健康發(fā)展。