李勍 王飛 韓豎霞

[摘要]目的 制定由迪瑞H-800尿干化學(xué)分析儀和IRIS IQ-200尿有形成分分析儀組成的全自動尿液分析工作站的復(fù)檢規(guī)則，并驗證該規(guī)則在臨床中的應(yīng)用效果。方法 使用該工作站對1715份標(biāo)本進行檢測，同時對每份標(biāo)本進行尿沉渣人工顯微鏡檢測。通過對兩種方法檢測結(jié)果的分析，制定本實驗室的尿液分析工作站復(fù)檢規(guī)則，并用300份標(biāo)本進行驗證。結(jié)果 通過對1715份標(biāo)本的檢測，以人工鏡檢結(jié)果為標(biāo)準，該尿液分析工作站檢測結(jié)果的假陰性率為1.22%，假陽性率為2.97%，復(fù)檢率為33.41%。應(yīng)用制訂的復(fù)檢規(guī)則對臨床標(biāo)本驗證結(jié)果的假陰性率為1.33%，假陽性率為1.66%，復(fù)檢率為35.33%。結(jié)論 本實驗室制定并驗證了全自動尿液分析工作站復(fù)檢規(guī)則，其假陰性率、假陽性率、復(fù)檢率均能滿足要求，該復(fù)檢規(guī)則可以應(yīng)用于臨床工作中。

[關(guān)鍵詞]尿液分析；IRIS IQ-200；復(fù)檢規(guī)則

[中圖分類號] R446.12 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）9（b）-0161-03

[Abstract] Objective To establish a re-examination rule for the automatic urine analysis workstation consisting of Derry H-800 urine dry chemical analyzer and IRIS IQ-200 urine forming analyzer， and to verify the application of this rule in the clinic. Methods A total of 1715 specimens were tested by using this workstation. At the same time， each specimen was examined by urine sediments microscopic examination. Through the analysis of the test results of two methods， re-examination rules of the laboratory′s urine analysis workstation were developed and validated with 300 specimens. Results The results of the microscopic examination were taken as standards based on the examination of 1715 specimens. The false negative rate of the test results of urine analysis workstation was 1.22%， the false positive rate was 2.97%， and the re-examination rate was 33.41%. The results of the clinical specimen validation by the application of the re-examination rules were as follows： the false negative rate was 1.33%， the false positive rate was 1.66% and the re-examination rate was 35.33%. Conclusion The laboratory has developed and validated the re-examination rules for automated urine analysis workstation. The false negative rate， false positive rate and re-examination rate all can meet the requirements. This re-examination rule can be applied in clinical practice.

[Key words] Urine analysis； IRIS IQ-200； Re-examination rules

尿液分析作為重要的醫(yī)學(xué)實驗室常規(guī)檢驗項目之一，在臨床疾病的診斷和治療中有著非常重要的用途。近年來，隨著醫(yī)學(xué)實驗室尿液分析自動化程度越來越高，很多檢驗工作者對儀器的依賴也越來越大。而在實際工作中，很多因素可以導(dǎo)致儀器結(jié)果出現(xiàn)假陽性或者假陰性。因此，建立適合自己實驗室的尿液分析復(fù)檢規(guī)則是很有必要的。本研究使用的儀器是由迪瑞H-800尿干化學(xué)分析儀和IRIS IQ-200尿有形成分分析儀組成全自動尿液分析工作站。本研究制定該工作站復(fù)檢規(guī)則遵循以下原則：①保證假陰性率盡可能的低；②在降低假陰性率的前提下降低假陽性率；③在滿足原則①、②的前提下，盡量降低復(fù)檢率，以便臨床報告時限（turn-around time，TAT）盡可能的縮短。

1資料與方法

1.1標(biāo)本來源

收集2017年3月湖北省中醫(yī)院住院的2015份患者尿液標(biāo)本進行考察，其中男1123份，女892份，年齡1～88歲，每份標(biāo)本20 ml。其中的1715份標(biāo)本用于制定規(guī)則，300份標(biāo)本用于驗證規(guī)則。以上標(biāo)本涵蓋本院住院部所有病房，包括腎病內(nèi)科、泌尿外科等。

1.2儀器與試劑

長春迪瑞H-800尿干化學(xué)分析儀及其配套試紙條；美國國際遙控影像集團公司（IRIS）的IQ-200尿有形成分分析儀、配套試劑及IQ質(zhì)控/調(diào)焦液（批號475-0060）；尿沉渣檢測離心管、離心機、OLYMPUS顯微鏡；Fast Read-10尿沉渣計數(shù)板。IQ-200尿有形成分分析儀嚴格按照儀器說明書進行調(diào)焦、質(zhì)控、樣本檢測。

1.3方法

1.3.1樣本檢測 所有樣本先用迪瑞H-800尿干化學(xué)分析儀及IQ-200尿有形成分分析儀檢測，IQ-200尿有形成分分析儀的結(jié)果經(jīng)有經(jīng)驗的檢驗技師進行識別修飾。同時將10 ml標(biāo)本進行人工顯微鏡鏡檢，于2 h內(nèi)檢測完畢。人工鏡檢法按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）[1]推薦的尿沉渣離心沉淀檢查法，準確量取新鮮尿10 ml，以相對離心力400 g條件下離心5 min。離心后，一次性吸棄上清尿液，留取離心管底部液體約0.2 ml。充分混勻，取適量滴入Fast Read-10尿沉渣板。管型以低倍（10×10）鏡視野全片至少20個視野所見的平均值報告；細胞以高倍（10×40）鏡視野至少10個視野所見的最低至最高數(shù)的范圍報告。每份標(biāo)本采用雙盲法報告結(jié)果（2名經(jīng)驗豐富的主管技師操作）。

1.3.2陽性判斷標(biāo)準 紅細胞、白細胞、透明管型超過參考范圍上限，或者出現(xiàn)病理性管型時，均為陽性。尿液干化學(xué)分析儀的RBC、WBC和PRO以“+/-”為弱陽性，“+～++++”為陽性。IQ-200尿有形成分分析儀的參考范圍為廠家提供由本實驗室驗證通過：①RBC：≤10個/μl（男），≤13個/μl（女）；②WBC：≤12個/μl（男），≤20個/μl（女）；③CAST：≤0.5個/μl。顯微鏡鏡檢有形成分參考范圍根據(jù)文獻[2]提供由本實驗室驗證通過，參考范圍如下：①RBC：0～4個/HP（男），0～9個/HP（女）；②WBC：0～5個/HP（男），0～12個/HP（女）；③CAST：0～偶見/LP。

1.3.3復(fù)檢規(guī)則的建立 遵循前言中提及的建立復(fù)檢規(guī)則的原則，本實驗室建立以下復(fù)檢規(guī)則：對照尿干化學(xué)結(jié)果和IQ-200尿有形成分分析儀圖像修飾后結(jié)果，在干化學(xué)弱陽性或者陽性時，IQ-200尿有形成分分析儀結(jié)果不相符者應(yīng)進行鏡檢，即尿蛋白陽性（+～++++）對應(yīng)管型陰性；隱血弱陽性或者陽性（+/-～+++）對應(yīng)尿紅細胞陰性；白細胞弱陽性或者陽性（+/-～+++）對應(yīng)尿白細胞陰性，出現(xiàn)以上情況時應(yīng)進行鏡檢。IQ-200尿有形成分分析儀結(jié)果陽性，而尿干化學(xué)結(jié)果陰性應(yīng)鏡檢。尿沉渣圖片模糊不清、不易辨認的需鏡檢。腎病科及泌尿科患者無論結(jié)果如何均應(yīng)鏡檢。與患者病情不符，臨床醫(yī)生提出要求者需鏡檢。

1.3.4復(fù)檢規(guī)則的評估 運用復(fù)檢規(guī)則，對300例驗證標(biāo)本進行分析，計算假陽性率、假陰性率及復(fù)檢率。

2結(jié)果

2.1本實驗室尿液分析工作站復(fù)檢規(guī)則的假陰性結(jié)果

全自動尿液分析工作站干化學(xué)檢查弱陽性或陽性，尿沉渣陰性共53例標(biāo)本進入復(fù)檢規(guī)則被正確檢出，即儀器結(jié)果陰性，人工鏡檢結(jié)果為陽性（假陰性）。其中紅細胞干化學(xué)弱陽性或陽性15例，白細胞干化學(xué)弱陽性或陽性9例，管型干化學(xué)陽性29例（表1）。

2.2本實驗室尿液分析工作站復(fù)檢規(guī)則的假陽性結(jié)果

全自動尿液分析工作站干化學(xué)陰性，尿沉渣陽性共106例標(biāo)本進入復(fù)檢規(guī)則被正確檢出，即儀器結(jié)果陽性，人工鏡檢結(jié)果為陰性（假陽性）。其中紅細胞干化學(xué)陰性36例，白細胞干化學(xué)陰性45例，管型干化學(xué)陰性25例（表2）。

2.3本實驗室尿液分析工作站的復(fù)檢率

在1715份標(biāo)本的檢測過程中，有32份標(biāo)本的圖片模糊不清、不易辨認，需要顯微鏡鏡檢，其占全部標(biāo)本的1.87%（32/1715）。綜合2.1及2.2中通過復(fù)檢規(guī)則的標(biāo)本數(shù)據(jù)及以上32份標(biāo)本，應(yīng)用復(fù)檢規(guī)則后，得到整體復(fù)檢率為33.41%[（344+197+32）/1715]。

2.4未進入復(fù)檢規(guī)則標(biāo)本的實際假陰性率和假陽性率

另有21例假陰性標(biāo)本未進入復(fù)檢規(guī)則，被漏檢，即干化學(xué)及沉渣結(jié)果均陰性，人工鏡檢為陽性的標(biāo)本21例，故本研究制定的復(fù)檢規(guī)則應(yīng)用后的假陰性率為1.22%（21/1715）。同理，另有51例假陽性標(biāo)本未進入復(fù)檢規(guī)則，故本研究制定的復(fù)檢規(guī)則應(yīng)用后的假陽性率為2.97%（51/1715）。

2.5驗證實驗結(jié)果

應(yīng)用300份標(biāo)本驗證本實驗室制定的復(fù)檢規(guī)則，假陰性標(biāo)本4例，假陰性率：1.33%；假陽性標(biāo)本5例，假陽性率：1.66%；共復(fù)檢106例，復(fù)檢率：35.33%。

3討論

IQ-200尿沉渣分析儀采用平面流式細胞技術(shù)、高速攝影成像、自動粒子識別技術(shù)的測定原理，通過尿液中有形成分的外形等特性對每種微粒成分進行分類，其特異性、敏感性較高，這是IQ-200自動化的優(yōu)點[3]。本研究選取的1715份標(biāo)本中，有21份標(biāo)本未進入復(fù)檢規(guī)則為假陰性，假陰性率是1.22%，其中有12份為白細胞漏檢，研究進一步通過瑞氏染色發(fā)現(xiàn)其中有8份標(biāo)本中的白細胞為淋巴細胞，另外9份標(biāo)本為紅細胞漏檢；這21份標(biāo)本中的細胞鏡檢結(jié)果均<18個/HP，無1例腎病漏檢。51份標(biāo)本為假陽性，假陽性率為2.97%，其中既有結(jié)晶、真菌孢子誤認為紅細胞和白細胞，也有黏液絲誤認為管型的。

在第一階段實驗，即1715份標(biāo)本的檢測中，復(fù)檢規(guī)則中未納入“腎病科及泌尿科患者都應(yīng)鏡檢”這一條，而在第二階段驗證實驗時采用了這條復(fù)檢規(guī)則，最終導(dǎo)致假陽性率有所下降，而復(fù)檢率有所上升。

目前應(yīng)用于臨床實驗室的檢測尿液有形成分的自動化設(shè)備主要有兩種，一種是以SYSMEX UF系列為代表的尿流式細胞分析系統(tǒng)，另一種是以IRIS IQ-200為代表的機器視覺尿有形成分分析系統(tǒng)。這兩種不同檢測原理的儀器各有利弊[4]。本研究使用的儀器是由迪瑞H-800尿干化學(xué)分析儀和IRIS IQ-200尿有形成分分析儀組成全自動尿液分析工作站，應(yīng)用復(fù)檢規(guī)則后假陰性率為1.33%，而其他機器視覺尿有形成分分析系統(tǒng)的研究在應(yīng)用復(fù)檢規(guī)則后的假陰性率為1.07%[5]、0.8%[6]、0.75%[7]，尿流式細胞分析系統(tǒng)的研究在應(yīng)用復(fù)檢規(guī)則后的假陰性率為1.34%[8]，1.3%[9]。本研究在制定尿液分析的復(fù)檢規(guī)則時，要求假陰性率盡量小，但到底小到什么程度為宜卻沒有明確規(guī)定[10-12]，不同研究者在制定尿液分析復(fù)檢規(guī)則時，均采用血液分析復(fù)檢規(guī)則中要求的假陰性率<5%[13-15]。本研究結(jié)果提示，相對于血液分析復(fù)檢而言，尿液分析復(fù)檢耗時更少，鏡檢操作更便捷，臨床工作中應(yīng)該更嚴格地制定復(fù)檢規(guī)則，提高復(fù)檢率，進而降低假陰性率。

綜上所述，尿液分析復(fù)檢規(guī)則的假陰性率必須<2%才能應(yīng)用于臨床實驗室。

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