禹子鳳

我國目前茶產(chǎn)品質(zhì)量安全較為突出的是農(nóng)藥殘留、重金屬元素、有害微生物等超標問題。茶葉是一種葉用的經(jīng)濟作物。在茶樹生長旺季，特別是病蟲害發(fā)生的旺季，為提高茶葉的產(chǎn)量和質(zhì)量，茶農(nóng)需要用化學(xué)農(nóng)藥防治病蟲害。但一些茶農(nóng)不按規(guī)定的用藥量、用藥次數(shù)、用藥方法和安全間隔期施藥甚至將不允許在茶樹上使用的劇毒、高毒農(nóng)藥拿來使用，由此產(chǎn)生了非常嚴重的社會問題。

昌寧縣茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，茶葉生產(chǎn)加工技術(shù)和推廣力度都有很大提升，因此開展茶鮮葉農(nóng)藥殘留檢測，加強茶樹種植管理和茶原料的監(jiān)管非常有必要。為此對昌寧縣主要產(chǎn)茶區(qū)進行抽樣檢查茶葉中的有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量，以監(jiān)管和提高昌寧縣茶產(chǎn)品質(zhì)量安全水平。選用RP-410農(nóng)殘速測儀對樣品進行隨機檢測。

1茶葉中農(nóng)藥殘留的現(xiàn)狀

1.1農(nóng)藥的種類

農(nóng)藥根據(jù)其用途可以分為殺蟲劑、殺瞞劑、殺菌劑、除草劑以及植物生長調(diào)節(jié)劑等根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)又可分為有機氯殺蟲劑、有機磷殺蟲劑、擬除蟲菊酷類和氨基甲酸酷類殺蟲劑等。重點介紹一下有機磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。

1.1.1有機磷農(nóng)藥

有機磷農(nóng)藥為殺蟲劑、殺蝸劑，使用較廣泛，多數(shù)易氧化、水解、異構(gòu)化。有機磷農(nóng)藥引起中毒的作用機理是抑制了體內(nèi)的膽堿酷酶，使其失去了分解乙酞膽堿的能力，從而造成體內(nèi)乙酞膽堿的積累，刺激了中樞神經(jīng)系統(tǒng)，使各項功能失調(diào)，引起生理紊亂，因此對茶葉中有機磷農(nóng)藥殘留的檢測是十分必要的。

1.1.2氨基甲酸酯類農(nóng)藥

氨基甲酸酷類農(nóng)藥毒作用機理與有機磷農(nóng)藥相似，主要是抑制膽堿酯酶活性，使酶活性中心絲氨酸的羥基被氨基甲?；?，因而失去酶對乙酞膽堿的水解能力。氨基甲酸酯類農(nóng)藥不需經(jīng)代謝活化，即可直接與膽堿酯酶形成疏松的復(fù)合體。由于氨基甲酸酷類農(nóng)藥與膽堿酯酶結(jié)合是可逆的，且在機體內(nèi)很快被水解，膽堿酯酶活性較易恢復(fù)，故其毒性作用較有機磷農(nóng)藥中毒為輕。但多數(shù)氨基甲酸酯類農(nóng)藥，在施用后不長時間內(nèi)就會被降解為相應(yīng)的代謝產(chǎn)物，其代謝產(chǎn)物通常具有與母體氨基甲酸酯類農(nóng)藥相同或更強的生物活性。氨基甲酸酯類農(nóng)藥可經(jīng)呼吸道、消化道侵入機體，也可經(jīng)皮膚粘膜緩慢吸收，主要分布在肝、腎、脂肪和肌肉組織中。

2檢測方法

2.1檢測原理

根據(jù)有機磷和氨基甲酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下膽堿酯酶催化碘化硫代丁酰膽堿水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。

2.2試劑的配置

2.2.1 pH8.0緩沖溶液：分別取11.9g無水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀，用1000ml蒸餾水溶解

2.2.2 顯色劑：分別取160mg二硫代二硝基苯甲酸和15.6mg碳酸氫鈉，用20ml緩沖溶液溶解，4℃冰箱中保存。

2.2.3 底物：取25.0mg硫代乙酰膽堿，加3.0ml蒸餾水溶解，搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩１４嫫诓怀^兩周。

2.2.4 乙酰膽堿酶：根據(jù)酶的活性情況，用緩沖溶液溶解，3min的吸光度變化△A0值應(yīng)控制在0.3以上。搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩１４嫫诓怀^四天。

3分析步驟

3.1樣品處理

選取采摘的茶樹鮮葉樣品，沖洗干凈，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，放入燒杯中，加入5ml緩沖溶液，振蕩1min～2min，倒出提取液，靜置3min～5min，待用。

3.2對照溶液測試

先于試管中加入2.5ml緩沖溶液，再加入0.1ml酶液、0.1ml顯色劑，搖勻后于37℃放置16min。加入0.1ml底物搖勻，此時檢測液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值△A0。

3.3樣品溶液測試

先于試管中加入2.5ml樣品提取液，其他操作與對照液測試過程相同，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值△At。

4結(jié)果計算及結(jié)果判斷

4.1結(jié)果計算

抑制率（%）=[（△A0-△At）/△A0]×100

式中：

△A0—對照溶液反應(yīng)3min的吸光度變化值；

△At—樣品溶液反應(yīng)3min的吸光度變化值。

4.2結(jié)果判定

結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，當茶鮮葉樣品提取液對酶的抑制率≥50%時，表示茶鮮葉中有高劑量有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在。需重復(fù)檢驗2次以上。。

通過結(jié)果分析得出，在隨機抽取的昌寧縣8個主要產(chǎn)茶區(qū)的茶樹鮮葉選用RP-410農(nóng)殘快速檢測儀進行檢測，未發(fā)現(xiàn)有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留超標的現(xiàn)象。

RP-410農(nóng)殘速測儀對測定有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量具有很高的效率，用時較短，操作方便簡潔。但僅限于檢測有機磷與氨基甲酸酯類兩類，且高農(nóng)殘才能反應(yīng)出來，低殘留的科學(xué)依據(jù)性不明顯。因此做好茶葉農(nóng)殘的防控更為重要，可采取以下措施：堅決杜絕茶葉農(nóng)殘源頭，禁用茶園不能使用的農(nóng)藥；茶園大力示范推廣無農(nóng)殘的生物防治技術(shù)；實行科學(xué)用藥，酌情使用高效、低毒、低殘留的化學(xué)農(nóng)藥；加強無公害茶葉、茶葉綠色食品、有機茶生產(chǎn)基地建設(shè)；強化茶葉農(nóng)殘檢測監(jiān)控。

（作者單位：678100 云南保山昌寧縣茶葉技術(shù)推廣站）