*
1.福建省明溪縣醫(yī)院,福建 明溪 365200;2.福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,福建 福州 350122
厚樸為木蘭科植物厚樸(MagnoliaofficinalisRehd.etWils.)或凹葉厚樸(MagnoliaofficinalisRehd.etWils. subsp.biloba(Rehd.etWils.)Law)的干燥干皮、根皮及枝皮,為國家二級保護(hù)中藥材植物[1-2]。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為中品,其后歷代本草均有記載,并載入歷版《中國藥典》,在我國已有兩千多年藥用歷史[3]。厚樸主產(chǎn)于四川、湖北等省份,凹葉厚樸主要分布于福建、浙江、江西等省。近年來國內(nèi)外對厚樸的研究不斷深入,在國內(nèi)外用于多種疾病的治療,新的藥效又不斷被發(fā)現(xiàn),尤其是其較好的抗病毒、抗腫瘤、防齲、抗菌的藥效,越來越受到人們的重視。
福建省天然分布和栽培的主要為凹葉厚樸,也有少量引種培育[5],是福建省道地藥材,其性溫,味苦、辛,具燥濕消痰,下氣除滿的功效,為我國傳統(tǒng)的芳香化濕中藥,用于濕滯傷中,骯痞吐瀉,食積氣滯,腹脹便秘,痰飲喘咳[3-4],治腹脹、嘔吐、胃病、瀉痢和咳嗽氣喘等癥[5]。藥理研究表明厚樸還具有廣譜抗菌作用[6]。另外,厚樸栽培簡便,資源豐富。由于對厚樸進(jìn)行了大規(guī)模的提前采收,導(dǎo)致好貨難找,中藥材市場混亂,頻發(fā)質(zhì)量問題,從而使臨床療效下降。因此,對厚樸的枝皮和干皮進(jìn)行一系列生藥鑒定研究,旨在為閩產(chǎn)厚樸的正確鑒別,以及進(jìn)一步的研究、開發(fā)應(yīng)用及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)鑒定提供參考,也為后期開展相關(guān)的研究以及將來開發(fā)利用提供參考,使厚樸具有更大的社會效益和更廣泛的開發(fā)前景。
1.1 材料 厚樸的枝皮和干皮采于福建省三明市明溪縣胡坊鎮(zhèn)福西村,經(jīng)福建中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室黃澤豪副教授鑒定為木蘭科凹葉厚樸(Magnoliaofficinalissubsp. biloba)的干燥枝皮、干皮。
1.2 儀器 生物顯微鏡(YS100 日本尼康公司)、照相機(jī)(E0S 60D 佳能公司)、連續(xù)變倍體視顯微鏡(JSZ4 南京江南光電集團(tuán)股份有限公司)、快速開蓋萬能高速粉碎機(jī)(DFY-C-500 溫嶺市林大機(jī)械有限公司)、手機(jī)(魅族mx5)、顯微測量尺、載玻片、蓋玻片、直尺、切片刀、鑷子、擦鏡紙、吸水紙、酒精燈等。
1.3 試劑 合氯醛試液、濃鹽酸、1%間苯三酚試液、蒸餾水。
2.1 性狀鑒別 通過眼觀、手摸、鼻聞、口嘗等簡單方法,鑒別藥材的外觀性狀,包括形狀、大小、色澤、表面特征、質(zhì)地、斷面、氣、味、水試、火試等[7]。干品藥材直接觀察并記錄其性狀特征。
2.2 顯微鑒別 應(yīng)用顯微技術(shù)對厚樸的枝皮和干皮進(jìn)行顯微分析,包括組織鑒定和粉末鑒定。組織鑒定是通過觀察厚樸的切片鑒別其組織構(gòu)造特征;粉末鑒定是通過觀察厚樸的干皮及其干品的粉末制片對其細(xì)胞分子及內(nèi)含物的特征進(jìn)行鑒定。
在此采用傳統(tǒng)的徒手切片、表皮撕取等方法進(jìn)行制片,分別對厚樸的皮(枝皮、干皮)進(jìn)行顯微鑒別觀察;干品藥材在進(jìn)行打粉過篩后進(jìn)行粉末制片觀察。觀察結(jié)果做好細(xì)胞大小、細(xì)胞后含物等測量及鑒別并及時拍照和做好數(shù)據(jù)記錄。
實驗中涉及的徒手切片、粉末制片兩種制片方法,其具體如下。
2.2.1 徒手制片 取新鮮厚樸的枝皮進(jìn)行徒手切片,裝片,必要時用水合氯醛進(jìn)行透化處理,或可加鹽酸-間苯三酚試液進(jìn)行染色,而后即可在顯微鏡下觀察,該方法較方便快捷。
2.2.2 粉末制片 取藥材粉末少許分別進(jìn)行加蒸餾水的不透化處理和加水合氯醛的透化處理,并分別進(jìn)行觀察,必要時加鹽酸-間苯三酚試液進(jìn)行染色。
3.1 厚樸枝皮
3.1.1 性狀鑒別 皮薄呈單筒狀,外表面灰棕色或灰褐色,粗糙,較易剝落,有明顯橢圓形皮孔和縱皺紋,刮去粗皮者顯黃棕色。內(nèi)表面黃棕色,較平滑,具細(xì)密縱紋。嚼后殘渣較多。氣香,味辛辣、微苦。如圖1所示。
3.1.2 顯微鑒別 ①木栓層由數(shù)列細(xì)胞組成,木栓層細(xì)胞壁木化,栓內(nèi)層為石細(xì)胞環(huán)層,約1~3列石細(xì)胞組成。②皮層較寬,皮層散有油細(xì)胞及石細(xì)胞,有的石細(xì)胞呈分枝狀,層紋隱約可見,少見油細(xì)胞,橢圓形,壁稍厚,內(nèi)含油狀物。③韌皮部射線寬1~3列細(xì)胞,向外漸變寬,韌皮纖維束較少,壁較厚。如圖2所示。
3.2 干皮
3.2.1 性狀鑒別 干皮呈卷筒狀或雙卷筒狀,長25~35 cm,厚0.2~0.7cm。外表面灰棕色或灰褐色,粗糙,有時呈鱗片狀,較易剝落,內(nèi)表面黃棕色,較平滑,具細(xì)密縱紋。質(zhì)堅硬,不易折斷。氣香,味辛辣、微苦。如圖3所示。
3.2.2 顯微鑒別
3.2.2.1 干皮橫切面組織構(gòu)造特征(徒手切片) ①木栓由10余列細(xì)胞組成,有的可見落皮層,落皮層較薄,木栓層細(xì)胞壁木化,木栓形成層中含黃色棕色物質(zhì),栓內(nèi)層為石細(xì)胞環(huán)層,約3~8列石細(xì)胞組成。②皮層較寬,皮層散有多數(shù)油細(xì)胞及石細(xì)胞群,可見石細(xì)胞呈分枝狀,層紋隱約可見,油細(xì)胞橢圓形,壁稍厚,內(nèi)含油狀物。③韌皮部射線向外漸變寬,韌皮纖維束眾多,壁較厚,油細(xì)胞頗多,單個散在或2~5個相連。如圖4所示。
3.2.2.2 粉末 顯微特征粉末棕色。①石細(xì)胞較多,呈橢圓形、卵圓形、類方形或不規(guī)則分枝狀,直徑10~60 μm,壁較厚,厚約至20 μm,孔溝較少,有時可見層紋。②纖維直徑15~30 μm, 壁較厚,有的呈波浪形或一邊呈鋸齒狀,孔溝不明顯,木化。③油細(xì)胞較多,單個散在,橢圓形或類圓形,直徑25~70 μm,壁稍厚,胞腔內(nèi)含黃棕色油滴狀物。④可見木栓細(xì)胞,壁薄而平直,較長,多層重疊。如圖5所示。
通過分析厚樸的枝皮和干皮的性狀鑒別與顯微鑒別的實驗結(jié)果、查閱相關(guān)文獻(xiàn)比較可得:閩產(chǎn)厚樸枝皮橫切面與干皮橫切面的顯微特征基本一致,但是,枝皮橫切面顯微特征中油細(xì)胞較少,大多單個散在;韌皮纖維束較少。張淑潔等對[8]厚樸化學(xué)成分及其現(xiàn)代藥理研究進(jìn)展,發(fā)現(xiàn)厚樸中含有厚樸酚、和厚樸酚等化學(xué)成分,這些成分具有抗氧化、抗菌、抗炎鎮(zhèn)痛等現(xiàn)代藥理作用,這可能是干皮藥用價值更高的原因所在。實驗結(jié)果中厚樸干皮性狀鑒別與張朝民[9]在厚樸常見偽品的鑒別檢驗中關(guān)于厚樸干皮性狀鑒別的描述較一致。李水福等[10]在市場厚樸的質(zhì)量亟待重視,林仁禮[11]研究厚樸及其偽品黃杞的鑒別,從他們的研究結(jié)果中發(fā)現(xiàn)厚樸的干皮的橫切面顯微以及粉末顯微特征中有的薄壁細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)含有草酸鈣方晶。在厚樸的干皮的橫切面顯微以及粉末顯微特征未發(fā)現(xiàn)草酸鈣方晶,筆者推測可能是由于厚樸產(chǎn)地不同或其生長年限不同導(dǎo)致這一現(xiàn)象。
近年來,厚樸也頻繁出現(xiàn)偽品,筆者通過查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)主要有山玉蘭來源為木蘭科植物山玉蘭(MagnoliadalavayiFraneh.)的干燥樹皮[9],黃杞皮來源為胡桃科植物黃杞(EngelhardiaroxburghianaWall.)的干燥樹皮[11],大泡通皮來源為五加科植物白背鵝掌柴(Schefflerahypoleuca(Kurz) Harms)的干燥皮[9],合歡皮來源于豆科植物合歡(AlbiziajulibrissinDurazz)的干燥樹皮[12]。由于其形態(tài)特征相似性,造成大量偽品代替或冒充正品,在中藥市場上流通銷售。厚樸在中藥材市場中的需求量很大,同時厚樸是福建省道地藥材,也是國家重點保護(hù)的中藥材[2,13],市售品有其它產(chǎn)地或不同品種的混淆品需要鑒別。中藥材市場中發(fā)現(xiàn)大量偽品代替或冒充正品,故對其進(jìn)行生藥鑒定為將來開發(fā)利用提供參考,具有極大的意義。本文的研究為厚樸的道地正確鑒別,以及進(jìn)一步的研究、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供鑒定參考。
通過實驗的觀察可知:閩產(chǎn)厚樸枝皮、干皮的性狀鑒別分別為枝皮薄,單筒狀,外表面灰棕色或灰褐色,粗糙,內(nèi)表面黃棕色,斷面纖維性,嚼后殘渣較多;干皮呈卷筒狀或雙卷筒狀,外表面灰棕色或灰褐色,粗糙,較易剝落,內(nèi)表面黃棕色,質(zhì)堅硬,不易折斷。顯微特征為枝皮皮層油細(xì)胞少見,韌皮纖維束較少。干皮皮層散有多數(shù)油細(xì)胞及石細(xì)胞群。干皮粉末特征主要為石細(xì)胞多見,油細(xì)胞較多,壁稍厚;纖維較多,有的呈波浪形或一邊呈鋸齒狀。