武洪東
黃曲霉毒素是一種由黃曲霉菌以及寄生曲霉等霉菌經(jīng)過聚酮途徑的代謝產(chǎn)生的一種代謝產(chǎn)物,并不是一種單一的物質(zhì),而是結(jié)構(gòu)相似、功能相似的一類化合物的總稱,我們統(tǒng)一將其稱為黃曲霉極其衍生物,這是一種化學(xué)性質(zhì)極其穩(wěn)定的一種真菌毒素,毒性比較強(qiáng),誤食以后則會可能有致癌的風(fēng)險,這主要是由于食物在使用以后被人體消化吸收,而黃曲霉毒素具有極強(qiáng)的肝臟親和力,進(jìn)而會導(dǎo)致肝出血甚至是肝癌。
黃曲霉毒素的前處理技術(shù)
最初,國家對于黃曲霉毒素的重視程度并不是很高,但是隨著全國范圍內(nèi)黃曲霉毒素污染事件發(fā)生的越來越多,所以引起了世界范圍內(nèi)的相關(guān)機(jī)構(gòu)以及消費(fèi)者對于食品安全的重視,所以我們當(dāng)前對于食品檢驗技術(shù)必然會越來越嚴(yán)格,對于進(jìn)口產(chǎn)品,特別是農(nóng)產(chǎn)品以及農(nóng)產(chǎn)品衍生物,都有了限定的黃曲霉毒素含量標(biāo)準(zhǔn)。
在對于食品當(dāng)中的黃曲霉進(jìn)行檢測時,我們在對于黃曲霉毒素進(jìn)行處理之前,首先需要對黃曲霉毒素進(jìn)行提取與提純,我們采用的黃曲霉毒素提取的主要方法是萃取法,利用各種不同的溶劑對于我們已經(jīng)打碎的食物樣品當(dāng)中的黃曲霉毒素進(jìn)行提取,一般我們在進(jìn)行溶劑的選擇時,首先應(yīng)該考慮到當(dāng)前所需要提取的黃曲霉毒素自身的理化形式以及在提取完成以后下一步的提純工作應(yīng)該如何進(jìn)行,還有在后續(xù)的檢測過程當(dāng)中可能會出現(xiàn)的干擾。常見的萃取溶劑有甲醇以及乙腈的水溶液,除此之外,近年來最新出現(xiàn)的超臨界流體萃取技術(shù)和加壓流體萃取技術(shù)等技術(shù)也逐漸開始在黃曲霉毒素的萃取過程當(dāng)中開始普及。
黃曲霉毒素的檢測方法
對于黃曲霉毒素的檢測方法,我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的有四十多中,在此基礎(chǔ)上,最近有衍生出了一系列全新的檢測技術(shù),最常用的檢測方法是色譜法,除此之外還有以免疫學(xué)知識作為理論依據(jù)的檢測方法具有實驗的整體周期比較短、實驗使用到的設(shè)備比較簡單、檢測方法的特異性比較強(qiáng)以及靈敏度高、成本低等多項優(yōu)點,成為了當(dāng)前檢測黃曲霉毒素又一大有利方法,下面簡單介紹幾個比較常用的檢測方法:
薄層色譜法。對于黃曲霉毒素的檢測方法來講,薄層色譜法是最早開始用于其檢驗的方法之一,薄層色譜的原理是首先將樣品進(jìn)行提取、純化,然后進(jìn)行富集,對于富集的黃曲霉毒素,通過薄層色譜進(jìn)行分離,將分離以后的檢品用紫外光照射的方法進(jìn)行檢驗,在紫色熒光下,黃曲霉毒素的四個主要成分B1B2產(chǎn)生的是紫色的熒光,而G1G2產(chǎn)生的是綠色熒光,對于含量多少的確定,則主要依據(jù)熒光的強(qiáng)弱,薄層色譜具有設(shè)備簡單、操作簡便以及檢測成本比較低以及容易進(jìn)行定量檢測的優(yōu)點,缺點則主要是操作步驟比較繁瑣、靈敏度比較低而且對實驗員的損傷比較大。
液相色譜法。我們主要介紹的是高效液相色譜法,這也是當(dāng)前我們分析檢測黃曲霉毒素最常用的一種方法,主要的實驗原理是利用反相高效液相色潽對于經(jīng)過提取和提純的待檢樣品進(jìn)行分離,然后通過熒光檢測器在某一個特定的波長下進(jìn)行波長的測定,相比薄層色譜,熒光檢測器的選擇性更加優(yōu)良、靈敏度也更高,但是有一點需要注意的是要先對黃曲霉毒素進(jìn)行衍生化反應(yīng)形成穩(wěn)定衍生物。
熒光分光光度法。我們所謂的熒光分光光度檢測法,主要是首先設(shè)置一個免疫親和柱,然后用這個親和柱來對于黃曲霉毒素的提取液進(jìn)行凈化,,然后再利用碘液以及溴水進(jìn)行衍生化反應(yīng),這一步主要是能夠使當(dāng)前熒光度本身并不是很高的黃曲霉毒素最終能夠成為具有穩(wěn)定熒光形式的穩(wěn)定形式,然后利用特定波長的激發(fā)光,對于產(chǎn)品當(dāng)中四種黃曲霉毒素的總含量進(jìn)行檢測。
我們都知道的是黃曲霉毒素是具有強(qiáng)毒性和強(qiáng)致癌性的物質(zhì),而且近年來黃曲霉污染導(dǎo)致的人體發(fā)病越來越常見,我們?yōu)榱四軌蛴行П苊恻S曲霉毒素對于人體健康進(jìn)一步造成損害,我們必須提出更加嚴(yán)密的檢測方案以及更加嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn),因為標(biāo)準(zhǔn)的嚴(yán)格也就意味著我們需要更加嚴(yán)要求的檢測方案,當(dāng)前科技的發(fā)展正為我們的檢測技術(shù)進(jìn)步提供的技術(shù)基礎(chǔ),當(dāng)前我們最主要需要進(jìn)行提高的是檢測技術(shù)的準(zhǔn)確性以及穩(wěn)定性。